大中型豬場豬偽狂犬病抗體檢測與分析

梁 喬

（1.遼寧省動物疫病預防控制中心，遼寧 沈陽 110164；2.遼寧省動物醫(yī)學研究院，遼寧 沈陽 110164）

豬偽狂犬病（Pseudorabies,PR），又稱Aujeszky氏病，是由偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起各種年齡豬產(chǎn)生發(fā)熱、流產(chǎn)、繁殖障礙等主要病理特征的一種病毒性傳染病[1]。感染后引起死亡率最高的是易感染母豬產(chǎn)下的哺乳期仔豬[2]。種豬出現(xiàn)繁殖障礙，母豬則容易出現(xiàn)早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎等癥狀，成年豬一般呈隱性感染，通常不會出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，但生產(chǎn)性能會降低，引起免疫抑制造成多種疾病的混合感染[3]。該病的流行將給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失。目前絕大多數(shù)商品化的偽狂犬病疫苗被證實是gE基因缺失苗，廣泛使用的是Bartha-k61株[4]，因此免疫的豬只是沒有gE基因抗體的。通過gB抗體檢測試劑盒能夠確定豬的免疫狀態(tài)，經(jīng)過免疫后，gE抗體檢測試劑盒能有效辨別該豬是經(jīng)過免疫的還是被野毒感染的，進而分析遼寧地區(qū)大中型豬場豬偽狂犬病免疫抗體水平，進一步有效防控遼寧地區(qū)大中型豬場的偽狂犬病。1 材料和方法

1.1 血清的來源

該檢測中的血清全部來自于區(qū)域一、區(qū)域二、區(qū)域三不同規(guī)?；i場，被檢血清均為隨機采集，試驗時間為2018年4—6月，據(jù)了解豬場全部免疫過偽狂犬病疫苗。

1.2 豬偽狂犬病抗體檢測所用的檢測試劑盒

IDEXX PRV-gE和IDEXX PRV-gB抗體檢測試劑盒，由美國IDEXX公司生產(chǎn)，購自北京愛德士生物科技有限公司。

1.3 主要設備

37 ℃溫箱型號：SPX-250、imark酶標儀、Thermo Scientific Heraeus Pico離心機、PN-960型號的洗板機、單道移液器、多道移液器、振蕩器、蒸餾水等。

1.4 檢測方法

利用阻斷ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）的方法，具體操作步驟詳見說明書。

1.5 結(jié)果判定

陰性對照平均值A（650）值減去陽性對照平均值A（650），其差必須大于或等于0.3。若S/N值小于或等于0.6，樣品為PRV陽性；若S/N值小于或等于0.70但大于0.60，判為可疑需重測；若S/N比值大于0.70，樣品則為PRV陰性。

2 結(jié)果與分析

2.1 大型豬場豬偽狂犬病gE抗體和gB抗體檢測情況

由表1可知，區(qū)域三的gE抗體陽性率最高，為36%，區(qū)域二的gE抗體陽性率為0；區(qū)域一的gB抗體陽性率最低，為84%，區(qū)域二的gB抗體陽性率最高，為100%。

表1 大型豬場豬偽狂犬病gE抗體和gB抗體檢測結(jié)果

2.2 中型豬場豬偽狂犬病gE抗體和gB抗體檢測情況

由表2可知區(qū)域一隨機抽取了兩個中型豬場，檢測出gE抗體和gB抗體陽性率都高于其它地區(qū)，gE抗體平均陽性率為25%，gB抗體平均陽性率為86.67%；區(qū)域二的gE抗體陽性率為0，但是gB抗體陽性率較低，為76.7%；區(qū)域三的gE抗體陽性率為3.3%，gB抗體陽性率為73.3%。

表2 中型豬場豬偽狂犬病gE抗體和gB抗體檢測結(jié)果

2.3 不同地區(qū)豬群豬偽狂犬病gE和gB抗體檢測結(jié)果

由表3可知，區(qū)域二的免疫預防取得了較理想的效果，gB抗體陽性率達到91.3%，gE抗體陽性率為0；區(qū)域一、區(qū)域三的gB抗體陽性率較區(qū)域二偏低，gE抗體陽性率較區(qū)域二偏高。但整體來看，免疫抗體水平還是較高的。

表3 不同地區(qū)豬群豬偽狂犬病gE和gB抗體檢測結(jié)果

2.4 不同養(yǎng)殖規(guī)模豬群豬偽狂犬病gE和gB抗體檢測結(jié)果

由表4可知，大型豬場的gE和gB抗體陽性率分別為18.0%、90.0%；中型豬場的gE和gB抗體陽性率分別為13.3%、80.8%；總體來看，大型豬場gE和gB抗體陽性率略高于中型豬場。

表4 不同養(yǎng)殖規(guī)模豬群豬偽狂犬病gE和gB抗體檢測結(jié)果

3 結(jié)論與討論

偽狂犬病是一種豬的急性、傳染性疾病，仔豬的病死率很高，最高可達100%。在2012年國務院辦公廳印發(fā)《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）》[國辦發(fā)（2012）31號]文件中，偽狂犬病被列為中國優(yōu)先防制的二類動物疫病[5]。該病在世界范圍內(nèi)都有流行，診斷方法也不復雜，通過實驗室診斷（ELISA方法、間接免疫熒光診斷、RT-PCR診斷等）或臨床診斷都可判定[6]。目前，我國用于預防PRV的疫苗主要是gE基因缺失苗，通過血清學方法可以檢測出產(chǎn)生該種抗體是由于免疫或是感染[7]。配合該檢測的gE、gB試劑盒都經(jīng)過認證，能夠快速、方便、有效檢測出抗體，因此該檢測能夠如實反映疫苗免疫效果，對于偽狂犬病的預防和控制有重要現(xiàn)實意義。

豬偽狂犬病gE抗體檢測結(jié)果表明，270份豬血清中gE抗體陽性率為15.9%，其中區(qū)域一、區(qū)域二、區(qū)域三的陽性率分別為21.8%、0、23.8%，由于3個地區(qū)都免疫過gE基因缺失苗，因此出現(xiàn)gE抗體則表明該豬只感染豬偽狂犬病病毒，不難看出區(qū)域一、區(qū)域二、區(qū)域三中均有小程度的感染，同時發(fā)現(xiàn)大型場和中型場的感染率差距較小。

豬偽狂犬病gB抗體檢測結(jié)果表明，270份豬血清中gB抗體陽性率為85.9%，其中區(qū)域一、區(qū)域二、區(qū)域三的陽性率分別為85.5%、91.3%、81.3%，總體來講免疫抗體水平較高，免疫效果較好。同時發(fā)現(xiàn)大型場的gB抗體陽性率要稍微高于中型場。

豬偽狂犬病仍是畜牧業(yè)較重視的疫病之一，它能引起豬繁殖障礙、仔豬的神經(jīng)癥狀和高致死率[8]。特別對于大中型豬場來說如果感染將造成重大的經(jīng)濟損失，雖然我國在預防偽狂犬病方面做出了很多努力，也取得了明顯的成效，但還是無法徹底根除。因此，預防重于治療，加強免疫預防，定期進行豬偽狂犬病gE抗體和gB抗體檢測，提前制定合適的免疫程序和凈化方案才是根本的預防措施。