血細胞分析儀檢測血小板結果假性降低的原因及糾正探討

史融冰 丁文艷

【摘要】目的：探討血細胞分析儀檢測血小板結果假性降低的主要原因以及其糾正方法。方法：選擇2017年9月至2018年3月在我院進行血小板計數(shù)檢測2008例樣本為觀察對象，均采用Sysmex XS-800i五分類血細胞分析儀進行檢測，對檢測結果PLT<100×109/L且無血小板減少癥狀的樣本進行涂片瑞氏染色和手工顯微鏡計數(shù)復檢，并根據(jù)實驗室復檢標準分析血小板計數(shù)假性減少的原因和糾正方法。結果：2008例樣本中有66例出現(xiàn)血小板計數(shù)假性降低，其中，24例因EDTA依賴而出現(xiàn)假性降低，4例為血小板衛(wèi)星現(xiàn)象，8例冷凝集，21例巨大血小板現(xiàn)象，9例為標本采集不當。結論：血細胞分析儀檢測血小板計數(shù)具有一定的局限性，極易受抗凝劑、血小板形態(tài)缺陷、標本采集等因素影響，因此，臨床應規(guī)范實驗室檢測操作流程，并對PLT計數(shù)<100×109/L樣本嚴格按照復檢規(guī)則進行復查，最大限度避免血小板假性降低發(fā)生，提高檢測的準確性，以為臨床相關疾病診斷提供準確可靠的依據(jù)。

【關鍵詞】血細胞分析儀;血小板計數(shù);假性降低;原因;糾正方法

【中圖分類號】R181.3+2【文獻標識碼】B【文章編號】2095-6851（2019）01-238-01

血常規(guī)檢查是臨床疾病診斷及療效評估的常用輔助手段，可讓醫(yī)師了解到患者血清中血細胞狀態(tài)、血細胞數(shù)量以及血小板計數(shù)等情況。其中，血小板計數(shù)檢測結果是臨床診斷止血性、血栓性疾病的主要依據(jù)。因此，準確檢測血小板計數(shù)對臨床準確診治疾病具有重要的意義。近年，隨著檢測技術的不斷發(fā)展，血細胞分析儀因具有操作簡單、檢測快速、重復性強等優(yōu)點而廣泛應用于血小板計數(shù)檢測中，但是在實際臨床中受檢測原理、儀器局限性、操作誤差等不穩(wěn)定因素影響，極易出現(xiàn)假性血小板減少，引起疾病誤診誤治[1]?，F(xiàn)為進一步提高血小板計數(shù)檢測的準確性，本文將重點分析血細胞分析儀檢測血小板結果假性降低的主要原因，并針對性提出糾正方法。

1?資料和方法

1.1?研究對象

選擇2017年9月至2018年3月在我院進行血小板計數(shù)檢測2008例樣本為觀察對象，其年齡在1d～48歲，平均年齡26歲，均采用Sysmex XS-800i五分類血細胞分析儀進行檢測，對檢測結果PLT<100×109/L且無血小板減少癥狀體征的66例樣本進行涂片瑞氏染色和手工顯微鏡計數(shù)復檢。

1.2?方法

（1）血細胞分析儀檢測：2008例血樣本均置于含有乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）的抗凝試管中并搖勻，在采集的2h內用Sysmex XS-800i五分類血細胞分析儀進行血小板計數(shù)水平檢測。（2）復檢：對血細胞分析儀檢測PLT<100×109/L的樣本進行復檢，具體參考《全國臨床檢驗操作規(guī)程》的要求進行以下操作，①瑞氏染色鏡檢主要觀察血小板的形態(tài)結構和分布情況;②血小板稀釋液手工顯微鏡計數(shù)。若復檢結果與血細胞分析儀檢測結果一致的，可打印結果報告，但如果復檢結果與細胞分析儀的檢測結果不一致，則尋找其原因以及對應的糾正方法。

1.3?統(tǒng)計學方法

選用SPSS24.0軟件，計量數(shù)據(jù)以（x±s）表示，采取t檢驗。P<0.05，表示差異具統(tǒng)計學意義。

2?結果

2008例樣本中有66例出現(xiàn)血小板計數(shù)假性降低，占3.29%（66/2008）其中，24例因EDTA依賴而出現(xiàn)假性降低，4例因出現(xiàn)血小板衛(wèi)星現(xiàn)象，8例因樣本冷凝集，21例出現(xiàn)巨大血小板現(xiàn)象，9例為標本采集不當。尋找出影響血小板結果假性降低的原因后予以相應的糾正措施，糾正后的血小板計數(shù)結果較糾正前有顯著性的差異（p<0.05），具體見表1。

3?討論

血常規(guī)檢查是臨床檢驗的基本項目，在疾病診斷、鑒別診斷以及治療中發(fā)揮著重要的作用。其中血小板計數(shù)變化與機體的凝血、止血功能、狀態(tài)有密切的相關性，是機體檢測是否存在凝血、止血障礙的主要指標[2]。目前在臨床檢驗中，主要應用血細胞分析儀進行血小板計數(shù)檢測，具有高效、方便快捷等優(yōu)勢，能夠有效提高檢驗人員的工作效率。但是近年隨著檢測量的逐年增加，血小板計數(shù)出現(xiàn)假性降低的現(xiàn)象越來越多，引起了國內外檢測工作者的高度關注。血小板結果假性降低現(xiàn)象不僅會增加不必要的輔助檢查，加重患者的經濟負擔，還會導致誤診誤治，給病患的生理、心理帶來極大痛苦，造成醫(yī)療資源浪費。本研究結果顯示2008例樣本中有66例出現(xiàn)血小板計數(shù)假性降低，占3.29%，且發(fā)現(xiàn)其結果假性降低的原因既有人為操作不當，又有儀器、血樣本客觀原因。

3.1?抗凝劑的影響

國際血液學標準化委員會將乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）推薦作為血細胞分析儀檢測血小板計數(shù)的首選抗凝劑，這是因為EDTA-K2能夠與血液中的Ca2+相結合形成螯合物，使Ca2+不能發(fā)揮凝血作用，防止血樣本凝固，避免血小板凝集[3]。但是，近年越來越多的研究報道，在血常規(guī)檢測中應用EDTA抗凝劑可導致EDTA依賴性假性血小板減少現(xiàn)象，引起疾病誤診誤治。相關數(shù)據(jù)也顯示，在我國EDTA依賴性假性血小板減少癥的發(fā)生率約占0.08%～0.25%，而且隨著EDTA-K2抗凝劑的應用越來越廣泛，其發(fā)生率呈逐年上升的趨勢。此現(xiàn)象的具體發(fā)生機制仍不十分明確，但大部分學者認為與血小板膜的表面存有一些隱匿性的抗原密切相關，這些抗原可與血樣本中的自身抗體結合，造成血小板與纖維蛋白原聚集成團。因此，在臨床實際檢驗中，對于疑似EDTA依賴性假性血小板減少癥的樣本可通過使用枸椽酸鈉抗凝劑來糾正。此外，本研究還有4例血樣本因出現(xiàn)“血小板衛(wèi)星現(xiàn)象”而發(fā)生血小板計數(shù)假性減少。這主要是由于EDTA-K2能夠使血小板膜表面的糖蛋白Ⅱb/Ⅲa與中性粒細胞發(fā)生黏附性結合，故在顯微鏡下可見白細胞周圍有血小板黏附，俗稱為“衛(wèi)星現(xiàn)象”，易將其誤當成白細胞計數(shù)，造成血小板計數(shù)檢查結果減少。因此，對于血小板計數(shù)少于100×109/L的樣本需對其進行血涂片復檢。

3.2?血樣本采集不當

本研究66例血小板計數(shù)假性降低樣本中有9例是由于標本采集不當所導致的。采集樣本時若操作不當易造成血管壁破損，使凝血因子進入到血液樣本中產生血凝塊導致血小板檢測結果偏低;與此同時，當血樣本量采集不足（≤1.5ml）時，血細胞分析儀只能吸取一部分的樣本，導致全血象計數(shù)成比例減少，此外樣本被稀釋也會使血小板假性降低現(xiàn)象出現(xiàn)。因此，在臨床中應加強對護理人員、檢驗人員進行培訓，并做好檢驗前質量控制，盡量避免因樣本凝集、樣本被稀釋、樣本量不足而引起血小板假性降低，以保證檢測結果準確。

3.3?血標本病理因素

本研究結果還顯示，有21例樣本因血小板形態(tài)巨大，8例因樣本冷凝集現(xiàn)象而出現(xiàn)血小板假性降低。當受檢者伴有高血壓、糖尿病、血液系統(tǒng)疾病時可加快血小板的凝集速度或易使血小板的體積偏大。而當血小板的體積超過24fl時，血細胞分析儀無法將其納入到血小板的計數(shù)范圍內，使檢測的血小板計數(shù)顯著減少。故當臨床遇到此種情況時，可通過采用手工血小板計數(shù)法復檢來糾正。此外，若受檢者血液中存在過高效價的冷凝集素可使血紅細胞、血小板發(fā)生凝集，造成血細胞分析儀檢測到血小板計數(shù)明顯偏低。因此，對于冷凝集血樣本，臨床可通過采集前預處理或者采集后溫水水浴進行糾正。本研究最后也證實，針對血小板假性降低的原因進行相應的糾正后，受檢者的血小板計數(shù)結果均較糾正前有顯著的改善。

綜上，血細胞分析儀檢測血小板計數(shù)歲具有快捷方便、價格低等優(yōu)點，但該檢查方法無法很好地識別血小板形態(tài)以及其凝集情況，極易造成血小板結果假性降低現(xiàn)象出現(xiàn)，進而影響臨床疾病診治。因此，臨床應規(guī)范實驗室檢測操作流程，并對PLT計數(shù)<100×109/L樣本嚴格按照復檢規(guī)則進行復查，最大限度避免血小板假性降低發(fā)生，提高檢測的準確性，以為臨床相關疾病診斷提供準確可靠的依據(jù)。

參考文獻：

[1]?錢兵，尹丹丹.不同血細胞分析儀計數(shù)血小板的差異性分析[J].實用醫(yī)技雜志，2014，21（9）：986-987.

[2]?張紅榮.血涂片鏡檢對血小板假性減少的診斷價值分析[J].河南醫(yī)學研究，2018，27（9）：1679-1680.

[3]?趙一兵.EDTA-K2依賴性假性血小板減少患者檢測分析[J].中國民康醫(yī)學，2017，29（9）：39-40.