分子技術(shù)在臨床微生物檢驗中的應(yīng)用探討

任曉東，劉昌亞

（云南省昭通衛(wèi)生學(xué)校，云南 昭通 657000）

為了分析針對病癥，本次臨床觀察實驗研究選取我校附屬醫(yī)院所收治的病患120例作為本次臨床觀察基本研究對象，以下為本次臨床觀察研究的相關(guān)內(nèi)容?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年2月～2018年3月我校附屬醫(yī)院采用分子生物科學(xué)技術(shù)檢驗常見的病原微生物臨床基線資料，作為本次臨床實踐研究對象。

1.2 研究方法

運用回顧性分析法，對我校附屬醫(yī)院2017年2月～2018年3月采用分子生物科學(xué)技術(shù)檢驗常見的病原微生物臨床基線資料，進行臨床分析與研究，評價在微生物的檢驗工作方面分子生物科學(xué)技術(shù)的臨床應(yīng)用意義及價值。

1.3 觀察指標(biāo)

在本次臨床實踐研究當(dāng)中，對常規(guī)的RT-PCR與熒光定量的RT-PCR實際檢驗效果進行實時化的比較分析。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

利用Excel 2007軟件進行數(shù)據(jù)整理，再利用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計描述及推斷分析，計數(shù)資料采用x2檢驗進行統(tǒng)計分析，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié) 果

在本次臨床實踐研究中，從常規(guī)的RT-PCR與熒光定量的RT-PCR實際檢驗結(jié)果所作出的對比分析中可發(fā)現(xiàn)：相比較于常規(guī)的RT-PCR（55.83%），熒光定量的RT-PCR陽性檢出率（76.67%）相對較高，略占據(jù)一定臨床應(yīng)用優(yōu)勢，組間對比數(shù)據(jù)；差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 常規(guī)的RT-PCR與熒光定量的RT-PCR實際檢驗結(jié)果對比 [n（%）]

3 討 論

伴隨著生物科學(xué)技術(shù)不斷的進步發(fā)展，在微生物臨床檢驗領(lǐng)域中已經(jīng)研究出了聚合酶鏈反應(yīng)、生物傳感器、基因芯片等技術(shù)，這些技術(shù)均具有著較高敏感性、特異性、精密度、自動化等優(yōu)勢，在微生物臨床檢驗工作當(dāng)中均發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，能夠最大限度地滿足臨床診療的基本需求[1]。聚合酶鏈反應(yīng)在生命工程科學(xué)領(lǐng)域中屬于常見性分子技術(shù)，主要是由變性、延伸及退火等步驟所構(gòu)成，以實現(xiàn)迅速擴增DNA指數(shù)級效果[2]。經(jīng)過大量的臨床實踐研究證明，PCR反應(yīng)基本原理類似于DNA的天然復(fù)制，其整個循環(huán)過程如下：首先是變性步驟，處于93～95℃高溫環(huán)境時，雙鏈DNA逐漸解離成單鏈；其次是退火步驟，處于最適溫度時，引物配對結(jié)合于單鏈DNA模板特定的區(qū)域；最后是延伸步驟，處于72℃溫度環(huán)境時，DNA聚合酶TaqDNA以引物的3'末端為起始點，以dNTP為底物，堅持堿基互補配對的原則，最終合成了DNA模板鏈，并將其當(dāng)成互補的新鏈。在微生物臨床檢驗方面，相比較于常規(guī)分子技術(shù)，其具有較高的靈敏度，細(xì)菌最低檢出率可達3個。生物傳感器技術(shù)主要是把分子生物的診斷技術(shù)及傳感技術(shù)有效融合，進而形成一種新型分析技術(shù)在微生物臨床檢驗領(lǐng)域當(dāng)中有效應(yīng)用，為臨床診療提供最具精準(zhǔn)度的檢驗依據(jù)?；蛐酒夹g(shù)是以人類基因組計劃為基礎(chǔ)，逐漸形成的一種新型分子技術(shù)，是高通量的檢驗技術(shù)，主要包含芯片實驗室、蛋白質(zhì)及基因芯片等，是目前微生物臨床檢驗領(lǐng)域當(dāng)中應(yīng)用最為廣泛的一類分子技術(shù)。在一定程度上，這種分子技術(shù)在微生物臨床檢驗工作中具有較為明顯的自動化優(yōu)勢，檢驗效果較為理想，可作為微生物臨床檢驗工作最佳的分析技術(shù)。綜上所述，在微生物臨床檢驗領(lǐng)域，聚合酶鏈反應(yīng)、生物傳感器、基因芯片等技術(shù)在微生物臨床檢驗工作當(dāng)中均具有不同的技術(shù)特征及優(yōu)勢，均具有較高的臨床應(yīng)用價值。