趨化因子CCL28研究進展及其與腫瘤的關系*

梁 天 ，朱曉明

1.空軍軍醫(yī)大學唐都醫(yī)院婦產(chǎn)科(西安710038)；2.空軍軍醫(yī)大學基礎醫(yī)學院(西安710032)

趨化因子是一大類小分子量蛋白質(zhì)(相對分子量8000～10000)，由67～127個氨基酸組成，通過與特定細胞上相應的趨化因子受體結(jié)合，參與白細胞向血管、淋巴器官或其他組織的定向遷移，從而介導炎癥過程，同時它也參與機體發(fā)育、免疫穩(wěn)態(tài)等過程。目前，基于N末端2個半胱氨酸殘基之間的氨基酸個數(shù)的位置，已有接近50個趨化因子被發(fā)現(xiàn)，根據(jù)其N末端2個半胱氨酸殘基之間的氨基酸個數(shù)的位置，它們可被分為CXC、CC、X3C、(X)CC和CX五類[1]。近年來，有關研究發(fā)現(xiàn)它與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關，現(xiàn)綜述如下。

1 CCL28的發(fā)現(xiàn)與結(jié)構(gòu)

2000年Wang[2]等從鼠的腎臟分離出來一種新的CC趨化因子，命名為CCL28，并克隆到了它的開放閱讀框，該序列共編碼了127個氨基酸，其中N末端的22個氨基酸是信號肽。在序列相似性方面，不同物種之間的CCL28具有高度同源性，克隆的兔CCL28基因與綿羊和野豬的76.7%和77.4%同源，推導的氨基酸序列則與綿羊和野豬的56.8%、56.8%同源。研究發(fā)現(xiàn)，與CCL28氨基酸序列相似的CC家族趨化因子為：CCL27/CTACK、CCL25/TECK、CCL17/TARC、CCL120/MIP-3α、CCL19/MIP-3β和CCL21/6Ckine。

雖然CCL28是CC家族的一員，但它在基因定位與蛋白質(zhì)序列上具有一定的獨立性。①CCL28的基因位于5q染色體上，而CC家族其他成員的基因均位于17q11.2。②CCL28的保守序列有6個半胱氨酸殘基，而該家族其他成員只有4個。③成熟的CCL28蛋白第四個保守的半胱氨酸殘基后面有28個氨基酸組成的C端，但在該家族的其他成員序列上并沒有發(fā)現(xiàn)到。

2 CCL28的表達與生理作用

CCL28又被稱為粘膜相關上皮趨化因子(Mucosae-as-sociated epithelia chemokine，MEC)，由上皮細胞分泌，其mRNA主要分布在涎腺、腮腺、乳腺、氣管、胃腸道和前列腺上，少量分布在外周血的白細胞和其他粘膜組織上。相關研究還證實[3]，CCL28存在于母-胎界面的蛻膜基質(zhì)細胞和滋養(yǎng)細胞上，并且促炎性細胞因子會上調(diào)蛻膜基質(zhì)細胞中CCL28的表達，其通過與受體CCR10的結(jié)合以自分泌或旁分泌的方式來增強滋養(yǎng)細胞MMP-2的活力進而促進滋養(yǎng)細胞的浸潤功能，通過與受體CCR3結(jié)合誘導蛻膜基質(zhì)細胞的凋亡。2012年的一項研究表明[4]，CCL28在缺氧誘導的肝癌細胞侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮作用。HIF-1α和CCL28在肝癌組織中mRNA表達增高,且表達水平呈高度相關性。缺氧可通過HIF-1α上調(diào)肝癌細胞CCL28表達,且呈時間依賴性。下調(diào)CCL28則會導致缺氧誘導的肝癌細胞侵襲力減弱。

CCL28是CCR10的配體，而同時IgA抗體選擇性表達CCR10，因此，CCL28可以選擇性吸收IgA ASC，這在粘膜組織IgA免疫漿母細胞的定位中起到重要的作用。Kunkel Eric J等[5]研究發(fā)現(xiàn)，在人體胃腸道、唾液腺和粘膜淋巴相關組織中，IgA大量表達，而記憶T細胞或記憶B細胞不表達CCR10；扁桃體漿母細胞和約70%的循環(huán)IgA漿母細胞表達CCR10，歸巢和定位于表達CCL28的粘膜上皮組織。CCL28也是CCR3的配體，其通過CCR3對人外周血的嗜曙紅細胞有趨化性作用。還有研究表明[6]，CCL28具有一定的抗微生物活性，它可以殺死化膿性鏈球菌、綠農(nóng)桿菌等。

3 CCL28與腫瘤

近年來，隨著對CCL28研究的逐漸深入，人們對于CCL28與腫瘤之間的關系也有了越來越多的認識。

3.1 CCL28與消化道腫瘤 2006年DIMBERG[7]等通過免疫組化檢測發(fā)現(xiàn)，直腸癌與結(jié)腸癌中的CCL28蛋白水平明顯低于相應非癌組織。2009年孫穎[8-9]等在對比正常腮腺和多形腺瘤中、正常唾液腺和涎腺腺淋巴瘤時運用實時熒光定量PCR的方法發(fā)現(xiàn)腫瘤組CCL28 mRNA的表達明顯低于正常組CCL28mRNA，同時免疫組織化學染色顯示的結(jié)果也與之一致。這可能是由于CCL28mRNA合成中的相關轉(zhuǎn)錄因子表達受影響，導致CCL28的表達異常，進而有利于腫瘤逃避機體的免疫監(jiān)視，因此CCL28可作為切入點促使相關淋巴細胞聚集，以趨化因子CCL28及其受體分子為控制靶點，通過激活趨化因子CCL28受體的信號傳導通路來調(diào)節(jié)趨化因子系統(tǒng)的功能，從而終止或逆轉(zhuǎn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展。

2013年周瑩等[10]利用實時定量PCR和ELISA的方法對缺氧條件下肝癌細胞HCCLM3趨化因子CCL28表達水平進行檢測，發(fā)現(xiàn)了CCL28在缺氧環(huán)境下水平的增高，同時肝癌組織中CCL28的表達增高與術(shù)后復發(fā)有一定關系。2014年任麗[11]在研究肝癌缺氧微環(huán)境下CCL28升高機制時得出缺氧通過HIF1α介導了肝癌細胞CCL28升高。CCL28具有多種生物學功能,一方面可促進肝癌細胞的增殖、遷移和粘附;另一方面可通過與Treg細胞表面的受體CCR10發(fā)生相互作用而對Treg細胞進行趨化。2016年RenLi等[12]發(fā)現(xiàn)抑制HIF1α可扭轉(zhuǎn)低氧誘導CCL28增加。這些發(fā)現(xiàn)可能為HCC治療提供新的潛在治療靶點。

3.2 CCL28與婦科腫瘤 2013年林鳳娟等[13]構(gòu)建出高表達CCL28基因的乳腺癌細胞，并將其與未導入CCL28基因的乳腺癌細胞進行對比試驗，結(jié)果表明，CCL28可以促進乳腺癌細胞增殖，抑制乳腺癌細胞的凋亡，并且過表達CCL28的乳腺癌細胞克隆形成能力得到顯著提高，其機制可能是乳腺癌細胞系MDA-MB-231中過表達CCL28后導致Bcl-2的表達上調(diào)。2014年龔迪和等[14]利用免疫組化方法對150例乳腺癌細胞上的CCL28的表達情況進行檢測，結(jié)果表明，CCL28在乳腺癌組織中表達量高，而在癌旁正常乳腺組織中表達較少，這證實了CCL28與乳腺癌的發(fā)生有一定關系。2017年YangXiaoLi等[15]研究表明CCL28可以激活細胞內(nèi)蛋白激酶(MAPK)信號通路，因而上調(diào)抗凋亡蛋白Bcl - 2和抑制細胞粘附蛋白β-catenin促進乳腺癌細胞增殖和轉(zhuǎn)移，然而，過表達的ccl28不影響轉(zhuǎn)移相關蛋白基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2、MMP9、VEGF的表達。同時，分析來自動物模型的組織樣本也表明,在乳腺癌中過表達的CCL28與增強的pERK表達和減少β-catenin表達有關。因此，CCL28通過ERK/MAPK介導的抗凋亡和轉(zhuǎn)移信號通路參與乳腺癌的進展，并且CCL28的拮抗劑和MAPK信號傳導途徑也許能協(xié)同應用于治療乳腺癌患者。

3.3 CCL28與呼吸系統(tǒng)腫瘤 2016年HuangGuiChun等[16]發(fā)現(xiàn)CCL28高表達的肺腺癌細胞形成的腫瘤生長速度快，血管密度高，而CCL28低表達的肺腺癌細胞的腫瘤形成率低，血管密度低，其機制可能是CCL28作為腫瘤缺氧誘導的趨化因子，通過CCR3靶向促進肺腺癌的血管生成。2018年張楠等[17]選取肺癌患者(觀察組)150例及同時體檢的健康者(對照組)150例,采用化學發(fā)光微粒子免疫檢測法檢測發(fā)現(xiàn)肺癌患者體內(nèi)的ccl28蛋白水平明顯低于健康體檢者體內(nèi)的CCL28蛋白水平，這證實了CCL28與肺癌有一定的關系。

4 展 望

CCL28主要由上皮細胞分泌，作為CCR10和CCR3的配體，介導CCR10﹢免疫細胞(CD4+/CD8+T細胞、IgA分泌細胞和嗜酸性粒細胞)遷徙歸巢至相應組織并參加局部免疫應答反應，同時也具有一定的抗微生物活性。

CCL28作為近年來新發(fā)現(xiàn)的趨化因子，大量研究表明其在不同腫瘤中的表達異于正常組織，同時腫瘤的發(fā)生發(fā)展與其含量有一定關系，但其究竟是促癌因子還是抑癌因子仍未有定論，研究CCL28在腫瘤生成中的調(diào)控的具體作用機制有助于明確腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程，為腫瘤的診療提供理論依據(jù)，這將成為今后的研究重點。