抗核抗體和抗雙鏈DNA檢測在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的意義

董葭 吉林省人民醫(yī)院檢驗科 （吉林 長春 130021）

內(nèi)容提要： 目的：探究在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中進(jìn)行抗核抗體和抗雙鏈DNA檢測的臨床價值。方法：選取45例在2017年1月～2019年1月本院收治的系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者（觀察組），并選擇來本院健康體檢者45例（對照組）。運用間接免疫熒光法對血清抗核抗體進(jìn)行檢測，運用免疫印跡法對雙鏈DNA抗體進(jìn)行檢測。結(jié)果：與對照組相比，觀察組抗核抗體陽性率（84.44%）、雙鏈DNA抗體陽性率（68.89%）均較高（P＜0.05）。結(jié)論：系統(tǒng)性紅斑狼瘡存在較高的抗核抗體和抗雙鏈DNA抗體陽性率，對患者進(jìn)行抗核抗體和抗雙鏈DNA聯(lián)合檢測、動態(tài)觀察，能夠?qū)崿F(xiàn)對系統(tǒng)性紅斑狼瘡的有效診斷，可為臨床治療提供可靠的參考依據(jù)。

系統(tǒng)性紅斑狼瘡屬于自身免疫性疾病，血清中有多器官非特異性抗體出現(xiàn)是該病的主要臨床特點，例如抗PT抗體、抗SSA、抗Sm抗體、抗ds-DNA及抗核抗體等。在關(guān)節(jié)、皮膚、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎小球等許多組織中沉積，且以抗核抗體為主的自身抗體形成的免疫復(fù)合物，會對超敏反應(yīng)進(jìn)行觸發(fā)，使廣泛的組織受到損傷，導(dǎo)致多種臨床表現(xiàn)出現(xiàn)[1]。在生理狀況下，部分人體內(nèi)會有少量的抗核抗體或其他相關(guān)抗體出現(xiàn)，然而對于系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者來說，他們的血液中經(jīng)常會有能夠?qū)?xì)胞核抗原成分產(chǎn)生直接針對作用的自身抗體存在[2]。遂本文主要探究在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中進(jìn)行抗核抗體和抗雙鏈DNA檢測的臨床價值。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

選取2017年1月～2019年1月本院收治的系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者45例（觀察組），并選擇來本院健康體檢者45例（對照組）作為觀察對象。觀察組，男26例，女19例，平均年齡（42.68±6.19）歲；對照組，男23例，女22例；平均年齡（44.17±7.12）歲。影響組間比較的兩組之間沒有差異，P＞0.05，可以予以比較。

1.2 方法

1.2.1采集標(biāo)本

采集所有受試者的清晨空腹靜脈血5mL，對靜脈血進(jìn)行離心處理，將血清有效分離，離心速度為3000r/min，離心時間為10min。

1.2.2檢測方法和指標(biāo)

通過間接免疫熒光法對抗核抗體進(jìn)行檢測，根據(jù)試劑盒的有關(guān)說明實施相關(guān)操作。①稀釋患者血清，稀釋比例為1:101，同時在18～25?C的環(huán)境中，和生物薄片上的Hep-2細(xì)胞核靈長類肝臟進(jìn)行共同孵育，孵育時間為0.5h，孵育完成以后，通過PBS緩沖液進(jìn)行沖洗處理，對沒有結(jié)合的非特異性物質(zhì)經(jīng)浸泡將其去除掉；②有效結(jié)合熒光素標(biāo)記抗人IgG抗體和生物薄片基質(zhì)，對其進(jìn)行二次孵育，孵育時間為0.5h，并對其實施沖洗浸泡；③甘油封片處理，在熒光顯微鏡的作用下對抗核抗體進(jìn)行仔細(xì)觀察。

通過免疫印跡法對抗雙鏈DNA和抗核抗體譜進(jìn)行檢測，根據(jù)試劑盒的有關(guān)說明實施相關(guān)操作。①對患者血清進(jìn)行有效稀釋，在18～25?C的環(huán)境中將其與預(yù)濕的膜條進(jìn)行共同孵育，孵育時間為0.5h，有效結(jié)合樣本中的抗原和抗體，并進(jìn)行3次洗滌，將沒有結(jié)合的抗原去除；②將堿性磷酸酶標(biāo)記的羊抗人IgG加到膜條上，并對其實施二次孵育，孵育時間為0.5h，孵育完成后對其進(jìn)行3次洗滌；③將無色底物液加入，并進(jìn)行10min的溫育，使用蒸餾水對其實施沖洗處理；④在結(jié)果判定板上妥善放置膜條，風(fēng)干以后通過EUROLINEScan軟件對結(jié)果進(jìn)行仔細(xì)判定。

1.3 觀察指標(biāo)

對比兩組抗核抗體、雙鏈DNA抗體陽性率情況。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

運用SPSS22.0統(tǒng)計學(xué)軟件，以n、%表示、行χ2檢驗，用P＜0.05表示結(jié)果有差異。

2.結(jié)果

兩組抗核抗體、雙鏈DNA抗體陽性率對比：與對照組相比，觀察組兩組抗核抗體、雙鏈DNA抗體陽性率均較高（P＜0.05），見表1。

3.討論

對于系統(tǒng)性紅斑狼瘡來說，其發(fā)病機制和自身免疫之間的關(guān)系十分密切，該病的主要發(fā)病人群為15～44歲的女性。因系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者體內(nèi)會有大量的循環(huán)免疫復(fù)合物產(chǎn)生，并在各個器官和組織中沉積，特別在腎臟中最多，因此容易出現(xiàn)狼瘡性腎炎，腎臟病變的發(fā)生會對系統(tǒng)性紅斑狼瘡的預(yù)后產(chǎn)生直接影響作用[3]。血清中有多種自身抗體分布是狼瘡性腎炎的典型癥狀，所以在診斷狼瘡性腎炎過程中，對抗體進(jìn)行檢測是一種十分有效的方法。對狼瘡性腎炎進(jìn)行診斷的傳統(tǒng)方法為腎活檢病理檢查，但是諸多患者不適合進(jìn)行腎組織活檢，所以根據(jù)對人體自身抗體進(jìn)行檢測的思路診斷狼瘡性腎炎，能夠?qū)⒑图膊≈委?、診斷和預(yù)后有關(guān)的血清學(xué)指標(biāo)找到，且其臨床替代價值十分顯著[4]。

在自身抗體中最為常見的是抗核抗體，且該抗體和疾病之間具有十分密切的關(guān)系。對于抗核抗體來說，它和任何動物細(xì)胞核之間均可以產(chǎn)生一定的反應(yīng)，同時主要在血清中存在。在大部分自身免疫性疾病中，抗核抗體均呈現(xiàn)為陽性狀態(tài)，特別在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中更加典型。因系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的吞噬細(xì)胞存在有限的吞噬作用，補體的異常增多了向細(xì)胞外釋放的核酸，最終使得諸多的抗核抗體產(chǎn)生[5]。除此之外，在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中，抗雙鏈DNA的特異性較高，它與DNA結(jié)合能夠?qū)δI小球抗原產(chǎn)生直接作用，并對系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者造成嚴(yán)重的腎損害，所以系統(tǒng)性紅斑狼瘡和抗雙鏈DNA之間也具有十分密切的關(guān)系[6]。

本文通過探究在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中運用抗核抗體和抗雙鏈DNA檢測的臨床價值，數(shù)據(jù)顯示，觀察組抗核抗體陽性率（84.44%）和抗雙鏈DNA陽性率（68.89%）均明顯高于對照組抗核抗體陽性率（0.00%）和抗雙鏈DNA陽性率（0.00%），（P＜0.05），表明抗核抗體和抗雙鏈DNA對系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷存在較高的特異性和敏感性。綜上所述，系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的抗核抗體和抗雙鏈DNA抗體陽性檢出率較高，對患者進(jìn)行抗核抗體和抗雙鏈DNA聯(lián)合檢測、動態(tài)觀察，能夠?qū)崿F(xiàn)對系統(tǒng)性紅斑狼瘡的有效診斷，同時在臨床治療過程中具有十分重要的指導(dǎo)意義。

表1. 比較兩組抗核抗體、雙鏈DNA抗體陽性率情況(n=45,n/%)