子宮蛻膜淋巴管與子癇前期的研究進(jìn)展

郭超梅，趙莉娜，陳丹玲，劉國成*

（廣州醫(yī)科大學(xué)附屬廣東省婦幼保健院，廣東 廣州 511400）

子癇前期是一種妊娠特有的疾病，對全球大約4%～5%的妊娠產(chǎn)生影響[1]。子癇前期是指妊娠期高血壓出現(xiàn)在妊娠20周或20周后，伴有一種或多種新的發(fā)病情況：蛋白尿，其他母體器官功能障礙（包括急性腎功能損傷、肝功能損傷伴或不伴右上腹痛、血液系統(tǒng)并發(fā)癥(血小板減少、彌漫性血管內(nèi)凝血、溶血等）、神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥（例如子癇，失明，中風(fēng)，陣攣，嚴(yán)重頭痛，持續(xù)視覺暗點，精神狀態(tài)改變）[2]。該疾病可突然病情惡化，導(dǎo)致母兒結(jié)局不良，嚴(yán)重威脅母兒生命安全[3]。除此之外，它還導(dǎo)致婦女未來發(fā)生心血管疾病、肝腎疾病和或糖尿病的風(fēng)險增加[4]。多年來，關(guān)于子癇前期的發(fā)病機(jī)制及病因存在多種學(xué)說，其中包括螺旋動脈重鑄不足、免疫耐受異常和胎盤發(fā)育不良等[5]。相關(guān)學(xué)者認(rèn)為子癇前期的致病源是胎盤而不是胎兒，因為葡萄胎患者也可能發(fā)生子癇前期，而目前唯一有效的治療方法是終止妊娠和娩出胎盤[6]。而底蛻膜是胎盤上的一小部分，在早孕期間，胚胎與子宮內(nèi)膜接觸的共同區(qū)域就是底蛻膜，蛻膜是母胎界面重要的一部分。目前關(guān)于非妊娠期子宮內(nèi)膜是否含有淋巴管存在爭議，但有研究表明與非妊娠期子宮內(nèi)膜相比，妊娠期子宮蛻膜淋巴管明顯增多[7]。有研究發(fā)現(xiàn)，子宮蛻膜中淋巴管生成缺陷可能參與了子癇前期的發(fā)病[8]?，F(xiàn)對子宮蛻膜淋巴管與子癇前期的研究進(jìn)展進(jìn)行闡述。

1 淋巴管標(biāo)志物

淋巴管標(biāo)生成標(biāo)志物對淋巴管的生成和遷移有重要作用，主要表達(dá)在淋巴內(nèi)皮細(xì)胞（lymPhatic endothelial cells，LECs）上，淋巴管生成標(biāo)志物也是一種淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞受體，關(guān)于LECs受體有很多，其中包括Prox1（ProsPerorelated homeobox transation factor 1）、LYVE-1（LymPhatic vessel hyaluronan recePtor-1）、PodoPlanin、VEGFR-3（(vascular endothelial growth factor recePtor-3）[9]和NRP2（NeuroPilin-2）等。

Prox1（普洛斯彼羅相關(guān)同源盒-1）是一種同源框架轉(zhuǎn)錄因子，它的分子量為83kDa，主要表達(dá)在細(xì)胞核中，它可以通過誘導(dǎo)細(xì)胞周期蛋白E和細(xì)胞細(xì)胞增殖[10]，從而改變淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的周期進(jìn)展，是淋巴管的維持和發(fā)育是必不可少的因子[11]。研究發(fā)現(xiàn)，Prox1在淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞中過表達(dá)可以使PodPPlanin和VEGFR3表達(dá)水平上調(diào)[12]，而Prox1缺失使淋巴管系統(tǒng)發(fā)育異常[13]。VEGF-C是誘導(dǎo)LECs增殖和趨化的一種因子Wigle, J T和Oliver, G的實驗發(fā)現(xiàn)，Prox1缺失的小鼠身上完全沒有淋巴管，因此他們提出Prox1是淋巴管發(fā)育不可缺少的因子[14]。VEGF-C（(vascular endothelial growth factor -C）可促進(jìn)從頸靜脈中芽發(fā)Prox1陽性淋巴管的發(fā)育和誘導(dǎo)LEC增殖和存活[15]。

LYVE-1即淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體-1，與CD44糖蛋白是同源膜蛋白，是淋巴管內(nèi)皮中透明質(zhì)酸的主要受體，主要表達(dá)在LECs的基底面?zhèn)€管腔面[16]。LYVE-1曾被認(rèn)為是最具特異性的淋巴管生成標(biāo)志物，可表達(dá)在各個系統(tǒng)組織中的LECs上，但是也有研究證實LYVE-1同時也可以在炎性組織、腫瘤和肝臟、脾臟的血管竇內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)[17]，提示LYVE-1特異性并不是特別好。有研究證明在妊娠期子宮上有大量淋巴管生成，而且蛻膜上的淋巴管有LYVE-1陽性表達(dá)[7]。Nicholas W. Gale等人在LYVE-1缺乏的小鼠身上發(fā)現(xiàn)淋巴管表型、結(jié)構(gòu)及功能均正常，提出LYVE-1并不是淋巴管生成和功能的必備條件[18]。

PodoPlanin也稱腎小球足突細(xì)胞膜蛋白，是跨膜糖蛋白的一種，分子鏈38kDa,由162個氨基酸組成[19]。PodoPlanin最早被發(fā)現(xiàn)表達(dá)在腎小球足突細(xì)胞中，它可特異性地表達(dá)在LECs上，在血管內(nèi)皮細(xì)胞中不表達(dá)，目前市場上關(guān)于PodoPlanin的商業(yè)單克隆抗體主要有D2-40、NZ-1、18H5、LPMab-10[19]。YuPing Wang等人的研究發(fā)現(xiàn)PodoPlanin在胎盤組織中有大量的陽性表達(dá)，而且子癇前期胎盤中PodoPlanin的表達(dá)比正常胎盤的顯著下降，PodoPlanin的低表達(dá)可能導(dǎo)致間質(zhì)體液穩(wěn)態(tài)改變和血管受損，引發(fā)病理妊娠[20]。目前過內(nèi)外利用PodoPlanin的商業(yè)單抗體D2-40來標(biāo)志淋巴管的研究比較常見，是比較穩(wěn)定的一種淋巴管標(biāo)志物。

VEGFR-3（血管內(nèi)皮生長因子受體-3）是血管內(nèi)皮生長因子家族中的一員，VEGFR-3主要在成人組織中的LECs和靜脈血管中表達(dá)，其信號通過連接VEGF-C或VEGF-D，可以誘導(dǎo)LECs的增殖和遷移，VEGF-C/D-VEGFR-3通路信號是淋巴管生成必不可少的信號[21]。Li, Ting等人的研究發(fā)現(xiàn)抑制VEGFR-3的mRNA表達(dá)會導(dǎo)致細(xì)胞不能分化成為LECs[22]。因此，VEGFR-3也是LECs的一個非常重要的標(biāo)志物。劉海濤等人利用VEGFR-3對子癇前期和健康孕婦的蛻膜進(jìn)行免疫組化，發(fā)現(xiàn)兩組孕婦蛻膜中均有有陽性表達(dá)，子癇前期孕婦蛻膜的VEGFR-3呈下降趨勢，他們提出VEGFR-3可能通過參與蛻膜的淋巴管形成從而參與子癇前期的發(fā)病機(jī)制。由于VEGFR-3同時在靜脈血管和淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞上均有表達(dá)，所以VEGFR-3對淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的特異性也是不夠的。

神經(jīng)纖毛蛋白2（NRP2）是神經(jīng)纖毛蛋白（NRPs）家族的一個亞型，NRP蛋白最早由S. Takagi等人發(fā)現(xiàn)在非洲爪蟾蜍的神經(jīng)組織上有表達(dá)[23]，是一種跨膜蛋白，同時也是非酪氨酸激酶[24]。NRP2是新發(fā)現(xiàn)的一種LECs受體，對胚胎脈管發(fā)育非常重要[25]。Tang, Xian-ling等的研究發(fā)現(xiàn)是NRP2的表達(dá)下調(diào)可以導(dǎo)致淋巴管的生成減少[26]。NRP2也是VEGFC/D的一種特異性受體，研究發(fā)現(xiàn)VEGFC/D-NRP2軸通路可以調(diào)控腫瘤中原有及新生淋巴管的生成[27]，同時NRP2也是VFGFR-3的協(xié)同受體調(diào)控LEC的芽發(fā)。目前對NRP2在淋巴管生長中的研究較少。

目前多用P R O X-1、LY V E-1、V E G F R-3、PodoPlaninProx1這幾個淋巴管形成受體對子宮內(nèi)膜和蛻膜進(jìn)行研究。但是由于PROX-1在目前國內(nèi)外暫時未見到對NRP2對子宮蛻膜淋巴管生成進(jìn)行研究。

2 子宮蛻膜淋巴管的形成

在受精卵著床后，滋養(yǎng)細(xì)胞穿透侵入子宮內(nèi)膜及血管，子宮內(nèi)膜開始蛻膜化形成蛻膜，出現(xiàn)蛻膜血管及淋巴管生成參與調(diào)節(jié)子宮螺旋動脈重塑[28]。滋養(yǎng)細(xì)胞具有很強(qiáng)的可塑性，它多種功能，包括參與和調(diào)控蛻膜血管生成和淋巴管的生成，重塑子宮螺旋動脈[28]。研究發(fā)現(xiàn)，人類滋養(yǎng)細(xì)胞有VEGF-C、VEGFR3和Ang2的廣泛表達(dá)，這些因子不但可以參與和調(diào)節(jié)血管的生成[29]，而且還主要參與了胚胎和成人組織的淋巴管發(fā)育[30]。早在18世紀(jì)，解剖學(xué)家已經(jīng)描述了懷孕期間盆腔淋巴管的增生，Donoghue等人在子宮內(nèi)膜中淋巴管的研究中發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜基底層淋巴管管徑較大，并且大部分淋巴管與螺旋小動脈密切伴行，并多與螺旋小動脈伴行，而功能層的淋巴管比較細(xì)和密度較小，子宮肌層也有淋巴管分布[31]。在用LYEV-1對蛻膜組織進(jìn)免疫染色顯示，與非妊娠狀態(tài)相比，妊娠期蛻膜淋巴管明顯增多[32]。Red-Horse,Kristy等人在實驗中發(fā)現(xiàn)與非妊娠子宮內(nèi)膜相比，人蛻膜含有較多淋巴管，但在妊娠老鼠蛻膜上沒有觀察到類似的反應(yīng)；他們把胎盤絨毛移植到SCID小鼠的乳房脂肪墊和腎臟包膜下，結(jié)果發(fā)現(xiàn)人類滋養(yǎng)細(xì)胞可以侵入腎包膜，并伴隨大量小鼠LECs浸潤和血管生成[33]。妊娠后，蛻膜中淋巴管在體外培養(yǎng)模型的免疫定位分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)人類妊娠與蛻膜中的淋巴管生成有關(guān)，人類滋養(yǎng)細(xì)胞可以誘導(dǎo)蛻膜中淋巴管的形成，有學(xué)者認(rèn)為胎盤觸發(fā)了蛻膜淋巴管循環(huán)的發(fā)展，推測其對妊娠期間維持體內(nèi)體液平衡和母胎免疫有重要作用[33]。

3 子宮蛻膜淋巴管與子癇前期

子宮蛻膜淋巴管的形成可能會影響螺旋動脈的重鑄。受精卵著床后，子宮血管系統(tǒng)會發(fā)生一系列變化以供應(yīng)胎兒的發(fā)育。淋巴管由第二個血管網(wǎng)絡(luò)組成，它在不同的過程中起作用，如間質(zhì)液體穩(wěn)態(tài)、適應(yīng)性免疫和消化。在其他系統(tǒng)中，血管的急劇變化伴隨著淋巴管的生成(淋巴管生長)[34]，因此提出妊娠期子宮蛻膜作為母胎界面的重要部分，也伴可能有淋巴管的生成[32]。Red-Horse, Kristy等人的研究發(fā)現(xiàn)妊娠期螺旋動脈重鑄的同時可能伴隨證蛻膜淋巴管的形成[33]。研究發(fā)現(xiàn)，淋巴管在人子宮內(nèi)膜功能層所有脈管系統(tǒng)中占13%；而在基底層中則占57%?；讓又卸鄶?shù)的的淋巴管與螺旋動脈緊密伴行，推測著床過程中的受精卵可能直接通過淋巴管接觸螺旋小動脈血管壁平滑肌細(xì)胞，調(diào)節(jié)小動脈的收縮和舒張和影響血流[35]。子癇前期的基本病理是全身小血管痙攣，內(nèi)皮損傷和局部缺血。H.Liu等人通過利用淋巴管生成標(biāo)志物PROX-1和VEGFR3對子癇前期和健康孕婦的蛻膜及胎盤行免疫組化和Western Blot檢測，發(fā)現(xiàn)它們胎盤中為陰性表達(dá)，但在蛻膜中陽性表達(dá)而且子癇前期蛻膜中的PROX-I和VEGFR3呈下降趨勢，研究者提出淋巴管生成發(fā)生在蛻膜而不是胎盤，它們認(rèn)為血管生成和淋巴管生成受損與子癇前期有關(guān)，特別是在蛻膜血管病變的存在下[8]。

妊娠是一種半異體移植的現(xiàn)象，妊娠的成功以否取決于母體的免疫耐受，特別是母胎界面的免疫耐受異常會導(dǎo)致子癇前期、自然流產(chǎn)等病理妊娠[36]。蛻膜自然殺傷細(xì)胞在螺旋動脈重建中起重要作用[36]，在人體中，子宮內(nèi)膜在蛻膜化過程中出現(xiàn)CD56+NK細(xì)胞，NK細(xì)胞是一種重要的淋巴細(xì)胞，CD56+NK細(xì)胞上有VEGFC表達(dá)，VEGFC具有獨特的誘導(dǎo)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的作用，同時CD56+NK細(xì)胞可以招募滋養(yǎng)細(xì)胞促進(jìn)體內(nèi)血管生成[37]。而淋巴管有重要的免疫監(jiān)視功能，如果淋巴管形成受損會導(dǎo)致免疫耐受受損，影響免疫細(xì)胞的運輸[38]，所以蛻膜中淋巴管的生成受損會影響NK細(xì)胞的運輸，導(dǎo)致母胎界面免疫耐受受損，引起子癇前期的發(fā)病。

4 結(jié) 語

目前的研究已經(jīng)證明人娠期子宮蛻膜中有淋巴管生成，但其形成的具體機(jī)制仍需要進(jìn)一步的研究，同時，淋巴管的形成可能影響螺旋動脈的重鑄及母胎界面的免疫耐受，導(dǎo)致子癇前期的發(fā)病，但是蛻膜上淋巴管與子癇前期的具體發(fā)病機(jī)制仍需要進(jìn)一步的研究?？偠灾?，蛻膜上淋巴管的形成對維持正常的妊娠有非常重要的作用。