宮頸癌組織中KGFR、TFPI-2的表達(dá)及臨床意義

郭瑞玲(安陽(yáng)市中醫(yī)院婦產(chǎn)科，河南 安陽(yáng) 455000)

近年來宮頸癌的發(fā)生率明顯的上升，流行病學(xué)研究認(rèn)為，我國(guó)宮頸癌的發(fā)病率可達(dá)274～483/10萬(wàn)人左右[1]。臨床上宮頸癌的發(fā)生發(fā)展，能夠?qū)е禄颊邿o瘤生存時(shí)間的縮短，嚴(yán)重降低患者的生存質(zhì)量[2]。

在研究宮頸癌的病情進(jìn)展機(jī)制的過程中可以發(fā)現(xiàn)，癌細(xì)胞調(diào)控相關(guān)因子的改變，能夠影響癌細(xì)胞的增殖、凋亡及分化等病理過程，進(jìn)而促進(jìn)宮頸癌的發(fā)生。角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體（KGFR）的表達(dá)能夠通過激活絡(luò)氨酸激酶，進(jìn)而促進(jìn)癌細(xì)胞內(nèi)腫瘤相關(guān)信號(hào)通路的上調(diào)，增加了癌細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)錄風(fēng)險(xiǎn)；組織因子途徑抑制物-2（TFPI-2）是重要的絲氨酸蛋白抑制家族成員，其能夠通過抑制癌細(xì)胞的增殖、促進(jìn)癌細(xì)胞的凋亡，進(jìn)而抑制早期惡性腫瘤的發(fā)生過程[3]。部分研究者報(bào)道了TFPI-2在胃癌或者食管癌患者病灶組織中的表達(dá)情況，認(rèn)為TFPI-2的表達(dá)濃度的下降能夠影響胃癌或者食管癌患者的病情轉(zhuǎn)歸，導(dǎo)致患者臨床病理分期的進(jìn)展[4，5]，但在宮頸癌患者中的研究不足。為了揭示KGFR、TFPI-2的表達(dá)與宮頸癌的關(guān)系，從而為臨床上宮頸癌患者的臨床診療提供參考，本次研究選取2016年1月至2018年1月我院保存的宮頸癌組織標(biāo)本56例，探討了不同腫瘤調(diào)控因子與宮頸癌病理學(xué)特征的相關(guān)性，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 組織標(biāo)本 選取2016年1月至2018年1月我院保存的宮頸癌組織標(biāo)本56例（宮頸癌組），同時(shí)選取正常宮頸組織35例（因子宮肌瘤或子宮腺肌癥而行子宮全切術(shù)）作為對(duì)照組，兩組受試者一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1，納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴均經(jīng)病理組織學(xué)確診；⑵患者臨床資料保存完整；⑶術(shù)前未行放化療等治療；⑷患者及家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴合并有其他惡性腫瘤者；⑵臨床資料不完整。

表1 兩組一般資料比較

1.2 檢測(cè)方法 所有組織標(biāo)本經(jīng)石蠟包埋后作連續(xù)切片，厚度約為4μm，采用免疫組化鏈霉卵白素一生物素復(fù)合體法 (strep avidin-biotin complex，SABC法)染色，二氨基聯(lián)苯胺(diamionben zidene，DAB)顯色。KGFR、TFPI-2蛋白通用型二抗以及SP試劑盒和DAB顯色盒均購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)開發(fā)公司。以陽(yáng)性片及PBS代替一抗分別作為陽(yáng)性及陰性對(duì)照，高倍顯微鏡下觀察KGFR、TFPI-2蛋白的表達(dá)情況，具體染色步驟嚴(yán)格按照SP試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.3 結(jié)果判斷 隨機(jī)選取5個(gè)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色為KGFR或TFPI-2表達(dá)陽(yáng)性，陽(yáng)性細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的比例≥30%為陽(yáng)性表達(dá)，否則為陰性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 19.0軟件，計(jì)量資料采用（）表示，比較使用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較使用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Spearman秩相關(guān)分析，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組中KGFR、TFPI-2陽(yáng)性表達(dá)情況比較 宮頸癌組KGFR陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于對(duì)照組 （P＜0.05），而TFPI-2陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于對(duì)照組（P＜0.05）。見表2和圖1。

表2 兩組中KGFR、TFPI-2陽(yáng)性表達(dá)情況比較

圖1 免疫組化染色圖

2.2 KGFR、TFPI-2表達(dá)與宮頸癌臨床病理特征關(guān)系 KGFR陽(yáng)性表達(dá)與宮頸癌TNM分期、分化程度有關(guān)（P＜0.05）；TFPI-2陽(yáng)性表達(dá)與宮頸癌TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05）。 見表 3。

2.3 相關(guān)性分析 將宮頸癌組織KGFR與TFPI-2表達(dá)進(jìn)行相關(guān)分析，結(jié)果顯示：KGFR與TFPI-2表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（rs=-0.599，P＜0.05），見表 4。

3 討論

在合并有高危HPV病毒感染的人群中，宮頸柱狀上皮病變的風(fēng)險(xiǎn)可顯著的上升，宮頸癌的發(fā)病率或者病死率等指標(biāo)均明顯惡化。特別是在經(jīng)濟(jì)條件差、多次流產(chǎn)病史或者過早性生活的患者中，宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)可進(jìn)一步的上升[6，7]。現(xiàn)階段臨床上宮頸癌患者綜合性治療措施治療后的病情緩解率仍然較低，5年內(nèi)的病死率仍然超過了25%[8]。免疫學(xué)方面的治療能夠在宮頸癌的綜合性治療過程中發(fā)揮重要的作用，而本研究對(duì)于宮頸癌患者病情組織中KGFR、TFPI-2的分析研究，不僅能夠?yàn)榻沂緦m頸癌的發(fā)病病因提供參考，同時(shí)還能夠?yàn)閷m頸癌的免疫方面的治療提供理論靶點(diǎn)。

KGFR是生長(zhǎng)因子家族成員，其羧基末端結(jié)構(gòu)包含了4個(gè)重復(fù)性的絡(luò)氨酸激酶區(qū)域，能夠結(jié)合上皮細(xì)胞膜上的糖蛋白配體，促進(jìn)癌細(xì)胞內(nèi)第二信使的激活。KGFR對(duì)于癌細(xì)胞內(nèi)的AKT或者M(jìn)APK信號(hào)通路的激活，能夠上調(diào)癌細(xì)胞DNA的轉(zhuǎn)錄活性，導(dǎo)致癌細(xì)胞浸潤(rùn)能力的增強(qiáng)。部分研究者報(bào)道了KGFR的表達(dá)與宮頸癌的關(guān)系，認(rèn)為KGFR能夠?qū)е聦m頸患者治療預(yù)后的惡化[9]，但對(duì)于EGFR的表達(dá)與宮頸癌患者臨床病理特征的關(guān)系研究不足；TFPI-2是絲氨酸激酶家族成員，其對(duì)于宮頸上皮細(xì)胞周期的調(diào)控作用，能夠穩(wěn)定G0/S期比例，抑制癌細(xì)胞快速跨越G0期，并能夠提高癌細(xì)胞的分化成熟能力。TFPI-2還能夠影響到癌細(xì)胞的凋亡過程，通過激活細(xì)胞內(nèi)的BCL-2蛋白的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)癌細(xì)胞的凋亡[10]。部分研究者揭示了TFPI-2與惡性腫瘤的關(guān)系[11]，但相關(guān)臨床病理特征的分析研究不足。

表3 KGFR、TFPI-2表達(dá)與宮頸癌臨床病理特征關(guān)系

表4 相關(guān)性分析

免疫組化結(jié)果分析可以發(fā)現(xiàn)，KGFR在宮頸癌病灶組織中的表達(dá)陽(yáng)性率明顯的上升，而TFPI-2蛋白的表達(dá)陽(yáng)性率明顯的下降，提示KGFR、TFPI-2蛋白的異常表達(dá)均能夠參與到宮頸癌的發(fā)生發(fā)展過程，通過薈萃分析不同的臨床文獻(xiàn)，筆者認(rèn)為這主要與 KGFR、TFPI-2 的下列作用有關(guān)[12，13]：⑴KGFR的上升能夠?qū)е掳┘?xì)胞的生物學(xué)特征的改變，導(dǎo)致癌細(xì)胞的浸潤(rùn)能力和增殖能力的提升；⑵TFPI-2的表達(dá)下降能夠?qū)е掳┘?xì)胞的凋亡比例的下降，提高了癌細(xì)胞對(duì)于基底膜組織的侵襲能力。孫彥珍等[14]研究者也認(rèn)為，在宮頸癌病灶組織中，TFPI-2蛋白的表達(dá)陽(yáng)性率可平均下降35%以上，同時(shí)在合并有明顯的宮旁組織浸潤(rùn)或者3年內(nèi)病死率較高的患者中，TFPI-2蛋白的表達(dá)陽(yáng)性率可進(jìn)一步的下降。免疫組化染色分析可見，KGFR主要表達(dá)于宮頸癌上皮細(xì)胞異型性較為明顯的區(qū)域，特別是在癌細(xì)胞質(zhì)或者細(xì)胞核周邊，KGFR的染色程度較深，推測(cè)KGFR的表達(dá)可能在影響癌細(xì)胞的異型性方面發(fā)揮了重要的作用。在探討KGFR、TFPI-2的表達(dá)與宮頸癌患者臨床病理特征的關(guān)系時(shí)可以發(fā)現(xiàn)在臨床分期較晚或者癌細(xì)胞分化程度較低的患者中，KGFR的表達(dá)陽(yáng)性率可明顯的上升，提示了KGFR的表達(dá)能夠顯著影響宮頸柱狀上皮細(xì)胞的分化成熟能力，同時(shí)KGFR的表達(dá)上升還能夠?qū)е掳┘?xì)胞對(duì)于臨近正常組織的浸潤(rùn)程度的加深，促進(jìn)宮頸癌患者臨床分期的進(jìn)展；在臨床分期較晚或者發(fā)生了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌患者中，TFPI-2的表達(dá)濃度顯著的下降，提示了TFPI-2的下降對(duì)于宮頸癌患者臨床病理特征的影響，這主要考慮由于TFPI-2的表達(dá)濃度下降能夠?qū)е掳┘?xì)胞對(duì)于淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞的粘附能力的改變[15]。

綜上所述，KGFR在宮頸癌患者中的表達(dá)明顯的上升，而TFPI-2的表達(dá)明顯的下降，二者的異常表達(dá)均能夠影響到宮頸癌患者的臨床病理特征的進(jìn)展。后續(xù)臨床研究可以增加對(duì)于KGFR、TFPI-2與宮頸癌患者臨床預(yù)后的關(guān)系研究。