• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    奶牛用頭孢洛寧乳房注入劑(干乳期)的安全性評(píng)價(jià)

    2019-01-28 09:32:54華偉毅劉義明徐飛路永強(qiáng)孔梅王海挺黃慧麗王宏磊吳連勇李秀波
    關(guān)鍵詞:洛寧乳區(qū)體細(xì)胞

    華偉毅,劉義明,徐飛,路永強(qiáng),孔梅,王海挺,黃慧麗,王宏磊,吳連勇,李秀波

    ?

    奶牛用頭孢洛寧乳房注入劑(干乳期)的安全性評(píng)價(jià)

    華偉毅1,劉義明1,徐飛1,路永強(qiáng)2,孔梅3,王海挺3,黃慧麗1,王宏磊1,吳連勇3,李秀波1

    (1中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所,國(guó)家飼料藥物基準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室/農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100081;2北京市畜牧獸醫(yī)總站,北京 100012;3齊魯動(dòng)物保健有限公司,濟(jì)南 250100)

    【目的】確定自主研發(fā)新獸藥——頭孢洛寧乳房注入劑(干乳期)對(duì)靶動(dòng)物的安全性。【方法】選擇經(jīng)產(chǎn)和初產(chǎn)健康泌乳期奶牛各6頭,入選前30日內(nèi)未接受過(guò)全身性或乳房?jī)?nèi)抗生素給藥,產(chǎn)奶量在15-35 kg。給藥前1日、給藥當(dāng)日(0日),記錄各試驗(yàn)?zāi)膛5娜债a(chǎn)奶量、直腸溫度,并采集奶樣進(jìn)行體細(xì)胞檢測(cè)。采樣時(shí)先用清水沖洗乳房,用75%乙醇對(duì)乳頭及周圍進(jìn)行消毒,待酒精揮發(fā)后,手工擠奶,棄去前三把奶后,采集奶樣于滅菌試管中,貼好標(biāo)簽,低溫(4℃)保存并于6 h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。給藥當(dāng)天,待奶牛擠完奶后,先用消毒毛巾清潔各乳區(qū),再用消毒藥液浸泡乳頭約30 s,然后進(jìn)行乳頭內(nèi)灌注給藥。灌注時(shí)輕輕推壓活塞,將藥物緩緩注入乳池內(nèi),使藥物均勻分布。按照推薦劑量,每頭奶牛的4個(gè)乳區(qū)分別單次注入頭孢洛寧乳房注入劑(干乳期)一支(含頭孢洛寧250 mg)。給藥后1日、3日、5日、7日和10日對(duì)4個(gè)乳區(qū)各采集奶樣。記錄奶牛標(biāo)識(shí)、觀察時(shí)間、試驗(yàn)日期和時(shí)間、每頭奶牛日產(chǎn)奶量及體溫等參數(shù)。檢測(cè)乳樣中體細(xì)胞數(shù)(SCC),對(duì)給藥當(dāng)日(0日)和給藥后第10日各采集的乳樣進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查。將各奶樣接種至選擇性培養(yǎng)基分離各種病原菌。分離菌株經(jīng)純化培養(yǎng)后,依據(jù)菌落形態(tài)、染色特征、生化特點(diǎn)鑒定其種類。主要分離金黃色葡萄球菌、鏈球菌(無(wú)乳鏈球菌、乳房鏈球菌)、大腸桿菌?!窘Y(jié)果】在整個(gè)試驗(yàn)期間,給藥乳區(qū)未出現(xiàn)乳房紅、腫、熱、痛等臨床癥狀。給藥前1日、0日和給藥后的1、3、5、7和10日,體細(xì)胞數(shù)大多在25-40萬(wàn)個(gè)/mL,平均體細(xì)胞數(shù)分別為33.26、32.74、32.70、31.63、31.24、30.62、30.04 萬(wàn)個(gè)/mL,給藥后各時(shí)間點(diǎn)奶樣體細(xì)胞數(shù)與給藥前體細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果相比,體細(xì)胞數(shù)有所降低,但經(jīng)重復(fù)測(cè)量方差分析顯示無(wú)顯著性差異(>0.05);日產(chǎn)奶量在23-33 kg,平均日產(chǎn)奶量分別為27.30、27.35、27.25、27.40、27.64、27.83、28.00 kg,經(jīng)重復(fù)測(cè)量方差分析顯示無(wú)顯著性差異(>0.05);所有試驗(yàn)?zāi)膛T诮o藥前和給藥后不同時(shí)間點(diǎn)的直腸溫度均在奶牛的正常溫度范圍內(nèi)(38.4-39.2℃),直腸平均溫度分別為38.79、38.82、38.83、38.77、38.71、38.71、38.69℃,經(jīng)重復(fù)測(cè)量方差分析顯示無(wú)顯著性差異(>0.05);故按推薦劑量單次給藥對(duì)奶牛的體細(xì)胞數(shù)、日產(chǎn)奶量、體溫?zé)o顯著影響。病原菌鑒定結(jié)果表明:在給藥當(dāng)日(0日)采集的乳樣中,分離到鏈球菌、葡萄球菌和大腸桿菌分別為2、3和4株;給藥后第10日,僅檢測(cè)到葡萄球菌和鏈球菌各1株,給藥前后目標(biāo)菌數(shù)量有顯著降低。【結(jié)論】頭孢洛寧乳房注入劑(干乳期)對(duì)奶牛體溫、產(chǎn)奶量和奶中體細(xì)胞數(shù)等無(wú)不良影響,該制劑用于奶牛安全。

    頭孢洛寧乳房注入劑;干乳期;安全性;產(chǎn)奶量;體細(xì)胞數(shù)

    0 引言

    【研究意義】奶牛乳房炎是細(xì)菌進(jìn)入并感染牛乳腺組織時(shí)所引起的乳腺炎癥[1]。其特征是乳的物理、化學(xué)和通常的細(xì)菌變化以及乳腺組織的病理變化,通常由宿主、病原體、環(huán)境和管理相關(guān)的各種因素的相互作用引起,細(xì)菌病原體對(duì)乳腺構(gòu)成主要威脅[2]。奶牛乳房炎造成牛奶產(chǎn)量及質(zhì)量下降、奶牛淘汰、保費(fèi)損失、動(dòng)物福利和其他與健康有關(guān)的問(wèn)題等[3],不僅給奶牛帶來(lái)痛苦,也導(dǎo)致全球乳業(yè)的經(jīng)濟(jì)損失[4]。引起奶牛乳房炎的主要病原菌有:葡萄球菌、鏈球菌和腸桿菌,尤其是金黃色葡萄球菌[5]。目前治療乳房炎主要的策略仍是使用抗生素,而抗生素的過(guò)量使用、濫用會(huì)導(dǎo)致食物鏈中耐藥性和耐藥菌侵襲的嚴(yán)重問(wèn)題[6],因此合理的使用抗生素顯得尤為重要。干乳期是奶牛新感染乳房炎的高危時(shí)期,同時(shí)也是治療乳房炎感染的理想時(shí)期[7],在這一時(shí)期用藥有治療隱性感染、預(yù)防新感染的作用[8]。選擇干乳期治療具有以下重要的優(yōu)勢(shì):(1)可以使用較高劑量的抗微生物藥物對(duì)抗早期病原體的入侵;(2)在沒(méi)有定期擠奶的情況下,乳房中的抗微生物藥物濃度可保持較長(zhǎng)時(shí)間,并且適當(dāng)使用會(huì)降低乳中藥物殘留的風(fēng)險(xiǎn);(3)節(jié)省丟棄抗生素污染牛奶的成本[9-10];(4)產(chǎn)犢后體細(xì)胞數(shù)減少,牛奶產(chǎn)量提高10%左右[11]。β-內(nèi)酰胺治療乳腺炎的使用頻率最高,經(jīng)常采用直接將高濃度的藥物乳房?jī)?nèi)灌注的方法來(lái)治療乳腺炎[12]?!厩叭搜芯窟M(jìn)展】頭孢洛寧(cefalonium)是屬于第2代頭孢類抗生素,首先由美國(guó)先靈葆雅(Schering-Plough)制藥公司開(kāi)發(fā),針對(duì)奶牛干奶期乳房炎預(yù)防性用藥的產(chǎn)品,商品名為Cepravin?。頭孢洛寧具有對(duì)酸和β-內(nèi)酰胺酶穩(wěn)定,殺菌力強(qiáng)、抗菌譜廣、過(guò)敏反應(yīng)少、毒性低[13]等優(yōu)點(diǎn),對(duì)由金黃色葡萄球菌、鏈球菌等引起的奶牛乳房炎有很好的殺菌作用[14-15]。MORONI等[16]從奶山羊乳中分離到70株葡萄球菌,評(píng)價(jià)其易感性,最小抑菌濃度(minimum inhibitory concentration,MIC)測(cè)量顯示,所有β-內(nèi)酰胺(頭孢哌酮除外)對(duì)表皮葡萄球菌和葡萄球菌均有效,而其他抗生素效果交叉或是沒(méi)有效果,其中頭孢洛寧對(duì)表皮葡萄球菌敏感(MIC90=0.24 mg·ml-1),而頭孢哌酮不敏感;從乳腺感染的山羊乳中分離到表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis, SEPI)、葡萄球菌(Staphylococus capre, SCAP),頭孢洛寧對(duì)SCAP、SEPI的MIC90分別為0.97和0.12 μg·ml-1[17];從亞臨床乳房炎奶牛中分離的68株金黃色葡萄球菌,測(cè)試其對(duì)藥物的抗菌敏感性,結(jié)果顯示,與頭孢哌酮相比,頭孢洛寧對(duì)金黃色葡萄菌更敏感,其MIC50和MIC90分別為0.12和2 μg·ml-1[18]。李維靜[19]等采用微量稀釋法研究頭孢洛寧、頭孢匹林、阿莫西林和氯唑西林對(duì)乳房炎病原菌的體外抗菌活性,結(jié)果顯示頭孢洛寧對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC50、MIC90分別為0.125和16 μg·ml-1,表明頭孢洛寧具有良好的體外抗菌活性。OWENS[20]等研究結(jié)果顯示頭孢洛寧對(duì)奶牛乳房炎葡萄球菌的治愈率在85%以上,尤其是金黃色葡萄球菌,而B(niǎo)RADLEY[21]的研究要高于此結(jié)果(所有病原菌治愈率>90%),這與SHEPHARD[22]及NEWTON[23]的研究共同表明頭孢洛寧對(duì)奶牛乳房炎有良好的治愈率,證明該藥是治療干奶期奶牛乳房炎的有效藥物。【本研究切入點(diǎn)】頭孢洛寧乳房注入劑對(duì)干乳期奶牛乳房炎具有良好的治療效果,國(guó)外已有相關(guān)乳房灌注劑,但在國(guó)內(nèi)暫無(wú)該產(chǎn)品上市,也無(wú)關(guān)于此藥對(duì)奶牛安全性的報(bào)道。因此,中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所等單位自主研發(fā)了頭孢洛寧乳房注入劑,并開(kāi)展了本制劑對(duì)奶牛的安全性研究。【擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題】按推薦劑量給健康奶牛注入頭孢洛寧乳房注入劑(干乳期),通過(guò)對(duì)比用藥前后奶牛的直腸溫度、產(chǎn)奶量、奶中體細(xì)胞數(shù)及奶中病原菌數(shù)量,驗(yàn)證該制劑對(duì)奶牛的安全性。

    1 材料與方法

    1.1 受試藥物

    頭孢洛寧乳房注入劑(干乳期),規(guī)格:3g:250mg;批號(hào)1511001;齊魯動(dòng)物保健品有限公司提供;推薦用藥方法:干乳期奶牛每頭牛每個(gè)乳區(qū)給藥1支。

    1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

    該試驗(yàn)于2016年9—11月,在北京順義某牛場(chǎng)進(jìn)行。根據(jù)FDA和EMEA相關(guān)指導(dǎo)原則制定本試驗(yàn)方案。試驗(yàn)?zāi)膛H脒x標(biāo)準(zhǔn)為健康泌乳期奶牛,奶牛在試驗(yàn)前30 日內(nèi)未全身性或乳房?jī)?nèi)給予抗生素,產(chǎn)奶量在15—35 kg/日之間。初產(chǎn)和經(jīng)產(chǎn)健康泌乳期奶牛各6 頭(1—6號(hào)牛為初產(chǎn),7—12號(hào)牛為經(jīng)產(chǎn))。

    1.3 給藥

    12 頭健康泌乳期奶牛(初產(chǎn)經(jīng)產(chǎn)各半),4 個(gè)乳區(qū)分別單次注入頭孢洛寧乳房注入劑(干乳期)1支(3g:250mg),給藥1次。奶牛擠奶后,先用消毒毛巾清潔各乳區(qū),再用消毒藥液浸泡乳頭約30 秒,然后進(jìn)行乳頭內(nèi)灌注給藥。灌注時(shí)將含藥推注管頭插入乳頭,輕輕推壓活塞,將藥物緩緩注入乳池內(nèi),隨后輕輕按摩相應(yīng)乳區(qū),使藥物均勻分布。

    1.4 試驗(yàn)過(guò)程

    在給藥前1 日和0日;給藥后1、3、5、7和10日對(duì)4 個(gè)乳區(qū)采集奶樣,采樣前棄去前三把奶。

    數(shù)據(jù)收集:記錄奶牛標(biāo)識(shí)、觀察時(shí)間、試驗(yàn)日期和時(shí)間、每頭奶牛日產(chǎn)奶量及體溫等參數(shù)。各時(shí)間點(diǎn)所采集奶樣檢測(cè)乳中體細(xì)胞數(shù)(SCC),觀察奶牛紅、腫、熱、痛等臨床癥狀。

    1.5 病原菌分離和鑒定

    分別對(duì)給藥前0 日和給藥后第10 日的奶樣進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查。采樣時(shí)先用清水沖洗乳房,用0.1%新潔爾滅或者75%乙醇對(duì)乳頭及周圍進(jìn)行消毒,待酒精揮發(fā)后,手工擠奶,棄去前三把奶后,采集奶樣于滅菌試管中,貼好標(biāo)簽,低溫(4 ℃)保存并于6 h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室分離檢測(cè)。

    將各奶樣接種至多種選擇性培養(yǎng)基分離各種病原菌。分離菌株經(jīng)純化培養(yǎng)后,依據(jù)菌落形態(tài)、染色特征、生化特點(diǎn)鑒定其種類。主要分離金黃色葡萄球菌、鏈球菌(無(wú)乳鏈球菌、乳房鏈球菌)、大腸桿菌。

    1.6 統(tǒng)計(jì)分析

    利用 SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)給藥前后直腸溫度、平均日產(chǎn)奶量、乳中體細(xì)胞數(shù)進(jìn)行重復(fù)測(cè)量方差分析。

    2 結(jié)果

    2.1 臨床癥狀觀察

    12 頭奶牛4個(gè)乳區(qū)分別單劑量給藥頭孢洛寧乳房注入劑(干乳期),在整個(gè)試驗(yàn)期間,給藥乳區(qū)未出現(xiàn)乳房紅、腫、熱、痛等臨床癥狀。

    2.2 體細(xì)胞計(jì)數(shù)

    體細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果見(jiàn)表1。由表數(shù)據(jù)可知,12 頭奶牛給藥后各時(shí)間點(diǎn)奶樣與給藥前體細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果相比體細(xì)胞數(shù)有所降低,但并未表現(xiàn)出顯著性差異(>0.05)。

    2.3 日產(chǎn)奶量

    12 頭奶牛各時(shí)間點(diǎn)的產(chǎn)奶量見(jiàn)表2。由表中數(shù)據(jù)可知,12 頭奶牛在給予頭孢洛寧乳房注入劑(干乳期)后,與給藥前相比各時(shí)間點(diǎn)產(chǎn)奶量無(wú)顯著差異(>0.05)。

    表1 12 頭奶牛給藥前后奶樣中的體細(xì)胞數(shù)

    表2 12頭奶牛各時(shí)間點(diǎn)的產(chǎn)奶量

    2.4 直腸溫度

    奶牛的直腸溫度統(tǒng)計(jì)表見(jiàn)表 3。所有試驗(yàn)?zāi)膛T诮o藥前和給藥后不同時(shí)間點(diǎn)的直腸溫度均在奶牛的正常溫度范圍內(nèi),說(shuō)明按推薦劑量單次給藥對(duì)奶牛的體 溫?zé)o顯著影響(>0.05)。

    2.5 細(xì)菌分離鑒定

    試驗(yàn)?zāi)膛=o藥后乳中細(xì)菌數(shù)比給藥前減少,在給藥前0 日采集的奶樣中,分離的鏈球菌、葡萄球菌和大腸桿菌分別為2 株、3 株和4 株;給藥后第10 日,僅在7號(hào)牛的右后乳區(qū)檢測(cè)鏈球菌1 株、11號(hào)牛的左前乳區(qū)檢測(cè)到葡萄球菌1 株(表 4)。

    表3 12頭奶牛各時(shí)間點(diǎn)奶牛直腸溫度

    表4 試驗(yàn)?zāi)膛8鲿r(shí)間點(diǎn)不同乳區(qū)所采奶樣細(xì)菌分離情況

    3 討論

    研究表明,頭孢洛寧的急性毒性很低。大鼠、小鼠經(jīng)口服給藥,LD50分別為>5 000和>12 000 mg·kg-1體重。經(jīng)皮下給藥時(shí),LD50均為>5 000 mg·kg-1體重。雌性的大、小鼠,經(jīng)腹腔給藥,LD50分別為>2 680和3 400 mg·kg-1體重,腹膜內(nèi)給藥有抑制自主運(yùn)動(dòng)、腹部下垂和鎮(zhèn)靜的副作用。病例顯示在口服和皮下給藥治療致死的情況下未發(fā)現(xiàn)腸內(nèi)容物,但在腹腔給藥的動(dòng)物中有局部的組織損傷,很少證據(jù)表明其有全身性的毒性,也未發(fā)現(xiàn)致畸毒性、生殖毒性和致突變性[13]。葡萄球菌是最常見(jiàn)的乳房炎病原體,而革蘭氏陰性菌次之。WENTE[24]從6 936個(gè)牛奶樣品培養(yǎng)1 635個(gè)細(xì)菌分離株,其中69 個(gè)樣本有2 個(gè)分離株。最常分離的病原體依次是:金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌和棒狀細(xì)菌。藥物的最小抑菌濃度(MIC)試驗(yàn)結(jié)果顯示,頭孢洛寧對(duì)葡萄球菌敏感,治療效果優(yōu)于頭孢喹肟。

    確保所開(kāi)發(fā)產(chǎn)品的安全性和有效性,是獸醫(yī)藥品從業(yè)者的職責(zé),以此能發(fā)現(xiàn)可能與臨床安全有關(guān)的不期望出現(xiàn)的藥理作用,通過(guò)評(píng)價(jià)研究中觀察到的不良反應(yīng)或病理作用,可避免臨床使用中出現(xiàn)不必要的傷害和風(fēng)險(xiǎn)。因此,我們必須精心完善可持續(xù)的靶動(dòng)物安全(Target Animal Safety, TAS)試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。獸醫(yī)藥品(IVPP)注冊(cè)之前,通過(guò)實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)和實(shí)地研究證明在靶動(dòng)物中是安全的[25]。本試驗(yàn)參照獸藥注冊(cè)技術(shù)要求協(xié)調(diào)國(guó)際組織VICH GL43《Target Animal Safety for Veterinary Pharmaceutical Products》關(guān)于乳腺安全性研究指導(dǎo)原則和CVM GFI#49[26]等指導(dǎo)原則,對(duì)頭孢洛寧乳房注入劑(干奶期)進(jìn)行靶動(dòng)物安全試驗(yàn)設(shè)計(jì),試驗(yàn)前對(duì)動(dòng)物進(jìn)行檢查(腫脹、紅斑、疼痛或發(fā)熱)以及對(duì)關(guān)鍵的安全性評(píng)價(jià)變量(包括乳腺刺激體征、升高SCC和奶產(chǎn)量的變化)等進(jìn)行評(píng)估[27]。目前未見(jiàn)有關(guān)頭孢洛寧乳房注入劑(干乳期)安全性的報(bào)道,因此在制定本試驗(yàn)方案時(shí)也參考了周緒正[28]、馮言言[29]等開(kāi)展的頭孢菌素類抗生素對(duì)犬、奶牛的安全性研究,以及閆星[30]、瞿紅穎[31]等開(kāi)展的硫酸頭孢喹肟對(duì)泌乳期奶牛的安全性研究,以此,對(duì)采樣時(shí)間、測(cè)量的指標(biāo)進(jìn)行合理的設(shè)計(jì),具有一定的科學(xué)性。試驗(yàn)的結(jié)果顯示給藥后奶牛臨床未見(jiàn)紅、腫、熱、痛不良癥狀,奶牛對(duì)該藥的耐受性好,對(duì)奶牛產(chǎn)奶量前后無(wú)變化,體細(xì)胞數(shù)量無(wú)變化,證明該藥安全可靠。

    4 結(jié)論

    泌乳期奶牛按照推薦劑量使用頭孢洛寧乳房注入劑(干乳期)(3g:250mg),在給藥前后并未發(fā)現(xiàn)奶牛乳區(qū)出現(xiàn)紅、腫、熱、痛等臨床乳房炎癥狀,證明乳腺體征良好。通過(guò)比較用藥前后產(chǎn)奶量數(shù)據(jù),未出現(xiàn)顯著的差異(>0.05),在采樣的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)(給藥1、0 d和給藥后12 h、3 d、5 d、7 d和10日),前奶中的體細(xì)胞數(shù)亦未有顯著的變化。在給藥當(dāng)日(0 日)和給藥后第10 日分別采集奶樣并分離細(xì)菌,結(jié)果顯示給藥后細(xì)菌檢出數(shù)與給藥前相比降低。上述結(jié)果表明奶牛按推薦劑量單次給予頭孢洛寧乳房注入劑(干乳期)對(duì)奶牛無(wú)不良作用,安全性較高。

    [1] DE OLIVEIRA A P, WATTS J L, SALMON S A, AARESTRUP F M. Antimicrobial susceptibility of Staphylococcus aureus isolated from bovine mastitis in Europe and the United States., 2000, 83(4): 855-862.

    [2] KIBEBEW K. Bovine Mastitis: A review of causes and epidemiological point of view.,, 2017, 7(2): 1-14.

    [3] GOMES F, HENRIQUES M. Control of bovine mastitis: old and recent therapeutic approaches.,2016, 72(4): 377-382.

    [4] KUMAR A, RAHAL A, DWIVEDI S K, GUPTA M K. Bacterial prevalence and antibiotic resistance profile from bovine mastitis in Mathura, India., 2010, 38(1): 31-34.

    [5] ZHANG L L, LI Y C, BAO H D, WEI R C, ZHOU Y, ZHANG H, WANG R. Population structure and antimicrobial profile of Staphylococcus aureus strains associated with bovine mastitis in China., 2016, 97: 103-109.

    [6] ZHAO F, GAO X, TANG Z X, LUO X, WU M M, XU J C, FU X T. Development of a simple multi-residue determination method of 80 veterinary drugs in Oplegnathus punctatus by liquid chromatography coupled to quadrupole Orbitrap mass spectrometry., 2017, 1065-1066: 20-28.

    [7] WOOLFORD M W, WILLIAMSON J H, DAY A M, COPEMAN P J. The prophylactic effect of a teat sealer on bovine mastitis during the dry period and the following lactation., 1998, 46(1): 12-19.

    [8] RABIEE A R, LEAN I J. The effect of internal teat sealant products (Teatseal and Orbeseal) on intramammary infection, clinical mastitis, and somatic cell counts in lactating dairy cows: a meta-analysis., 2013, 96(11): 6915-6931.

    [9] GRUET P, MAINCENT P, BERTHELOT X, KALTSATOS V. Bovine mastitis and intramammary drug delivery: review and perspectives., 2001, 50(3): 245-259.

    [10] ROYSTER E, WAGNER S. Treatment of mastitis in cattle., 2015, 31(1): 17-46.

    [11] NICKERSON S C. Control of heifer mastitis: antimicrobial treatment-an overview., 2009, 134(1-2): 128-135.

    [12] KANG J H, JIN J H, KONDO F. False-positive outcome and drug residue in milk samples over withdrawal times., 2005, 88(3): 908-913.

    [13] Committee for Veterinary Medicinal Products. Cefalonium—Summary report(2)[R]. 2002.

    [14] 李帥鵬, 郭春娜, 孟蕾, 黃顯會(huì). 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)牛奶中頭孢洛寧殘留. 色譜, 2014, 32(5): 519-523.

    LI S P, GUO C N, MENG L, HUANG X H. Determination of cefalonium residue in milk by high performance liquid chromatography- tandem mass spectrometry.2014, 32(5): 519-523. (in Chinese)

    [15] 華偉毅, 劉義明, 徐飛, 李秀波. 頭孢洛寧的藥理作用及其在奶牛乳房炎防治中應(yīng)用的研究進(jìn)展. 中國(guó)畜牧獸醫(yī), 2016, 43(10): 2742-2747.

    HUA W Y, LIU Y M, XU F, LI X B. Research progress on pharmacological action of cephalonium and its application in prevention and treatment of mastitis in dairy cow., 2016, 43(10): 2742-2747. (in Chinese)

    [16] MORONI P, VELLERE F, ANTONINI M, G PISONI, RUFFO G, CARLI S. Antibiotic susceptibility of coagulase-negative staphylococci isolated from goats' milk.2004, 23(6): 637-640.

    [17] MORONI P, PISONI G, ANTONINI M, RUFFO G, CARLI S, VARISCO G, BOETTCHER P. Subclinical mastitis and antimicrobial susceptibility of Staphylococcus caprae and Staphylococcus epidermidis isolated from two Italian goat herds., 2005, 88(5): 1694-1704.

    [18] MORONI P, PISONI G, ANTONINI M, VILLA R, BOETTCHER P, CARLI S. Short communication: antimicrobial drug susceptibility of Staphylococcus aureus from subclinical bovine mastitis in Italy., 2006, 89(8): 2973-2976.

    [19] 李維靜. 頭孢洛寧乳房注入劑防治干乳期奶牛乳腺炎的藥效學(xué)及殘留消除研究[D]. 揚(yáng)州: 揚(yáng)州大學(xué), 2014.

    LI W J. Studies on the efficacy and residue elimination ofinfusion for the treatment of bovine mastitis during the drying off period[D]. Yangzhou: Yangzhou University 2014. (in Chinese)

    [20] OWENS W E, NICKERSON S C, BODDIE R L, TOMITA G M, RAY C H. Prevalence of mastitis in dairy heifers and effectiveness of antibiotic therapy., 2001, 84(4): 814-817.

    [21] BRADLEY A J, BREEN J E, PAYNE B, WILLIAMS P, GREEN M J. The use of a cephalonium containing dry cow therapy and an internal teat sealant, both alone and in combination., 2010, 93(4): 1566-1577.

    [22] SHEPHARD R W, BURMAN S, MARCUN P. A comparative field trial of cephalonium and cloxacillin for dry cow therapy for mastitis in Australian dairy cows., 2004, 82(10): 624-629.

    [23] NEWTON H T, GREEN M J, BENCHAOUI H, CRACKNELL V, ROWAN T, BRADLEY A J. Comparison of the efficacy of cloxacillin alone and cloxacillin combined with an internal teat sealant for dry-cow therapy., 2008, 162(21): 678-684.

    [24] WENTE N, ZOCHE-GOLOB V, BEHR M, KROMKER V. Susceptibility to cephalosporins of bacteria causing intramammary infections in dairy cows with a high somatic cell count in Germany., 2016, 131: 146-151.

    [25] SCHOFIELD J S. Animal-health pharmaceuticals: research responsibilities and efforts in target animal safety and laboratory animal welfare., 2011, 3(7): 851-854.

    [26] U. S. Food and drug administration CVM GFI #49. Target Animal Safety And Drug Effectiveness Studies for Anti-Microbial Bovine Mastitis Products (Lactating and Non-Lactating Cow Products) [S] Revised April 4, 1996 (Revises the February 1, 1993 Guideline)

    [27] 蕭惠來(lái). VICH獸藥靶動(dòng)物安全性研究指導(dǎo)原則概述. 中國(guó)獸藥雜志, 2009, 43(12): 33-37.

    XIAO H L. Overview of VICH guideline of target animal safety for veterinary pharmaceutical product.2009, 43(12): 33-37. (in Chinese)

    [28] 周緒正, 張繼瑜, 李金善, 李冰, 李劍勇, 魏小娟, 牛建榮, 楊亞軍, 劉希望. 賽拉菌素溶液對(duì)靶動(dòng)物犬的安全性研究. 黑龍江畜牧獸醫(yī), 2013(5): 120-122.

    ZHOU X Z, ZHANG J Y, LI J S, LI B, LI J Y, WEI X J, NIU J R, YANG Y J, LIU X W. Target animal safety study of selamectin solution in dogs.2013(5): 120-122. (in Chinese)

    [29] 馮言言, 鄭莉, 林紅, 孟芳, 孔梅, 吳連勇, 曹興元. 鹽酸頭孢噻呋注射液對(duì)奶牛的安全性研究. 中國(guó)獸藥雜志, 2016, 50(12): 34-39.

    FENG Y Y, ZHENG L, LIN H, MENG F, KONG M, WU L Y, CAO X Y. Study on safety of ceftiofur hydrochloride sterile suspension in dairy cows.2016, 50(12): 34-39. (in Chinese)

    [30] 閆星, 劉義明, 路永強(qiáng), 張道康, 劉茂林, 張寧, 王天坤, 郭江鵬, 李秀波. 硫酸頭孢喹肟乳房注入劑對(duì)泌乳期奶牛的安全性研究. 中國(guó)畜牧獸醫(yī), 2014, 41(11): 278-282.

    YAN X, LIU Y M, LU Y Q, ZHANG D K, LIU M L, ZHANG N, WANG T K, GUO J P, LI X B. Safety study on cefquinome sulfate intramammary infusion of lactating cows.,2014, 41(11): 278-282. (in Chinese)

    [31] 瞿紅穎, 魏麗娟, 劉欣, 魏占勇, 宋婷婷, 賈興, 耿智霞, 吳聰明, 張?jiān)? 硫酸頭孢喹肟子宮注入劑對(duì)泌乳期奶牛的安全性研究. 中國(guó)畜牧獸醫(yī), 2016, 43(1): 227-234.

    QU H Y, WEI L J, LIU X,WEI Z Y, SONG T T, JIA X, GENG Z X, WU C M, ZHANG Y. Safety study on cequinome sulfate intrauterine infusion for lactating cows.,2016, 43(1): 227-234. (in Chinese)

    The Safety Evaluation of Cefalonium Intramammary Infusion (Dry Cow)

    HUA WeiYi1, LIU YiMing1, XU Fei1, LU YongQiang2, KONG Mei3, WANG HaiTing3, HUANG HuiLi1, WANG HongLei1, WU LianYong3, LI XiuBo1

    (1National Feed Drug Reference Laboratories, Key Laboratory of Feed Biological Technology of Ministry of Agriculture, Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081;2Beijing Animal Husbandry and Veterinary Station, Beijing 100012;3Qilu Animal Health Products Co Ltd, Jinan 250100)

    【Objective】The purpose of this paper was to investigate the safety of cefalonium intramammary infusion(dry cow) for target animals. 【Method】Six primiparous and six multiparous healthy dairy cows were selected, which have not been treated with any antibiotics by systemic or intramammary administration 30 days before. Their daily milk yield was 15-35 kg. At day 1 and day 0 prior to administration of the tested drug, the daily milk production and body temperature of the tested animals were recorded, and their milk samples were collected for somatic cell count analysis. For milk sampling,the udder was rinsed with clean water and the nipples and the close skin were disinfected with 75% ethanol. Milk samples were collected in sterilized test tubes (milking by hand and discarding the first three times of milking). The collected sample were stored at low temperature (4℃) and sent to laboratory for testing within 6 h. For drug infusion, each quarter of udder was cleaned with a disinfected towel and the teats were soaked for 30 seconds with disinfectant. The drug was slowly inject into the quarter so that it could be evenly distributed. Each quarter was injected with a single dose of cefalonium (Dry Cow) (250 mg). Samples of each quarter were collected at 1, 3, 5, 7, and 10 days after the drug administration. Individual milk production, quantitative somatic cell count (SCC) and body temperature were recorded. Day 0 and day 10 milk samples were cultivated with selective medium to isolate bacteria. The isolated strains were identified according to their colony morphology, staining and biochemical characteristics. The main pathogens analyzed were,. 【Result】During the whole test period, there was no clinical symptoms such as swelling, erythema, pain, or heat. On day 1, 0 prior to and 1, 3, 5, 7 and 10 day after administration of the drug, somatic cell count was 250-400 thousand per milliliter. The mean somatic cells count for the seven time points were 332.6, 327.4, 327.0, 316.3, 312.4, 306.2, 300.4 thousand per milliliter respectively, but there is no significant difference (>0.05) among them by analysis of repeated measures anova. Daily milk yield was 23-33 kg. The average daily milk yield for the seven time points was 27.30, 27.35, 27.25, 27.40, 27.64, 27.83, 28.00 kg, respectively. It had no significant difference (>0.05) byrepeated measures anova. The rectal temperature of all tested cows before and after administration was within the normal range. The mean values of rectal temperature were 38.79, 38.82, 38.83, 38.77, 38.71, 38.71 and 38.69 ℃ respectively, and there was no significant difference (>0.05). Therefore, according to the recommended dose of a single administration, it had no significant effect on somatic cell count, daily milk yield and rectal temperature of the tested animals. The results for bacteria isolation showed that there were 2, 3 and 4 strains of, respectively on day 0 of the administration of the drug, and there were 1, 1 and 0 strains ofon day 10 after administration, respectively. The number of pathogens was significantly decreased through the treatment of the drug. 【Conclusion】The recommended dose of cofalonium had no adverse effect on rectal temperature, milk yield and somatic cell counts for dairy cows after mammary administration. It is safe for the drug to be used in dairy cows by intramammary infusion (Dry Cow).

    cofalonium intramammary infusion; dry cow; safety; milk yield; somatic cell counts

    10.3864/j.issn.0578-1752.2019.02.014

    2017-12-08;

    2018-02-22

    中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院創(chuàng)新工程項(xiàng)目(FRI-06)、奶牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系北京市創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)資金

    華偉毅,E-mail:huaweiyi2012@163.com。通信作者李秀波,E-mail:lixiubo@caas.cn。通信作者吳連勇,E-mail:Lianyong.wu@qilu- pharma.com

    (責(zé)任編輯 林鑒非)

    猜你喜歡
    洛寧乳區(qū)體細(xì)胞
    浙江:誕生首批體細(xì)胞克隆豬
    新型冠狀病毒入侵人體細(xì)胞之謎
    科學(xué)(2020年4期)2020-11-26 08:27:10
    奶牛乳房炎對(duì)主要牛奶成分的影響
    揚(yáng)大康源乳業(yè)牧業(yè)示范基地干奶流程與操作
    新疆石河子地區(qū)某奶牛場(chǎng)奶牛隱性乳房炎的調(diào)查與分析
    內(nèi)皮前體細(xì)胞亞型與偏頭痛的相關(guān)性分析
    洛寧淡竹甲天下
    非洲菊花托的體細(xì)胞胚發(fā)生及植株再生
    奶牛左右乳區(qū)溫度溫差作為隱性乳房炎檢測(cè)指標(biāo)的可行性研究
    石頭里的春暖花開(kāi)
    久久中文字幕一级| 亚洲人成网站高清观看| 国产精品99久久久久久久久| 99国产极品粉嫩在线观看| 欧美午夜高清在线| 又大又爽又粗| 欧美中文综合在线视频| 老司机深夜福利视频在线观看| 亚洲精品在线美女| 国产精品,欧美在线| 日本免费a在线| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产单亲对白刺激| 又黄又粗又硬又大视频| 久久国产乱子伦精品免费另类| 国产精品,欧美在线| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 操出白浆在线播放| 国产精品电影一区二区三区| ponron亚洲| 色吧在线观看| 久久精品91无色码中文字幕| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 日本熟妇午夜| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 成在线人永久免费视频| 日本黄色片子视频| 超碰成人久久| 午夜福利欧美成人| 天天躁日日操中文字幕| 日韩欧美在线二视频| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 丁香欧美五月| 亚洲国产精品成人综合色| 国产亚洲欧美98| 成人精品一区二区免费| 婷婷精品国产亚洲av在线| 日韩三级视频一区二区三区| bbb黄色大片| 精品久久久久久久久久免费视频| 三级国产精品欧美在线观看 | 99久久国产精品久久久| 看黄色毛片网站| 国产高潮美女av| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 久久久国产成人免费| 两个人看的免费小视频| 精品国产亚洲在线| 久久久水蜜桃国产精品网| 成年人黄色毛片网站| 久久午夜综合久久蜜桃| 日本黄大片高清| 精品乱码久久久久久99久播| 午夜免费激情av| 亚洲国产精品久久男人天堂| 99视频精品全部免费 在线 | 老司机深夜福利视频在线观看| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 日本a在线网址| 免费在线观看成人毛片| www日本在线高清视频| 无遮挡黄片免费观看| 国产精品av久久久久免费| 亚洲成a人片在线一区二区| 中文字幕av在线有码专区| 久久久久久九九精品二区国产| 1024香蕉在线观看| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲性夜色夜夜综合| 久久久久久久午夜电影| 精品久久久久久久末码| 亚洲人成网站高清观看| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| av在线天堂中文字幕| 免费在线观看亚洲国产| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 香蕉av资源在线| 中国美女看黄片| 黄色丝袜av网址大全| 免费av不卡在线播放| 国产高清激情床上av| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 91麻豆av在线| 亚洲专区国产一区二区| 香蕉av资源在线| 男女视频在线观看网站免费| 级片在线观看| 国产午夜精品论理片| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产主播在线观看一区二区| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲精品456在线播放app | 欧美黑人巨大hd| 成人18禁在线播放| 亚洲一区二区三区色噜噜| 波多野结衣高清作品| 后天国语完整版免费观看| 亚洲 欧美一区二区三区| 12—13女人毛片做爰片一| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 国产69精品久久久久777片 | 日韩有码中文字幕| 欧美乱码精品一区二区三区| 国产主播在线观看一区二区| 成年人黄色毛片网站| 窝窝影院91人妻| 91字幕亚洲| 欧美一区二区国产精品久久精品| 成人鲁丝片一二三区免费| 免费看光身美女| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 亚洲五月天丁香| www.熟女人妻精品国产| 一区二区三区高清视频在线| 日韩欧美免费精品| av黄色大香蕉| 午夜福利高清视频| 亚洲av熟女| 国产成人啪精品午夜网站| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 深夜精品福利| 热99re8久久精品国产| 韩国av一区二区三区四区| 久久国产乱子伦精品免费另类| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产激情久久老熟女| 麻豆成人av在线观看| 精品乱码久久久久久99久播| 久久这里只有精品19| 中文资源天堂在线| 免费av毛片视频| 欧美乱妇无乱码| 免费一级毛片在线播放高清视频| 欧美在线黄色| 欧美成狂野欧美在线观看| 成人欧美大片| 国产真人三级小视频在线观看| 啪啪无遮挡十八禁网站| 欧美最黄视频在线播放免费| 一级a爱片免费观看的视频| 老鸭窝网址在线观看| 国产综合懂色| 日韩欧美国产一区二区入口| 免费看十八禁软件| 色综合婷婷激情| 91av网一区二区| 国模一区二区三区四区视频 | 免费观看人在逋| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 黄色成人免费大全| 亚洲国产欧美人成| 亚洲国产中文字幕在线视频| ponron亚洲| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 成人三级做爰电影| 国产精品久久久久久久电影 | 99精品久久久久人妻精品| 亚洲av片天天在线观看| 午夜福利在线在线| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 久久人妻av系列| 亚洲成人久久性| 久久久精品欧美日韩精品| 99久久综合精品五月天人人| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 在线播放国产精品三级| 国产乱人视频| 成人无遮挡网站| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 老熟妇仑乱视频hdxx| av在线天堂中文字幕| www.精华液| 在线观看免费视频日本深夜| 变态另类丝袜制服| 亚洲avbb在线观看| 身体一侧抽搐| 久久久久久久精品吃奶| 脱女人内裤的视频| 国产免费av片在线观看野外av| 午夜精品久久久久久毛片777| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 国产欧美日韩一区二区精品| 黄色日韩在线| 亚洲中文av在线| 婷婷丁香在线五月| 波多野结衣高清无吗| 日韩av在线大香蕉| 久久久久久久久中文| 国产主播在线观看一区二区| 成年免费大片在线观看| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 黑人欧美特级aaaaaa片| 精品人妻1区二区| 色精品久久人妻99蜜桃| 欧美日韩国产亚洲二区| 天堂√8在线中文| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 日本黄色视频三级网站网址| 成人午夜高清在线视频| 一区二区三区国产精品乱码| 色噜噜av男人的天堂激情| 真人一进一出gif抽搐免费| 国产成+人综合+亚洲专区| 男女下面进入的视频免费午夜| 欧美zozozo另类| 性欧美人与动物交配| 国产伦精品一区二区三区四那| 国产精品99久久99久久久不卡| ponron亚洲| 亚洲av免费在线观看| 久久久久性生活片| 不卡一级毛片| 母亲3免费完整高清在线观看| 成人一区二区视频在线观看| 亚洲美女视频黄频| 亚洲精品456在线播放app | 很黄的视频免费| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲七黄色美女视频| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 亚洲国产精品999在线| 久久久色成人| 亚洲专区国产一区二区| 国产成人精品久久二区二区91| 看免费av毛片| 热99在线观看视频| 最新在线观看一区二区三区| 一区二区三区激情视频| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 成年女人永久免费观看视频| 欧美中文综合在线视频| 亚洲国产精品sss在线观看| 欧美色视频一区免费| 手机成人av网站| 亚洲国产欧美人成| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 色综合亚洲欧美另类图片| 很黄的视频免费| 一二三四在线观看免费中文在| 亚洲国产欧美人成| 黑人欧美特级aaaaaa片| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 91麻豆av在线| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产成人aa在线观看| 成年版毛片免费区| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 看免费av毛片| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲一区高清亚洲精品| www.自偷自拍.com| 国产欧美日韩一区二区精品| 日本黄色视频三级网站网址| 国模一区二区三区四区视频 | 成人无遮挡网站| 无限看片的www在线观看| 国产精品一区二区三区四区久久| 日本三级黄在线观看| 日本五十路高清| 欧美成狂野欧美在线观看| 精品福利观看| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 欧美日本视频| 精品久久久久久久毛片微露脸| 中文在线观看免费www的网站| www日本黄色视频网| 美女 人体艺术 gogo| 欧美日韩综合久久久久久 | 中文字幕av在线有码专区| 丰满人妻一区二区三区视频av | 中文字幕久久专区| 美女黄网站色视频| 久久伊人香网站| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产真实乱freesex| 久久香蕉精品热| 69av精品久久久久久| 日韩欧美在线乱码| 视频区欧美日本亚洲| 亚洲在线观看片| 亚洲美女视频黄频| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 国产野战对白在线观看| 午夜激情福利司机影院| 午夜福利高清视频| 欧美日韩一级在线毛片| 欧美日韩黄片免| 国产精品 国内视频| 一个人看视频在线观看www免费 | 精品无人区乱码1区二区| 成年女人看的毛片在线观看| 99riav亚洲国产免费| 757午夜福利合集在线观看| 国产精品精品国产色婷婷| 看免费av毛片| 99在线人妻在线中文字幕| 成人18禁在线播放| 黄色女人牲交| 午夜成年电影在线免费观看| 少妇人妻一区二区三区视频| x7x7x7水蜜桃| 此物有八面人人有两片| 精品无人区乱码1区二区| 免费在线观看影片大全网站| 一边摸一边抽搐一进一小说| 日本成人三级电影网站| 丝袜人妻中文字幕| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 午夜亚洲福利在线播放| 一本综合久久免费| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 国产淫片久久久久久久久 | 一本精品99久久精品77| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 操出白浆在线播放| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲国产色片| 亚洲成人免费电影在线观看| 成人午夜高清在线视频| 欧美不卡视频在线免费观看| 老鸭窝网址在线观看| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 在线观看舔阴道视频| 99在线人妻在线中文字幕| 男女那种视频在线观看| 午夜免费观看网址| 国产 一区 欧美 日韩| avwww免费| 性欧美人与动物交配| 国产三级在线视频| aaaaa片日本免费| 12—13女人毛片做爰片一| 成年人黄色毛片网站| 国产精品亚洲一级av第二区| 中国美女看黄片| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 免费人成视频x8x8入口观看| 免费看光身美女| 国产精品精品国产色婷婷| 色综合婷婷激情| 成年女人永久免费观看视频| 99国产精品99久久久久| 亚洲性夜色夜夜综合| 一区二区三区国产精品乱码| 最近视频中文字幕2019在线8| 免费观看精品视频网站| 变态另类丝袜制服| 窝窝影院91人妻| 免费高清视频大片| 怎么达到女性高潮| 床上黄色一级片| 中文字幕久久专区| 长腿黑丝高跟| 看黄色毛片网站| 久久久久久久午夜电影| 亚洲国产欧美网| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 天堂√8在线中文| 欧美最黄视频在线播放免费| 99在线人妻在线中文字幕| 亚洲在线观看片| 国产精品一区二区三区四区久久| 亚洲人成网站高清观看| 老汉色av国产亚洲站长工具| 中文字幕久久专区| 成年女人永久免费观看视频| 国产亚洲精品av在线| 视频区欧美日本亚洲| 亚洲av熟女| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 精品免费久久久久久久清纯| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 男女之事视频高清在线观看| 一个人看视频在线观看www免费 | 免费在线观看成人毛片| 久久人人精品亚洲av| 久久这里只有精品19| 精品电影一区二区在线| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 久久精品人妻少妇| 亚洲成a人片在线一区二区| 精品久久久久久,| aaaaa片日本免费| 波多野结衣高清无吗| e午夜精品久久久久久久| 国产男靠女视频免费网站| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 日韩精品中文字幕看吧| 岛国在线免费视频观看| 黄色日韩在线| www.www免费av| 日韩中文字幕欧美一区二区| 99在线视频只有这里精品首页| 欧美日韩黄片免| 成年人黄色毛片网站| 亚洲成人久久性| 精品熟女少妇八av免费久了| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产视频内射| 少妇人妻一区二区三区视频| 精品午夜福利视频在线观看一区| 亚洲片人在线观看| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产欧美日韩一区二区三| 最新美女视频免费是黄的| 88av欧美| 怎么达到女性高潮| 黄色视频,在线免费观看| 欧美高清成人免费视频www| 亚洲av电影在线进入| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产黄色小视频在线观看| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 色播亚洲综合网| 岛国在线观看网站| 欧美黑人巨大hd| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产美女午夜福利| 亚洲自拍偷在线| 久久草成人影院| 草草在线视频免费看| 亚洲国产中文字幕在线视频| 88av欧美| 国产激情偷乱视频一区二区| 免费看美女性在线毛片视频| 免费无遮挡裸体视频| 国模一区二区三区四区视频 | 少妇的丰满在线观看| 国产一区在线观看成人免费| 久久久久精品国产欧美久久久| 深夜精品福利| 91在线观看av| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 一二三四在线观看免费中文在| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲 国产 在线| 美女 人体艺术 gogo| 久久久国产欧美日韩av| www.熟女人妻精品国产| 深夜精品福利| 黑人操中国人逼视频| 日韩欧美免费精品| 国产精品1区2区在线观看.| 麻豆av在线久日| 国产精品一区二区精品视频观看| a级毛片在线看网站| 不卡一级毛片| 免费在线观看成人毛片| 国产不卡一卡二| 中文字幕最新亚洲高清| 久久精品影院6| 亚洲午夜理论影院| 欧美zozozo另类| 免费av不卡在线播放| 麻豆国产av国片精品| ponron亚洲| e午夜精品久久久久久久| 一区福利在线观看| 久久久精品大字幕| 九九热线精品视视频播放| 又黄又粗又硬又大视频| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 成人av一区二区三区在线看| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 五月伊人婷婷丁香| 伦理电影免费视频| 99在线人妻在线中文字幕| 一本综合久久免费| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 又爽又黄无遮挡网站| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 亚洲人成网站高清观看| av在线天堂中文字幕| 手机成人av网站| 久久久色成人| 久久久国产欧美日韩av| 国产综合懂色| 淫秽高清视频在线观看| 曰老女人黄片| 好男人在线观看高清免费视频| 午夜福利在线在线| 99热这里只有精品一区 | 精品久久久久久成人av| 国产高清视频在线观看网站| 韩国av一区二区三区四区| 欧美在线一区亚洲| 日韩欧美 国产精品| 很黄的视频免费| 草草在线视频免费看| 免费观看精品视频网站| 日日干狠狠操夜夜爽| 日韩中文字幕欧美一区二区| 夜夜夜夜夜久久久久| 婷婷六月久久综合丁香| 成人精品一区二区免费| 欧美激情在线99| 黄色 视频免费看| 美女高潮的动态| 91麻豆精品激情在线观看国产| 看黄色毛片网站| 日韩av在线大香蕉| 国产爱豆传媒在线观看| 老司机午夜福利在线观看视频| 99热只有精品国产| 亚洲av片天天在线观看| 成人无遮挡网站| 好男人电影高清在线观看| 99热这里只有精品一区 | 国产aⅴ精品一区二区三区波| 日韩三级视频一区二区三区| 国内精品一区二区在线观看| 久久久色成人| 国产真人三级小视频在线观看| 国产精品一区二区免费欧美| 我要搜黄色片| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 99久久精品国产亚洲精品| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 啦啦啦韩国在线观看视频| 91av网站免费观看| 麻豆成人av在线观看| 99久久国产精品久久久| 国产免费av片在线观看野外av| 亚洲中文日韩欧美视频| 嫩草影院入口| 成人国产一区最新在线观看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 亚洲国产欧美人成| 老司机在亚洲福利影院| 热99re8久久精品国产| 亚洲片人在线观看| 久久久久久久久中文| 日本 欧美在线| 国产乱人视频| svipshipincom国产片| 国产成人福利小说| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 两人在一起打扑克的视频| 国产高清激情床上av| 国产精品野战在线观看| 国产精品久久视频播放| 男人舔女人的私密视频| 久久伊人香网站| 精品久久久久久久毛片微露脸| av福利片在线观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产午夜精品论理片| 男插女下体视频免费在线播放| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 在线播放国产精品三级| 偷拍熟女少妇极品色| 国产亚洲av高清不卡| 欧美丝袜亚洲另类 | 精品一区二区三区av网在线观看| 观看美女的网站| 亚洲一区二区三区色噜噜| 首页视频小说图片口味搜索| 国产成年人精品一区二区| 香蕉久久夜色| 欧美色视频一区免费| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 免费一级毛片在线播放高清视频| 亚洲国产欧美一区二区综合| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| av黄色大香蕉| 天天添夜夜摸| 久久香蕉精品热| xxxwww97欧美| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 久久久色成人| avwww免费| 亚洲中文日韩欧美视频| 黄片大片在线免费观看| 日本与韩国留学比较| 淫妇啪啪啪对白视频| 亚洲av熟女| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 中文在线观看免费www的网站| 男人舔女人的私密视频| 国产av一区在线观看免费| 亚洲性夜色夜夜综合| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 校园春色视频在线观看| 九色成人免费人妻av| 国产精品99久久99久久久不卡| 黄色片一级片一级黄色片| 久久中文看片网| netflix在线观看网站| 男人和女人高潮做爰伦理| 搡老岳熟女国产| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 国产精品久久视频播放| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 啦啦啦韩国在线观看视频| 国产精品 国内视频| 91字幕亚洲| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产精品女同一区二区软件 | 亚洲欧美激情综合另类| 欧美黄色片欧美黄色片| www日本在线高清视频| 99精品久久久久人妻精品| 国产私拍福利视频在线观看| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 在线观看日韩欧美|