環(huán)境脅迫對西藏擬溞SOD、CAT活性和MDA含量的影響

魏 杰， 班艷麗， 王 媛， 趙 文， 謝 璽， 李培培

(1. 大連海洋大學 遼寧省水生生物學重點實驗室， 大連 116023； 2. 遼寧省海洋水產(chǎn)科學研究院， 大連 116023)

環(huán)境脅迫對西藏擬溞SOD、CAT活性和MDA含量的影響

魏 杰1， 班艷麗1， 王 媛1， 趙 文1， 謝 璽2， 李培培1

(1. 大連海洋大學 遼寧省水生生物學重點實驗室， 大連 116023； 2. 遼寧省海洋水產(chǎn)科學研究院， 大連 116023)

采用實驗生態(tài)學方法，研究了高鹽(20和25)和高溫(20℃和25℃)脅迫對西藏擬溞幼溞和成溞的超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：1)在高鹽脅迫下，幼溞的SOD、CAT活性增強，MDA含量降低；成溞的SOD活性變化不明顯，CAT活性和MDA含量均降低。2)在高溫脅迫下，幼溞的SOD、CAT活性顯著增強，MDA含量也顯著增加；成溞的SOD、CAT活性增強，MDA含量則降低。研究表明幼溞對高鹽脅迫的應激能力較強，而對高溫脅迫的應激能力較弱，成溞則相反。

環(huán)境脅迫；西藏擬溞；超氧化物歧化酶；過氧化氫酶；丙二醛

西藏擬溞(DaphniopsistibetanaSars，1903)是我國唯一有文獻記錄的擬溞屬枝角類[1]，主要分布于西藏、新疆、青海等鹽水水體，水溫-2℃～18℃、pH 9.0～10.4、鹽度2～35，水體多為碳酸鹽型。在枝角類生物學研究中有其獨特的地位[2-7]。國內(nèi)外學者對開發(fā)鹽水枝角類作為海洋經(jīng)濟動物新的活餌料進行了一系列研究，其中蒙古裸腹溞(MoinamongolicaDaday)在海水中大量培養(yǎng)和投喂試驗取得了較好效果[8]，但該溞屬喜暖種類，在我國北方低水溫期培養(yǎng)有其局限性。西藏擬溞喜低溫和耐高鹽，在我國西北鹽湖中多為優(yōu)勢種群，且密度和生物量相當可觀，經(jīng)引種馴化后，可作為北方海水魚蝦早期苗種培育階段的一種活餌料[9]。

目前，國內(nèi)外在西藏擬溞的形態(tài)構(gòu)造、自然分布、進化與分類等方面已有相關(guān)報道[1-2, 10-12]，本實驗室于2001年對該溞進行海水馴化，進一步研究了其營養(yǎng)成分[13]、遺傳多樣性[14]以及環(huán)境因子對其種群增長和生理代謝等方面的影響[15-19]，獲得了該種枝角類生物學參數(shù)的第一手材料[20]，為其規(guī)?；囵B(yǎng)技術(shù)的研發(fā)[21]與優(yōu)化奠定了基礎(chǔ)。環(huán)境脅迫可造成體內(nèi)抗氧化酶系統(tǒng)紊亂，活性氧自由基大量積累，從而損害機體細胞和組織正常的生理機能和免疫防御能力，酶活性可作為衡量水生生物對環(huán)境適應能力、健康以及營養(yǎng)狀況的一個重要指標[22]。實驗室前期工作表明，水體溫度和鹽度脅迫對西藏擬溞的成溞抗氧化酶系統(tǒng)具有一定影響[23]。然而生物體不同發(fā)育階段對環(huán)境脅迫所產(chǎn)生的適應能力不同[24-25]，為了進一步比較西藏擬溞幼溞和成溞對環(huán)境脅迫的應激能力，本文研究了高鹽(20和25)和高溫(20℃和25℃)脅迫對西藏擬溞幼溞和成溞的SOD、CAT活性和MDA含量的影響，旨在為西藏擬溞室內(nèi)馴化及規(guī)?；囵B(yǎng)條件提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗用溞

試驗所用的西藏擬溞于2007年6月采自藏北納木卡錯，于鹽度16的稀釋海水中馴化培養(yǎng)，將餌料藻蛋白核小球藻(Chlorellapyrenoidesa)、牟氏角毛藻(Chaetocerosmuelleri)、鹽生杜氏藻(Dunaliellasalina)和湛江等鞭金藻(Isochrysiszhanjiangensis)混合作為食物。試驗前挑選若干同步性良好、體格健壯的母溞，在鹽度16、水溫為16℃的稀釋海水中培養(yǎng)，孤雌生殖后將幼溞吸出，繼續(xù)培養(yǎng)幼溞，如此反復，獲得生長相對同步的幼溞和成溞。

1.2 試驗條件

試驗用海水取自大連市黑石礁近海，鹽度31，pH 8.2，經(jīng)沉淀、砂濾、300目篩絹網(wǎng)過濾、煮沸消毒，用曝氣的自來水調(diào)至試驗所需的鹽度，現(xiàn)用現(xiàn)配。溫度用恒溫光照培養(yǎng)箱(美國Themo，型號：3744)控制，光周期L∶D =12 h∶12 h，光照強度為1000 lx。餌料配置的體積比為2(湛江等鞭金藻)∶1(牟氏角毛藻)∶1(蛋白核小球藻)∶1(鹽生杜氏藻)，用曝氣的自來水稀釋混合餌料，至試驗所需鹽度后進行投喂，餌料密度為8.5～9.5×106cell/mL。

1.3 試驗設(shè)計

采用群體急性試驗，試驗分為脅迫組和對照組，鹽度脅迫組為20和25，對照組鹽度為16，試驗溫度為16℃；溫度脅迫組為20℃和25℃，對照組溫度為16℃，試驗鹽度為16。脅迫組和對照組每組均設(shè)置3個重復。試驗均使用250 mL燒杯，每個燒杯裝入培養(yǎng)液200 mL，放入幼溞40只或成溞20只，幼溞體長為(0.90±0.05)mm，成溞體長為(1.80±0.05)mm。試驗過程中不投餌。經(jīng)24 h脅迫后，將幼溞或成溞從試驗液中挑出，吸干體表水分，放入離心管中，經(jīng)超微量電子天平(德國Sartorius，型號：MSA2.7S-000-DM)稱得體質(zhì)量(精確至0.000 1 g)。

1.4 粗酶液制備和酶活測定

將裝有溞體的離心管中加入預冷的勻漿介質(zhì)(4℃，pH 7.36，0.01 mol/L PBS)，于冰浴條件下超聲波破碎(400 A，5 s每次，間隔10 s反復3～5次)，再經(jīng)4℃、10 000 r/min離心10 min(德國Hermle，型號：Z36HK)，取上清液保存于-80℃?zhèn)溆?。采用南京建成生物研究所生產(chǎn)的試劑盒測定SOD、CAT活性和MDA、蛋白質(zhì)含量，操作步驟按試劑盒說明進行，均使用全波長酶標儀(美國Thermo，型號：Multiskan GO 51119200)測定。

1)SOD活性的測定。采用黃嘌呤氧化酶法測定，SOD活性定義：每毫升反應液中SOD抑制率達50.0%時所對應的SOD量為一個SOD活力單位(U)。

2)CAT活性的測定。采用可見光法測定，CAT活性定義：每毫升反應液每秒鐘分解1 μmol的H2O2的量為一個活力單位(U)。

3)MDA含量的測定。采用硫代巴比妥酸法測定，過氧化脂質(zhì)降解產(chǎn)物中丙二醛(MDA)可與硫代巴比妥酸(TBA)縮合，形成紅色產(chǎn)物，在532 nm處有最大吸收峰，從而計算MDA含量。

4)可溶性蛋白含量的測定。采用考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)含量。

1.5 統(tǒng)計分析

2 結(jié)果

2.1 高鹽脅迫對西藏擬溞SOD、CAT活性和MDA含量的影響

高鹽脅迫下西藏擬溞SOD的活性見圖1。幼溞在高鹽(20和25)脅迫下SOD活性分別為(14.61±1.29)U/mg·μg和(19.36±0.65)U/mg·μg，均高于對照組(12.08±1.33)U/mg·μg，且在鹽度為25時與對照組差異顯著(P<0.05)；成溞在高鹽脅迫下SOD活性變化不明顯，與對照組差異不顯著(P>0.05)。

圖1高鹽脅迫下西藏擬溞SOD的活性

高鹽脅迫下西藏擬溞CAT的活性如圖2所示。幼溞在高鹽(20和25)脅迫下CAT活性分別為(8.76±0.49)U/mg·μg和(6.57±0.25)U/mg·μg，均高于對照組(5.06±0.47)U/mg·μg，且在鹽度為20時與對照組差異顯著(P<0.05)；成溞在高鹽脅迫下CAT活性均低于對照組，但與對照組差異不顯著(P>0.05)。

圖2高鹽脅迫下西藏擬溞CAT的活性Fig 2 The activity of CAT in D. tibetana Sars under high salinity stress

高鹽脅迫下西藏擬溞MDA的含量見圖3。幼溞在高鹽(20和25)脅迫下MDA含量分別為(1.90±0.14)nmol/mg·μg和(2.42±0.15)nmol/mg·μg，明顯低于對照組(3.11±0.29)nmol/mg·μg，且在鹽度20時與對照組差異顯著(P<0.05)；成溞在高鹽(20和25)脅迫下MDA含量分別為(1.18±0.15)nmol/mg·μg和(1.76±0.16)nmol/mg·μg，均低于對照組(2.17±0.15)nmol/mg·μg，且在鹽度20時與對照組差異顯著(P<0.05)。

圖3高鹽脅迫下西藏擬溞MDA的含量Fig 3 MDA content in D. tibetana Sars under high salinity stress

2.2 高溫脅迫對西藏擬溞SOD、CAT活性和MDA含量的影響

高溫脅迫下西藏擬溞SOD的活性見圖4。幼溞在高溫(20℃和25℃)脅迫下SOD活性分別為(22.22±1.79)U/mg·μg和(27.35±1.41)U/mg·μg，均高于對照組(13.08±1.03)U/mg·μg，且幼溞在20℃時SOD活性與對照組差異顯著(P<0.05)，在25℃時其活性與對照組差異極顯著(P<0.01)；成溞在高溫(20℃和25℃)脅迫下SOD活性分別為(2.93±0.39)U/mg·μg和(6.16±0.62)U/mg·μg，均高于對照組(1.93±0.47)U/mg·μg，且成溞在25℃時SOD活性與對照組差異顯著(P<0.05)。

圖4 高溫脅迫下西藏擬溞SOD的活性Fig 4 The activity of SOD in D. tibetana Sars under high temperature stress

高溫脅迫下西藏擬溞CAT的活性如圖5所示。幼溞在高溫(20℃和25℃)脅迫下CAT活性分別為(10.11±0.61)U/mg·μg和(12.04±0.73)U/mg·μg，顯著和極顯著高于對照組(5.66±0.57)U/mg·μg (P<0.05和P<0.01)；成溞在高溫脅迫下CAT活性均高于對照組，但與對照組差異不顯著(P>0.05)。

圖5 高溫脅迫下西藏擬溞CAT的活性Fig 5 The activity of CAT in D. tibetana Sars under high temperature stress

圖6 高溫脅迫下西藏擬溞MDA的含量Fig 6 MDA content in D. tibetana Sars under high temperature stress

高溫脅迫下西藏擬溞MDA的含量如圖6所示。幼溞在高溫(20℃和25℃)脅迫下MDA含量分別為(4.72±0.19)nmol/mg·μg和(8.88±0.36)nmol/mg·μg，均高于對照組16℃下MDA含量(3.11±0.29)nmol/mg·μg，且在溫度為25℃時幼溞MDA含量與對照組差異極顯著(P<0.01)；成溞在高溫脅迫下MDA含量均低于對照組，但與對照組差異不顯著(P>0.05)。

3 討論

3.1 高鹽脅迫對西藏擬溞SOD、CAT活性和MDA含量的影響

鹽度是水環(huán)境中重要的理化因子，水體鹽度的變化會引起水生動物產(chǎn)生一定的應激反應，鹽度通過滲透壓調(diào)節(jié)機體的各項生理機能和機體氧自由基的平衡[31]。趙文等研究了鹽度對西藏擬溞排氨率、個體耗氧率和比耗氧率的影響[18-19]，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著鹽度(5、10、15、20和25)的升高，其排氨率和耗氧率均升高，說明該溞的呼吸代謝能力隨著鹽度的升高而增強。也有研究表明，機體的抗氧化酶活性隨呼吸代謝的增加而升高[32]。

本研究發(fā)現(xiàn)，幼溞在高鹽(20和25)脅迫下，其體內(nèi)的抗氧化酶SOD、CAT活性增強，MDA含量降低。這說明隨著水體鹽度的升高，在生物體內(nèi)細胞與外界水環(huán)境之間，形成較高的滲透壓落差，導致幼溞機體的滲透調(diào)節(jié)功能加強。此時，幼溞為了應答鹽脅迫環(huán)境，機體活動代謝在短時間內(nèi)過于旺盛，代謝產(chǎn)生過多的氧自由基，刺激誘導體內(nèi)SOD和CAT 的產(chǎn)生。大量的SOD和CAT降低或清除了活性氧，減少了氧自由基對機體造成的氧化損傷，使機體MDA含量降低。

本試驗幼溞體內(nèi)SOD和CAT分別在鹽度25和鹽度20時活性最高，分析可能不同的抗氧化酶在同一環(huán)境脅迫下所產(chǎn)生的應激性不同，包斯琴等[33]在研究外生菌根菌Paxillus的抗鹽機理時發(fā)現(xiàn)，隨鹽度脅迫程度的不同，菌株體內(nèi)抗氧化酶活性的變化規(guī)律有所差異，但是鹽處理的菌株抗氧化酶活性明顯高于對照菌株。本試驗結(jié)果與之相符。本試驗幼溞體內(nèi)MDA含量在鹽度25組較鹽度20組有所升高，說明在鹽度25下，機體脂質(zhì)過氧化程度較高，間接反映出氧自由基對細胞膜損傷較為嚴重，機體在鹽度25下的生理功能和免疫防御能力有所減弱。

通常情況下，機體受到輕度逆境脅迫時，SOD和CAT活性往往升高，清除脅迫反應代謝過程中產(chǎn)生的自由基[26]。而隨著逆境脅迫程度的增加，干擾了機體SOD、CAT等抗氧化防御物質(zhì)的產(chǎn)生，使得SOD和CAT等酶活性降低，體內(nèi)積累了過多的氧自由基無法清除，導致機體受到氧化損傷[34]。本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在高鹽(20和25)脅迫下，成溞的SOD活性變化不明顯，CAT活性和MDA含量均降低，這說明鹽度脅迫對成溞機體已造成嚴重傷害，蛋白質(zhì)、脂類等機體物質(zhì)的代謝過程都受到影響，其中抗氧化酶等防御物質(zhì)的合成與活性可能受到了抑制。本實驗室前期研究結(jié)果表明[23]，成溞在鹽度20和25組的MDA含量均低于鹽度15組，且鹽度20組顯著低于鹽度15組。王巧晗等研究發(fā)現(xiàn)，鹽度影響西藏擬溞的生長和生殖[35]，在適合鹽度(10，15)范圍內(nèi)，溞體內(nèi)各組織器官代謝活動能夠保持平衡狀態(tài)。本試驗結(jié)果與之相符。

通過上述分析得出，幼溞對高鹽脅迫應激能力較強。雖然西藏擬溞對滲透壓具有低滲和高滲雙重調(diào)節(jié)機制，但從本試驗結(jié)果來看，幼溞的滲透壓調(diào)節(jié)能力較強具有一定可塑性，而成溞由于長時間室內(nèi)培養(yǎng)于鹽度為16的稀釋海水中，其滲透壓的調(diào)節(jié)能力減弱。

3.2 高溫脅迫對西藏擬溞SOD、CAT活性和MDA含量的影響

溫度作為影響生物生理活動的重要環(huán)境因子，影響著生物體的抗氧化防御體系，能有效地控制生物代謝的反應速率，是影響生物生理活動的重要環(huán)境變量。溫度脅迫也會引起水生動物產(chǎn)生一定的應激反應，導致體內(nèi)生理生化指標發(fā)生改變。趙文等研究了溫度對西藏擬溞排氨率、個體耗氧率和比耗氧率的影響[18-19]，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著溫度(3℃、8℃、14℃、20℃和22℃)的升高，其排氨率和耗氧率均增加，說明該溞體內(nèi)代謝反應速率隨溫度的升高而增強。

西藏擬溞屬耐低溫種類，適宜溫度為16℃[35]。本研究發(fā)現(xiàn)，在高溫(20℃和25℃)脅迫下，幼溞的SOD和CAT活性顯著增強，MDA含量也顯著升高。表明幼溞在高溫脅迫下產(chǎn)生了抗氧化應激反應，隨脅迫溫度的升高，活性氧自由基越多，為了維持細胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，SOD和CAT消除活性氧自由基的能力也隨之增強，但超過一定的耐受范圍后，體內(nèi)積累過多的氧自由基對西藏擬溞幼溞造成了嚴重的氧化損傷，導致MDA含量隨脅迫程度的增加而升高。

本研究發(fā)現(xiàn)，在高溫(20℃和25℃)脅迫下，成溞的SOD、CAT活性增強，MDA含量則降低。說明成溞隨溫度的升高，體內(nèi)SOD和CAT活力隨之增強，體內(nèi)活性氧自由基能夠維持平衡，可減少氧自由基攻擊或破壞生物膜，因而機體內(nèi)MDA含量降低。本實驗室前期研究結(jié)果表明[23]，脅迫24 h后，同一鹽度下，西藏擬溞成溞的SOD活性隨著溫度(16℃、19℃、22℃、25℃和28℃)的升高而升高，25℃和28℃與其他處理組差異顯著；MDA含量隨著溫度的升高呈先降低后升高的趨勢。本試驗結(jié)果與之相符。王巧晗等研究發(fā)現(xiàn)，溫度影響西藏擬溞的生長和生殖[35]，溫度高于16℃時，機體活動代謝失衡影響其正常的生長發(fā)育。高溫脅迫可能促進了成溞的性成熟和能量分配，機體代謝發(fā)生改變，導致成溞體內(nèi)某些蛋白類物質(zhì)的產(chǎn)生，從而也可導致成溞體內(nèi)MDA含量的相對下降。

通過上述分析得出，成溞對高溫脅迫應激能力較強。幼溞體質(zhì)較成溞弱，各項生理機能可能尚未發(fā)育完全，因此對溫度變化更為敏感。西藏擬溞在馴化和培養(yǎng)中應充分考慮溫度和鹽度對其的交互影響，盡量減少調(diào)整滲透壓生理耗能，降低氧化應激，以較好地發(fā)揮西藏擬溞的生長潛能。該研究結(jié)果可為西藏擬溞馴化和規(guī)模化培養(yǎng)利用提供科學依據(jù)，為環(huán)境因子對其他枝角類抗氧化系統(tǒng)的影響提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

[1]SARS G O．On the crustacean fauna of central Asia. Pt.Ⅱ[J]．Ann Mus Zool St. Pétersb， 1903， 8：157-194.

[2]趙 文，王巧晗，鄭綿平，等．西藏擬溞生物學的初步研究[J]．大連水產(chǎn)學院學報，2002，17(3)：209-214.

[3]蔣燮治，堵南山．中國動物志(節(jié)肢動物門甲殼綱淡水枝角類)[M]．北京：科學出版社，1979：122-124.

[4]蔣燮治，沈韞芬，龔循矩．西藏無脊椎動物[M]．北京：科學出版社，1983：443-492.

[5]趙 文．內(nèi)陸鹽水水體枝角類研究述評[J]．大連水產(chǎn)學院學報，1991，6(2)：31-41.

[6]趙 文，姜 宏，何志輝．三北地區(qū)內(nèi)陸鹽水的浮游甲殼類[J]．大連水產(chǎn)學院學報，1996，11(1)：1-13.

[7]沈嘉瑞，宋大祥．西藏枝角類的初步研究[J]．動物學報，1964，16(1)：61-69.

[8]何志輝，姜 宏，姜志強，等．蒙古裸腹溞作為海水魚苗活餌料的試驗[J].大連水產(chǎn)學院學報，1997，12(4)：1-7.

[9]霍元子，趙 文，梁 淼．海水中大量培養(yǎng)西藏擬溞及作為紅鰭東方鲀魚苗活餌料的研究[J]．大連水產(chǎn)學院學報，2006，21(4)：325-330.

[10]趙 文，王巧啥．西藏擬溞形態(tài)構(gòu)造的再描述[J]．大連水產(chǎn)學院學報，2005，20(3)：165-173.

[11]趙 文，張 鵬，霍元子，等．西藏擬溞的染色體核型研究[J]．大連水產(chǎn)學院學報，2004，19(3)：167-170.

[12]趙 文，李 睿．4個品系西藏擬溞12S rRNA基因序列及其分子進化研究[J]．大連海洋大學學報，2012，27(4)：006.

[13]趙 文，霍元子，高 敬．西藏擬溞營養(yǎng)成分的分析與評價[J]．中國水產(chǎn)科學，2006，13(3)：446-451.

[14]趙 文，畢進紅，韓婷婷，等．西藏擬溞遺傳多樣性的初步研究[J]．大連海洋大學學報，2011，26(2)：108-113.

[15]郭君秀，唐 玨，趙 文，等．重金屬Hg2+、Cd2+對西藏擬溞的急性毒性研究[J]．生物學雜志，2012，29(3)：14-16.

[16]霍元子，趙 文，魏 杰．Cu2+、Zn2+、Co2+、Ni2+、Li+對西藏擬溞的急性與聯(lián)合毒性效應[J]．中國水產(chǎn)科學，2011，18(2)：466-471.

[17]趙 文，霍元子，薛東寧．堿度和pH對西藏擬溞存活、生長和生殖的影響[J]．水生生物學報，2007，31(3)：332-338.

[18]趙 文，張 琳，霍元子．溫度、鹽度和體長對西藏擬溞耗氧率的影響[J]．生態(tài)學報，2005， 25(7)：1549-1553.

[19]趙 文，梁 蕭，謝 璽，等．溫度、鹽度和體長對西藏擬溞(DaphniopsistibetanaSars)排氨率的影響[J]．生態(tài)學報，2008，28(12)：6385-6389.

[20]趙 文，何志輝，殷守仁．鹽水枝角類的生物學及海水培養(yǎng)利用[M]．北京：科學出版社，2008：141-184.

[21]由志欣，趙 文，魏 杰，等．海水中規(guī)?；囵B(yǎng)西藏擬溞的技術(shù)優(yōu)化研究[J]．大連海洋大學學報，2015，30(1)：73-78.

[22]RUDNEVA I I．Blood antioxidant system of Black Sea elasmobranch and teleost[J]．Comparative Biochemistry and Physiology，1997，118(2)：255-260.

[23]亢玉靜，趙 文，魏 杰．溫度和鹽度對西藏擬溞抗氧化酶和脂質(zhì)過氧化作用的影響[J]．生態(tài)學報，2015，35(4)：1037-1044.

[24]BARATA C， NAVARRO J C， VARO I， et al．Changes in antioxidant enzyme activities, fatty acid composition and lipid peroxidation inDaphniamagnaduring the aging process[J]．Comparative Biochemistry and Physiology Part B: Biochemistry and Molecular Biology， 2005， 140(1)：81-90.

[25]ALBERTO A C， ROCIO O B， FERNANDO M J． Age effect on the antioxidant activity ofDaphniamagna(Anomopoda: Daphniidae): Does younger mean more sensitivity?[J]．Journal of Environmental Biology， 2011， 32(4)：481-487.

[26]BORGERAAS J， HESSEN D O． UV-B induced mortality and antioxidant enzyme activities inDaphniamagnaat different oxygen concentrations and temperatures[J]．Journal of Plankton Research， 2000， 22(6)：1167-1183.

[27]BECKER D， BRINKMANN B F， ZEIS B， et al．Acute changes in temperature or oxygen availability induce ROS fluctuations inDaphniamagnalinked with fluctuations of reduced and oxidized glutathione, catalase activity and gene (haemoglobin) expression[J]．Biology of the Cell， 2011， 103(8)：351-363.

[28]亢玉靜，郎明遠，趙 文．水生生物體內(nèi)抗氧化酶及其影響因素研究進展[J]．微生物學雜志，2013，33(3)：75-80.

[29]PIPE R K， PORTE C， LIVINGSTONE D R． Antionxidant enzymes associated with the blood cells and haemolymph of the musselMytilusedulis[J]．Fish and Shellfish Immunology， 1993， 3(3)：221-233.

[30]王 妤，莊 平，章龍珍，等．鹽度對點籃子魚的存活、生長及抗氧化防御系統(tǒng)的影響[J]．水產(chǎn)學報，2011，35(1)：66-73.

[31]JARVIS P L， BALLANTYNE J S．Metabolic responses to salinity acclimation in juvenile shortnose sturgeonAcipenserbrevirostrum[J]．Aquaculture， 2003， 219(1-4)：891-909.

[32]FJLHO D W， GIULIVI C， BOVERIS A．Antioxidant defences in marine fish-Elasmobranhs[J]．Comparative Biochemistry and Physiology，1993，106(2)：409-413.

[33]包斯琴，李 靜，孫 健，等．鹽脅迫下外生菌根菌Paxillus抗氧化酶活性的變化[J]．安徽農(nóng)業(yè)科學， 2012， 40(15)：8401-8403.

[34]孔繁翔．環(huán)境生物學[M]．北京：高等教育出版社， 2002： 55.

[35]王巧晗．溫度和鹽度對西藏擬溞存活、生長、發(fā)育和生殖的影響[D]．大連：大連水產(chǎn)學院， 2004.

Effects of environmental stress on activity of SOD, CAT and MDA content inDaphniopsisTibetanaSars

WEI Jie1， BAN Yan-li1， WANG Yuan1， ZHAO Wen1， XIE Xi2， LI Pei-pei1

(1. Key Laboratory of Hydrobiology in Liaoning Province, Dalian Ocean University, Dalian 116023； 2. Liaoning Ocean and Fisheries Science Research Institute, Dalian 116023, China)

The present study investigated the effects of salinity (20 and 25) and temperature (20℃ and 25℃) stress on activities of SOD(Superoxide Dlismutase), CAT(Catalase) and MDA(Maldondialdehyde) content in juvenile and adult ofDaphniopsistibetanaSars, by method for experimental ecology, respectively. The result showed that high concentration of salt stress treatment increased the activities of SOD and CAT and reduced MDA content in juvenile. There were no significant differences in adult SOD activity induced by high salinity stress. And the activity of CAT and MDA content were higher in experimental group (salinity 20 and 25) compared with the control group (salinity 16). High temperature stress (20℃ and 25℃) obviously increased the activities of SOD and CAT, MDA content in juvenile. While the adult under high temperature treatment showed the increase SOD and CAT activities, yet the decrease of MDA content. The results indicated that the juveniles were more tolerant to high salinity stress, less tolerant to high temperature stress than the adults. The results were opposite in adults compared with juveniles under high salinity or temperature stress. These results provide some basic data for the research on antioxidative enzyme system in other cladocerans species under environmental stress, and scientific base for the domestication and large-scale culture ofDaphniopsistibetanaSars.

environmental stress；DaphniopsistibetanaSars； SOD； CAT； MDA

2016-10-18；

2016-10-24

國家自然科學基金項目 (41501535)；國家科技基礎(chǔ)性工作專項(2014FY210700)

魏 杰，副研究員，主要從事浮游生物實驗生態(tài)學研究，E-mail：weijie@dlou.edu.cn

趙 文，教授，博士生導師，主要從事水域生態(tài)學研究，E-mail：zhaowen@dlou.edu.cn

Q178.1

A

2095-1736(2017)03-0042-05

doi∶10.3969/j.issn.2095-1736.2017.03.042