楊成祥,張芳生,孟令召,趙 蕾
(1.河南省中獸藥制劑工程技術(shù)研究中心,河南 鄭州 450008;2.河南省南陽市禽藥工程技術(shù)研究中心,河南 方城 473200;3.河南省河南納瑞森生物藥業(yè)有限公司,473200;)
新城疫(newcastle disease,ND)是由新城疫病毒引起禽的一種急性、熱性、敗血性和高度接觸性傳染病。以高熱、呼吸困難、下痢、神經(jīng)紊亂、黏膜和漿膜出血為特征,具有很高的發(fā)病率和病死率,是危害養(yǎng)禽業(yè)的一種主要傳染病,OIE將其列為A類疫病。
復(fù)方金銀花注射液是以金銀花、蒲公英、梔子和大青葉為原料,按照一定的比例合理配伍,并經(jīng)現(xiàn)代提取技術(shù)研發(fā)的一種防治禽瘟熱病的中藥復(fù)方水針制劑,該產(chǎn)品可用于防治畜禽多種瘟熱性疾病,如家禽的新城疫、禽流感及豬、牛、羊等家畜瘟熱病等。
1.1 金銀花 性甘、寒,歸肺、心、胃經(jīng)。功能與主治:清熱解毒,疏散風(fēng)熱。用于癰腫疔瘡,喉痹,丹毒,熱毒血痢,風(fēng)熱感冒,溫病發(fā)熱?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究,金銀花具有廣泛的抗多種原微生物、抗炎和解、抗內(nèi)毒素、興奮中樞神經(jīng)和加強(qiáng)免疫功能等作用。
1.2 蒲公英 性苦、甘、寒,歸肝、胃經(jīng)。功能與主治:清熱解毒,消腫散結(jié),利尿通淋。用于疔瘡腫毒,乳癰,瘰疬,目赤,咽痛,肺癰,腸癰,濕熱黃疸,熱淋澀痛?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn),蒲公英含有多種化學(xué)活性成分,具有較強(qiáng)的抗菌通乳、抗腫瘤、利膽等作用,此外本品尚有利尿健胃,輕瀉等作用。
1.3 梔 子 性苦、寒,歸心、肺、三焦經(jīng)。功能與主治:瀉火除煩,清熱利濕,涼血解毒;外用消腫止痛。用于熱病心煩,濕熱黃疸,淋證澀痛,血熱吐衄,目赤腫痛,火毒瘡瘍,外治扭挫傷痛。梔子果實(shí)及果皮中含有很多活性成分,對金黃色葡萄球菌、腦膜炎雙球菌、卡他球菌、鉤端螺旋體及血吸蟲成蟲等抗病原微生物有抑制和殺滅作用。
1.4 大青葉 性苦、寒,歸心、胃經(jīng)。功能與主治:清熱解毒,涼血消斑。用于溫病高熱,神昏,發(fā)斑發(fā)疹,痄腮,喉痹,丹毒,癰腫。大青葉具有廣譜而較強(qiáng)的抗菌抗病毒作用,對金黃色葡萄球菌、甲型鏈球菌、腦膜炎雙球菌、肺炎雙球菌、卡他球菌、傷寒桿菌、大腸桿菌、流感嗜血桿菌、白喉?xiàng)U菌及痢疾桿菌均有一定程度的抑制作用,對乙型腦炎病毒、腮腺炎病毒、流感病毒亦有抑制作用,對鉤端螺旋體也有殺滅作用。另外還具有較好的抗炎、解熱等作用。
2.1 原料藥的預(yù)處理 將優(yōu)質(zhì)金銀花、蒲公英、梔子和大青葉分別除雜、晾干,粉碎成粒度為40~160目細(xì)粉備用。
2.2 按照配方稱取金銀花、蒲公英、梔子和大青葉,加水浸提3次,第一次浸提用12倍金銀花重量的水浸泡30~40min,文火煎煮40h,過濾,得第一濾液;第一次過濾藥渣加入10倍金銀花重量的水進(jìn)行第2次浸提,文火煎煮30h,過濾,得第2濾液;第2次過濾藥渣再加10倍金銀花重量的水進(jìn)行第3次浸提,文火煎煮30min,過濾,得第3濾液,合并第一濾液、第2濾液和第3濾液。
2.3 將步驟2合并后的濾液離心處理得上清液,將上清液進(jìn)行微濾、超濾,超濾后的濾液經(jīng)減壓濃縮至相對密度為1.2~1.36。
2.4 將步驟3減壓濃縮后藥液加蒸餾水定容至配制量,灌裝、滅菌即得成品。
3.1 試驗(yàn)材料
復(fù)方金銀花注射液;由河南省中獸藥制劑工程技術(shù)研究中心按上述制備工藝和步驟制得,批號:2018072001;利巴韋林:購自北京某醫(yī)藥化工有限公司,批號:2018061001。
3.2 試驗(yàn)雞場選擇與分組
試驗(yàn)安排在南陽方城縣某存欄5萬只規(guī)?;唐妨_曼褐殼蛋雞場處于326日齡產(chǎn)蛋高峰期的不同發(fā)病階段的三個(gè)圈舍,采病料、血樣經(jīng)AGP、HI試驗(yàn)、細(xì)菌培養(yǎng)、病毒分離,結(jié)合臨床癥狀、病理剖檢確診為新城疫病毒感染性疾病。分別在3個(gè)圈舍分別各隨機(jī)檢出100只蛋雞并編組。甲組100只完全隨機(jī)分成試驗(yàn)組50只,對照組50只;乙組100只完全隨機(jī)分成試驗(yàn)組50,對照組50只;丙組100只完全隨機(jī)分成試驗(yàn)組50只,對照組50只。
3個(gè)組供試蛋雞均為326日齡羅曼褐殼蛋雞。甲組羅曼褐殼蛋雞群為發(fā)病第3日齡,乙組羅曼褐殼蛋雞群尚未出現(xiàn)癥狀但已處于潛伏期,丙組羅曼褐殼蛋雞群為發(fā)病后第14日齡。
3.3 飼養(yǎng)管理
每個(gè)按正常的飼養(yǎng)管理辦法進(jìn)行飼養(yǎng)管理,各個(gè)飼養(yǎng)管理?xiàng)l件相同,各試驗(yàn)組與其相應(yīng)的對照組管理辦法亦完全一樣。
3.4 試驗(yàn)方案
各對照組用160mg/L的利巴韋林飲水,試驗(yàn)組用復(fù)方金銀花注射液,試驗(yàn)甲組劑量為200mg/L,試驗(yàn)乙、丙組劑量為160mg/L,連用14d。每天觀察并記錄各組羅曼褐殼蛋雞的精神、采食、飲水、糞便、發(fā)病數(shù)和死亡數(shù)等情況。在本試驗(yàn)中乙組羅曼褐殼蛋雞群在試驗(yàn)的第4天2組均開始發(fā)病,丙組羅曼褐殼蛋雞群的對照組在試驗(yàn)的第6天即初發(fā)后第20天復(fù)發(fā)新城疫。
表1 試驗(yàn)結(jié)果
由表1可以看出,試驗(yàn)開始時(shí)各試驗(yàn)組與對照組產(chǎn)蛋率水平相當(dāng)(P>0.05),試驗(yàn)期中,各試驗(yàn)組在所有指標(biāo)上明顯優(yōu)于相應(yīng)的對照組,各試驗(yàn)組與相應(yīng)的對照組比較,在發(fā)病率上甲組表現(xiàn)相同,乙組表現(xiàn)顯著性差異(P<0.05),丙個(gè)表現(xiàn)極顯著性差異(P<0.01);在死亡率上甲、乙兩個(gè)組表現(xiàn)差異不顯著(P>0.05),丙組表現(xiàn)差異極顯著(P<0.01);在產(chǎn)蛋率下降幅度上甲、乙、丙3個(gè)組表現(xiàn)差異均極顯著 (P<0.01);在畸形蛋率上甲、乙、丙3個(gè)組表現(xiàn)差異均顯著 (P<0.05)。
通過本次防治試驗(yàn)的結(jié)果結(jié)合本病在當(dāng)?shù)氐牧餍刑攸c(diǎn),可以得出下面幾點(diǎn)結(jié)論:
5.1 在瘟病發(fā)病的前、中、后三個(gè)階段應(yīng)用復(fù)方金銀花注射液防治,均可大大降低蛋雞的死亡率和產(chǎn)率下降的幅度,中藥復(fù)方金銀花注射液有明顯的抗病毒、抗炎癥作用,效果明顯優(yōu)于利巴韋林。
5.2 初次發(fā)病的耐過蛋雞群顯然對本病能獲得一定的免疫力,但因本病破壞蛋雞的免疫系統(tǒng),不少蛋雞群常在初發(fā)20~30d后會有不同程度地復(fù)發(fā)本病,如果初發(fā)后使用復(fù)方金銀花注射液可有效防止本病的復(fù)發(fā)。
5.3 應(yīng)用防治畜禽瘟熱病的復(fù)方金銀花注射液防治本病在降低產(chǎn)率下降、殼質(zhì)量恢復(fù)方面明顯優(yōu)于利巴韋林。
5.4 中醫(yī)認(rèn)為金銀花具有“補(bǔ)中益氣,固表升陽,生肌,扶內(nèi)固本”的藥效。防治畜禽瘟熱病的中藥復(fù)方金銀花注射液是由中藥金銀花通過精致提練而成,主要成分為金銀花Ⅰ、金銀花Ⅱ等多種免疫增強(qiáng)物質(zhì),再配以蒲公英、梔子和大青葉,互相支持,能激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生大量白細(xì)胞干擾素和吞噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞;而且能強(qiáng)化體內(nèi)的體液免疫途徑,產(chǎn)生大量的免疫球白和補(bǔ)體,改善微循環(huán),有效地調(diào)理和增強(qiáng)機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫,提高機(jī)體免疫功能,對病毒產(chǎn)生干擾、吞噬、結(jié)合作用,多種途徑殺滅病毒和細(xì)菌,并有清熱解毒和調(diào)節(jié)機(jī)體代謝機(jī)能紊亂之功效,增強(qiáng)禽類抗病能力。
5.5 復(fù)方金銀花注射液對畜禽瘟熱疾病治療效果良好,而且中草藥能克服耐藥問題并符合無公害產(chǎn)品的生產(chǎn)要求。復(fù)方金銀花制劑可以開發(fā)為注射劑、口服液或粉劑,應(yīng)用方便;機(jī)械化生產(chǎn),產(chǎn)量大,成本低,并且衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)也容易達(dá)到。
5.6 復(fù)方金銀花注射液具有廣譜抗病毒、抑制細(xì)菌、退熱消炎、提高細(xì)胞免疫功能的作用,散外邪,清內(nèi)火,驅(qū)瘟疫邪毒。一些臨床實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明,還具有強(qiáng)大的廣譜抗病毒作用,能夠有效地防治瘟熱毒癥侵害機(jī)體所致的畜禽流行性感冒、禽溫和型流感等熱毒癥。