非器質(zhì)性失眠癥患者外周血清氧化應(yīng)激因子水平研究☆

王新源 潘燕 李玲 陳強(qiáng) 佘琴

非器質(zhì)性失眠癥是以頻繁而又持續(xù)的入睡困難和（或）睡眠維持困難并導(dǎo)致睡眠感不滿意為特征的睡眠障礙[1]。隨著社會(huì)節(jié)奏加快及社會(huì)壓力增大，失眠發(fā)生率日益增高。國(guó)外資料報(bào)道，25%的成人對(duì)自己的睡眠不滿意，10%～15%主訴失眠癥狀影響日間功能，6%～10%符合失眠的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。盡管有許多研究從生物學(xué)、行為學(xué)及精神心理因素探討失眠的病因及發(fā)病機(jī)制，但目前仍未完全闡明。越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，機(jī)體抗氧化平衡失調(diào)和氧化應(yīng)激狀態(tài)在精神疾病的生物學(xué)機(jī)制中可能扮演重要角色，如精神分裂癥、雙相情感障礙、重性抑郁障礙等[3]。GULEC等[4]的研究發(fā)現(xiàn)睡眠可能在減弱氧化應(yīng)激方面起著重要作用，LIANG等[5]的研究同樣發(fā)現(xiàn)原發(fā)性失眠與氧化應(yīng)激有關(guān)聯(lián)。為探討非器質(zhì)性失眠癥與氧化應(yīng)激之間的關(guān)系，本研究對(duì)非器質(zhì)性失眠癥患者血清中氧化應(yīng)激因子進(jìn)行測(cè)定，以了解非器質(zhì)性失眠癥患者血清中氧化應(yīng)激因子水平的變化。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象2015年1月至2017年3月在新疆精神衛(wèi)生中心睡眠醫(yī)學(xué)科就診的非器質(zhì)性失眠癥患者。入組標(biāo)準(zhǔn)：①符合《國(guó)際疾病與相關(guān)健康問題統(tǒng)計(jì)分類》（ICD-10）有關(guān)非器質(zhì)性失眠癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；②匹茲堡睡眠質(zhì)量指數(shù)（Pittsburgh sleep quality index,PSQI）≥8分[7]；③年齡18～60歲；④小學(xué)以上文化水平，能夠理解和配合研究的要求。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有腦器質(zhì)性精神障礙；②有藥物濫用或物質(zhì)成癮障礙；③患有嚴(yán)重抑郁障礙、焦慮障礙等精神疾??；④患有嚴(yán)重的軀體疾病或神經(jīng)系統(tǒng)疾病，近期有外傷或近1周內(nèi)感染或發(fā)熱者；⑤有其他形式的睡眠障礙，如發(fā)作性睡病、不寧腿綜合征及睡眠呼吸暫停低通氣綜合征；⑥近2周曾使用任何鎮(zhèn)靜催眠藥物、抗抑郁藥物、抗精神病藥物，及可能影響體內(nèi)氧化應(yīng)激水平的其它藥物，如維生素C、抗炎藥物等；⑦妊娠、哺乳期及圍絕經(jīng)期婦女，月經(jīng)期婦女待非月經(jīng)期再行測(cè)評(píng)。共納入患者78例，男33例、女45例，平均（50.22±9.06）歲。對(duì)照組來自于新疆精神衛(wèi)生中心健康職工。入組標(biāo)準(zhǔn)：①年齡18～60歲，年齡、性別、民族等與患者組相匹配；②PSQI≤7分；③既往無精神疾病史及精神疾病家族史；④無各種形式的睡眠障礙、精神疾病及其它軀體疾?。虎萁?年內(nèi)無從事倒班工作；⑥小學(xué)以上文化水平，能夠理解和配合研究的要求。排除標(biāo)準(zhǔn)同患者組。共納入對(duì)照76名，其中男30名、女46名，平均（51.63±10.66）歲。入組患者及對(duì)照均簽署知情同意書。本研究方案由本院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)后實(shí)施。

1.2 研究方法

1.2.1一般資料收集及量表評(píng)定 采用自制一般資料調(diào)查問卷，收集患者與對(duì)照組的一般人口學(xué)資料，包括年齡、性別、吸煙、飲酒、嗜高鹽及高脂飲食、藥物過敏史等。所有入組人員均經(jīng)2名精神心理睡眠?？频母敝魅吾t(yī)師檢查，并使用PSQI量表評(píng)定受試者近1個(gè)月主觀睡眠質(zhì)量。

1.2.2血清標(biāo)本采集 所有受試者 （患者需在安眠藥物治療前）在清晨7：30-8：30空腹?fàn)顟B(tài)下，用生化管取左側(cè)肘靜脈血5mL，室溫下靜置2h，隨后在4℃下以3000r/m離心20min，取上層清液置于-80℃冰箱凍存。

1.2.3自由基與抗氧化酶檢測(cè) 使用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法檢測(cè)血清過氧化氫酶（catalase,CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶 （glutathione peroxidase,GSH-Px）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）及丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平，試劑盒型號(hào)分別為 A005、A003-1、A001-3和 A007-1（均購(gòu)自南京建成科技有限公司）。所有樣本由同一人員測(cè)定，測(cè)定過程嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。每個(gè)樣本測(cè)定3次，結(jié)果取其平均值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。對(duì)患者組和對(duì)照組的一般資料、PSQI評(píng)分和血清氧化應(yīng)激因子水平進(jìn)行描述性分析，采用χ2檢驗(yàn)、獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)、Mann-WhitneyU檢驗(yàn)（PSQI評(píng)分、SOD和MDA結(jié)果呈非正態(tài)分布）進(jìn)行組間比較?；颊逷SQI總分與血清各氧化應(yīng)激指標(biāo)相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，雙側(cè)檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 一般資料患者組年齡、性別、吸煙、飲酒、嗜鹽及高脂飲食、藥物過敏史等方面與對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。 見表1。

2.2 PSQI評(píng)分患者組PSQI評(píng)分的總分（Z=-0.679,P＜0.001）及睡眠質(zhì)量因子分 （Z=-10.698,P＜0.001）、入睡時(shí)間因子分（Z=-10.698,P＜0.001）、睡眠時(shí)間因子分（Z=-10.821,P＜0.001）、睡眠效率因子分（Z=-11.412,P＜0.001）、睡眠障礙因子分（Z=-8.844,P＜0.001）、催眠藥物因子分（Z=-7.370,P＜0.001）、日間功能障礙因子分（Z=-10.533,P＜0.001）均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2。

表1 患者組與對(duì)照組一般資料情況

2.3 氧化應(yīng)激指標(biāo)患者組血清中CAT（t=-7.530,P＜0.001）、GSH-Px（t=-4.404,P＜0.001）、SOD（Z=-5.817,P＜0.001）水平低于對(duì)照組，MDA 水平（Z=3.742,P＜0.001）高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。 見表3。

表2 患者組與對(duì)照組PSQI評(píng)分結(jié)果

2.4 患者組血清氧化應(yīng)激指標(biāo)與PSQI相關(guān)性患者組 PSQI總分與血清中 CAT（r=-0.445，P＜0.001）、GSH-Px（r=-0.393，P＜0.001）、SOD（r=-0.460，P＜0.001）水平呈統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)相關(guān)，與MDA水平相關(guān)性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（r=0.082，P=0.310）。

表3 患者組與對(duì)照組氧化血清應(yīng)激指標(biāo)

3 討論

隨著生物精神病學(xué)發(fā)展，氧化應(yīng)激與非器質(zhì)性失眠癥之間的關(guān)系受到越來越多關(guān)注。氧化應(yīng)激是內(nèi)源性和/或外源性刺激使機(jī)體代謝異常而產(chǎn)生大量活性氧自由基，或因機(jī)體抗氧化物不足，氧化與抗氧化物動(dòng)態(tài)平衡失調(diào)，機(jī)體處于氧化應(yīng)激狀態(tài)，氧化應(yīng)激可使DNA、脂質(zhì)及蛋白質(zhì)受到氧化損傷，進(jìn)而引起細(xì)胞死亡和組織損傷[8]。臨床上常通過檢測(cè)自由基的氧化代謝產(chǎn)物（如MDA）、抗氧化物酶（如 CAT、GSH-Px、SOD）和非酶抗氧化劑（如維生素E、維生素C及谷胱甘肽）等評(píng)估機(jī)體氧化應(yīng)激水平[9]。

睡眠剝奪可通過多種途徑誘發(fā)機(jī)體的氧化應(yīng)激，目前認(rèn)為其發(fā)生機(jī)制包括睡眠剝奪后能量消耗代謝增加導(dǎo)致氧化自由基（reactie oxygen species，ROS）產(chǎn)生過多，機(jī)體抗氧化防御系統(tǒng)能力降低，以及通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum stress,ERS）間接引起氧化應(yīng)激等3條途徑[10]。本研究發(fā)現(xiàn)患者組血清中MDA水平明顯高于對(duì)照組，CAT、GSH-Px、SOD水平顯著低于對(duì)照組，說明非器質(zhì)性失眠癥患者抗氧化酶的活性降低，從而降低了抗氧化能力，提示非器質(zhì)性失眠癥可能使體內(nèi)氧化應(yīng)激水平加重，氧化應(yīng)激在非器質(zhì)性失眠癥的發(fā)生、發(fā)展中具有一定作用，此結(jié)果支持失眠的氧化應(yīng)激假說[5]。失眠是一種常見的睡眠—覺醒障礙，覺醒狀態(tài)時(shí)，過多的認(rèn)知活動(dòng)增加大腦皮層谷氨酸能傳遞物質(zhì)的興奮性和氧需求量及供給量，從而提高神經(jīng)遞質(zhì)的氧化水平，使ROS產(chǎn)生過多，機(jī)體氧化應(yīng)激水平增高[11]。

GULEC等[4]探討抗氧化物質(zhì)及氧化應(yīng)激代謝產(chǎn)物與主觀睡眠狀況的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)血清MDA濃度與PSQI總分呈正相關(guān)；而血漿抗氧化物質(zhì)GSH和GSH-Px表達(dá)水平與PSQI總分呈負(fù)相關(guān)[4]。本研究發(fā)現(xiàn)非器質(zhì)性失眠癥患者血清中的CAT、GSH-Px、SOD濃度與 PSQI總分呈負(fù)相關(guān)，MDA濃度與PSQI總分呈正相關(guān)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果類似。

本研究存在一定的局限性：如外周血清CAT、GSH-Px、SOD、MDA水平改變并不能說明其與非器質(zhì)性失眠癥存在因果關(guān)系；研究中也未進(jìn)行多導(dǎo)睡眠圖（polysomnography,PSG）等客觀檢查，非器質(zhì)性失眠癥患者往往對(duì)自身失眠狀況帶有夸大評(píng)價(jià)的主觀性，可能會(huì)使臨床醫(yī)生對(duì)病情把握不夠準(zhǔn)確。未來需要開展對(duì)患者同時(shí)檢測(cè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周血氧化應(yīng)激因子水平的大樣本前瞻性研究，篩選患者時(shí)增加評(píng)價(jià)睡眠質(zhì)量的客觀指標(biāo)，如PSG等，更加深入地探討氧化應(yīng)激與非器質(zhì)性失眠癥之間的關(guān)系。