細(xì)菌性陰道病檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品安全有效性研究

李風(fēng)梅 張龔敏 吳林蔚 廣東省藥品監(jiān)督管理局審評(píng)認(rèn)證中心 （廣東 廣州 510080）

內(nèi)容提要： 參考《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》及《免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)資料基本要求（試行）》等一系列法規(guī)的要求，對(duì)二類診斷試劑細(xì)菌性陰道病檢測(cè)試劑盒的審評(píng)關(guān)注點(diǎn)性能指標(biāo)、臨床評(píng)價(jià)、研究資料進(jìn)行總結(jié)分析。

由多種病原菌導(dǎo)致的陰道內(nèi)微生態(tài)平衡失調(diào)，即生殖道正常菌群數(shù)量減少，代之以一組厭氧菌數(shù)量增加，從而引發(fā)的陰道炎性病變，臨床上稱之為細(xì)菌性陰道病（Bacterial Vaginosis，BV）。患者主要表現(xiàn)為白帶增多、異味、外陰不適等[1]。

因此，監(jiān)測(cè)生殖道內(nèi)正常菌群的數(shù)量，以保持其菌群生態(tài)平衡尤為重要。臨床上一般將培養(yǎng)并檢出病原體作為微生物感染性疾病的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但由于BV表現(xiàn)為菌群失調(diào)，培養(yǎng)會(huì)造成干擾。故培養(yǎng)法不是BV可靠的診斷方法?，F(xiàn)階段常見的檢測(cè)方法為多胺法、氣－液相色譜分析法、唾液酸酶法這三大類。氣－液相色譜分析法陽性率偏低，且對(duì)檢測(cè)設(shè)備及操作人員要求高，現(xiàn)未廣泛適用于臨床；多胺法、唾液酸酶法則操作簡(jiǎn)單，無需特殊設(shè)備，敏感性及特異性均良好，結(jié)果判斷快速直觀，適合臨床篩查[2]。

本文結(jié)合注冊(cè)技術(shù)審評(píng)關(guān)注點(diǎn)，對(duì)使用唾液酸酶法原理進(jìn)行檢測(cè)的細(xì)菌性陰道病檢測(cè)試劑盒的安全有效性評(píng)價(jià)關(guān)注點(diǎn)進(jìn)行研究分析。

1.預(yù)期用途

參照《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》[3]第三章的描述，細(xì)菌性陰道病檢測(cè)試劑盒屬于二類試劑“用于微生物檢測(cè)/蛋白質(zhì)檢測(cè)試劑”的范疇。參照《6840體外診斷試劑分類子目錄（2013）版》[4]的描述，該產(chǎn)品屬于二類體外診斷試劑“細(xì)菌唾液酸酶檢測(cè)”的范疇。主要用于檢測(cè)陰道分泌物樣本中的唾液酸酶活性，臨床上主要用于細(xì)菌性陰道病的輔助診斷。為定性產(chǎn)品。

2.性能指標(biāo)

參照《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》（總局令第5號(hào)）及《國家食品藥品監(jiān)督管理總局關(guān)于公布體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告（2014年第44號(hào)）》[5]的要求，試劑的注冊(cè)申報(bào)資料需包含產(chǎn)品技術(shù)要求[6]。其中，產(chǎn)品技術(shù)要求中主要涉及的性能指標(biāo)及檢驗(yàn)方法應(yīng)結(jié)合申報(bào)注冊(cè)產(chǎn)品的實(shí)際情況來制定，并不低于現(xiàn)行相關(guān)法規(guī)及國、行標(biāo)的要求，從而以達(dá)到控制產(chǎn)品質(zhì)量，以確保后續(xù)臨床使用的有效性。

目前細(xì)菌性陰道病試劑盒尚無相關(guān)的技術(shù)指導(dǎo)性文件發(fā)布，結(jié)合其他已上市定性產(chǎn)品的技術(shù)要求，注冊(cè)申請(qǐng)人制定產(chǎn)品性能指標(biāo)至少應(yīng)包括外觀、陰/陽性符合率、靈敏度、批內(nèi)/批間精密度。具體要求推薦如下：

2.1 外觀

液體型試劑/試紙型試劑應(yīng)分別描述其顏色、性狀、pH等要求，液體型試劑還應(yīng)包括試劑裝量的要求。

2.2 陰/陽性符合率

同時(shí)抽取多個(gè)檢測(cè)試劑，分別對(duì)陰/陽性參考品進(jìn)行檢測(cè)，各自符合率均應(yīng)滿足企業(yè)要求。

注：應(yīng)明確產(chǎn)品陰/陽性結(jié)果的判讀標(biāo)準(zhǔn)及統(tǒng)計(jì)方法，建議各自至少選取10個(gè)檢測(cè)試劑，結(jié)果判斷應(yīng)明確要求顯色反應(yīng)無差異，且符合率應(yīng)不低于95%。

2.3 靈敏度

結(jié)合產(chǎn)品實(shí)際使用的方法，列出產(chǎn)品顯色陽性結(jié)果所需的最低檢測(cè)濃度。

注：建議選擇從高到低多個(gè)濃度參考品進(jìn)行探索研究，從而確定出最敏感合適的檢測(cè)濃度。

2.4 批內(nèi)/批間精密度

同時(shí)取一批多個(gè)/三批多個(gè)檢測(cè)試劑，分別對(duì)高、低不同濃度的參考品進(jìn)行檢測(cè)，按照各自結(jié)果的判讀標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，批內(nèi)/批間結(jié)果均應(yīng)顏色反應(yīng)無差異。

注：建議批內(nèi)精密度研究至少選取10個(gè)檢測(cè)試劑，批間精密度至少選擇三批，每批建議至少10個(gè)檢測(cè)試劑進(jìn)行試驗(yàn)。

3.臨床評(píng)價(jià)

“細(xì)菌唾液酸酶檢測(cè)”已于2018年9月被納入二類免臨床體外診斷試劑的范疇，故細(xì)菌性陰道病檢測(cè)試劑盒則可選擇適宜的途徑進(jìn)行臨床評(píng)價(jià)[7-9]。

3.1 臨床評(píng)價(jià)

注冊(cè)申請(qǐng)人可參照《免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)資料基本要求（試行）》[8]的要求提交臨床評(píng)價(jià)資料。該產(chǎn)品為定性產(chǎn)品，應(yīng)選擇陰/陽性樣本各自均不低于50例的樣本量進(jìn)行臨床研究，最終形成完整的臨床評(píng)價(jià)報(bào)告。報(bào)告內(nèi)容應(yīng)至少包括試驗(yàn)過程、統(tǒng)計(jì)方法、樣本的溯源情況等信息。

3.2 臨床試驗(yàn)

細(xì)菌性陰道病檢測(cè)試劑盒雖已免臨床，注冊(cè)申請(qǐng)人仍可選擇臨床試驗(yàn)的方式進(jìn)行研究，具體可參照2014年發(fā)布實(shí)施的《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求開展臨床試驗(yàn)。申請(qǐng)人在注冊(cè)申報(bào)時(shí)，應(yīng)提交臨床試驗(yàn)方案和臨床試驗(yàn)報(bào)告。具體臨床試驗(yàn)時(shí)建議考慮以下幾方面內(nèi)容：

3.2.1 臨床機(jī)構(gòu)

應(yīng)在至少2家國家藥品監(jiān)督管理局備案的臨床單位進(jìn)行試驗(yàn)，并提交醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)意見及知情同意書，同時(shí)應(yīng)向當(dāng)?shù)毓芾聿块T做好臨床試驗(yàn)備案工作。

注：2018年處于過渡期，既可按照老法規(guī)要求選擇省級(jí)臨床單位進(jìn)行試驗(yàn)，也可選擇國家藥品監(jiān)督管理局備案的臨床單位進(jìn)行試驗(yàn)。

3.2.2 臨床試驗(yàn)

應(yīng)選擇性能更優(yōu)，臨床認(rèn)為較好的產(chǎn)品進(jìn)行同步盲法比對(duì)研究?？倶颖緮?shù)不低于200例，建議包含一定數(shù)量的干擾樣本。兩家臨床單位應(yīng)保證臨床試驗(yàn)方案的一致性。

3.2.3 統(tǒng)計(jì)分析

定性產(chǎn)品的統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)至少包括陰/陽性符合率、總符合率及一致性（如Kappa）的統(tǒng)計(jì)分析，且Kappa值應(yīng)滿足醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)的要求。

3.2.4 臨床試驗(yàn)報(bào)告

臨床評(píng)價(jià)資料應(yīng)至少包括試驗(yàn)方案和試驗(yàn)報(bào)告兩部分內(nèi)容，且試驗(yàn)報(bào)告中所述試驗(yàn)方法內(nèi)容應(yīng)與方案中的描述相一致，并詳細(xì)列出整個(gè)試驗(yàn)的操作過程及整體設(shè)計(jì)關(guān)鍵點(diǎn)。此外，試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)包括試驗(yàn)的原始數(shù)據(jù)及其他關(guān)鍵性的附件信息內(nèi)容，如臨床比對(duì)產(chǎn)品注冊(cè)相關(guān)信息及說明書等。

4.研究資料

體外診斷試劑的研究資料主要包括主要原材料、生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究。細(xì)菌性陰道病檢測(cè)試劑盒為定性產(chǎn)品，原材料中一般涉及到質(zhì)控品、參考品，建議注冊(cè)申請(qǐng)人在申報(bào)資料中明確質(zhì)控品、參考品的制備方法及詳細(xì)來源信息[6]。生產(chǎn)工藝中則建議注冊(cè)申請(qǐng)人明確產(chǎn)品的反應(yīng)原理，提交申報(bào)產(chǎn)品涉及反應(yīng)體系關(guān)鍵控制點(diǎn)（如加樣量、試劑量、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間）的詳細(xì)研究資料。再者，該產(chǎn)品為體外診斷試劑，原材料中會(huì)涉及到某些生物活性物質(zhì)，應(yīng)提供相應(yīng)的生物安全性研究，至少應(yīng)包括HIV、HBV、HCV、TP這四項(xiàng)傳染病病原體的檢測(cè)信息。

5.結(jié)語

本文結(jié)合現(xiàn)行體外診斷試劑法律法規(guī)及國、行標(biāo)的要求，參考二類體外診斷試劑的注冊(cè)審評(píng)規(guī)程，結(jié)合細(xì)菌性陰道病檢測(cè)試劑的實(shí)際產(chǎn)品特點(diǎn)，僅列明該類產(chǎn)品的幾個(gè)核心審評(píng)關(guān)注點(diǎn)[6]。體外診斷試劑注冊(cè)資料的編寫遠(yuǎn)不限于該幾項(xiàng)列明內(nèi)容，注冊(cè)申請(qǐng)人應(yīng)嚴(yán)格參照法規(guī)要求提交其他注冊(cè)資料，如綜述、分析評(píng)估、穩(wěn)定性研究、生產(chǎn)記錄、檢測(cè)報(bào)告、說明書等。

此外，注冊(cè)申請(qǐng)人亦可根據(jù)產(chǎn)品的實(shí)際情況編寫上述探討的幾項(xiàng)內(nèi)容。如技術(shù)要求性能指標(biāo)可增加“特異性”的要求；臨床評(píng)價(jià)增加干擾性樣本的相關(guān)研究等等。

綜上所述，本文的撰寫，目的是統(tǒng)一相關(guān)審評(píng)人員的審評(píng)尺度，以便更系統(tǒng)地評(píng)價(jià)該類產(chǎn)品的安全有效性。此外，亦可對(duì)一些生產(chǎn)企業(yè)產(chǎn)品注冊(cè)資料的編寫工作起到一定的指導(dǎo)作用。