冬蟲夏草提取物免疫調(diào)節(jié)作用的研究進(jìn)展

林思默

冬蟲夏草是真菌寄生在昆蟲尸體內(nèi)之后形成的干燥復(fù)合體。現(xiàn)代藥理學(xué)研究顯示冬蟲夏草具有多種藥理作用，其中對(duì)于免疫調(diào)節(jié)存在雙向作用。蟲草各提取物對(duì)機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)作用已被廣泛研究。本文現(xiàn)對(duì)于近年來冬蟲夏草提取物免疫調(diào)節(jié)的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)行綜述，并對(duì)蟲草及其人工制劑的發(fā)展進(jìn)行展望。

冬蟲夏草（Cordycepssinensis，C. sinensis）是一種野生植物性藥材，來源于寄生在蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲體上的一類麥角菌系真菌與幼蟲遺體組成的復(fù)合式植物體。其“蟲”是指蟲草類蝙蝠蛾的幼蟲尸體，“菌”是指麥角菌科蟲草類真菌。冬蟲夏草最早記載于清朝吳氏醫(yī)學(xué)專家撰寫的《本草從新》，其中提及蟲草具有“補(bǔ)肺益腎、止咳化痰、已勞嗽”的作用，并在長(zhǎng)期的醫(yī)療實(shí)踐中得到驗(yàn)證。現(xiàn)代研究表明，冬蟲夏草具有調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能、抗惡性腫瘤、促進(jìn)機(jī)體細(xì)胞損傷修復(fù)、抗自由基、抗氧化，延緩衰老、保護(hù)心肌及血管細(xì)胞，改善心血管功能、護(hù)肝作用、調(diào)節(jié)呼吸系統(tǒng)功能、保護(hù)腎臟功能、調(diào)節(jié)血液系統(tǒng)功能和調(diào)節(jié)血脂的作用。

研究人員對(duì)冬蟲夏草及其菌絲體的化學(xué)成分進(jìn)行了廣泛的研究，結(jié)果顯示其化學(xué)成分大致可分為多糖類 、蛋白質(zhì)及氨基酸類、脂類、麥角甾醇類、微量元素等。在眾多活性成分中，目前研究最多并且藥理學(xué)功效最為顯著的有蟲草多糖、蟲草素、麥角甾醇?，F(xiàn)代藥理研究表明，冬蟲夏草對(duì)免疫功能具有雙重調(diào)節(jié)作用，既能夠持續(xù)增強(qiáng)免疫力，以提高機(jī)體抵抗疾病的能力; 也可以發(fā)揮免疫抑制作用，在炎癥、過敏疾病以及自身性免疫疾病的治療中有重要意義。

1、粗提物

研究人員使用多種體內(nèi)藥物誘導(dǎo)免疫抑制模型，對(duì)蟲草粗提物對(duì)于免疫增進(jìn)的藥理作用進(jìn)行研究。我國研究人員對(duì)氫化可的松導(dǎo)致的免疫損傷動(dòng)物模型使用了冬蟲夏草提取物進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果顯示冬蟲夏草干預(yù)后免疫受損小鼠的特異性免疫功能和非特異性免疫功能均得到改善 。Zhu 等對(duì)新鮮蛹蟲草以及干燥子實(shí)體對(duì)于環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制小鼠的免疫調(diào)節(jié)能力進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)兩者均對(duì)于免疫抑制小鼠的體內(nèi)外脾、胸腺指數(shù)、脾淋巴細(xì)胞活性、巨噬細(xì)胞功能、IL-2、IFN-γ水平有顯著的增強(qiáng)作用，但新鮮優(yōu)于干燥的作用。除此之外，韓國研究者HJ Kang等發(fā)現(xiàn)對(duì)于健康男性，蛹蟲草能夠提高自然殺傷性細(xì)胞活性、淋巴細(xì)胞的增殖指數(shù)。此外，輔助性T細(xì)胞1細(xì)胞因子簇，例如干擾素-γ以及白細(xì)胞介素- 12的分泌也會(huì)增加。也就是說，蛹蟲草能夠增強(qiáng)NK細(xì)胞活性和淋巴細(xì)胞增殖和部分增加Th1細(xì)胞因子分泌，從而達(dá)到提高細(xì)胞免疫功能的作用。蟲草的粗提物不僅可以增進(jìn)免疫，在一些研究中也發(fā)現(xiàn)蟲草同時(shí)也存在一定的免疫抑制作用。

2、蟲草多糖 （Ophiacordyceps sinensis polysaccharides，CSP）

冬蟲夏草自身包含大量多糖類物質(zhì)，稱之為蟲草多糖，是冬蟲夏草中占比重最大的成分，占到蟲草干重的 20% ～ 35% ，其主要來源于菌絲體的分泌。蟲草多糖是其主要有益成分，具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、抗氧化和降血糖等活性。蟲草多糖是一種有效的免疫調(diào)節(jié)劑，對(duì)其的早期研究主要集中于免疫的促進(jìn)作用，近幾年隨著更多的多糖成分被分離，研究后發(fā)現(xiàn)其存在對(duì)免疫抑制活性的調(diào)節(jié)。蟲草多糖可促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖、增進(jìn)樹突狀細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞的活性，并調(diào)節(jié)生物體內(nèi)免疫因子水平。

Zhu等研究發(fā)現(xiàn)，蟲草多糖顯著增加胸腺和脾臟指數(shù)，巨噬細(xì)胞吞噬功能，脾細(xì)胞增殖，IFN-γ和腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）水平。另外又在體外免疫刺激實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)蟲草中一種多糖CP2-S能刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生一氧化氮、吞噬作用、呼吸爆發(fā)活性和巨噬細(xì)胞分泌白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）和IL-2。冬蟲夏草菌體的多個(gè)層析多糖組分顯示可以同時(shí)拮抗地塞米松介導(dǎo)的免疫抑制，并顯著提高脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)。研究人員發(fā)現(xiàn)蟲草多糖能夠提高樹突狀細(xì)胞表面主要組織相容性復(fù)合物 -II（MHC-II），CD40，CD80 和 CD86 的水平，增加IL-12和 TNF-α的釋放，促進(jìn) DC 細(xì)胞的成熟和遞呈抗原的能力，顯著下調(diào)DCS的P- STAT3水平。其機(jī)制可能與抑制JAK2/STAT3信號(hào)通路和促進(jìn)NF-κB信號(hào)通路有關(guān)。Cheung 等，從蟲草菌培養(yǎng)容器中得到一種相對(duì)分子質(zhì)量為約 82 kDa 的胞外多糖，并將其命名為Cordysinocan。研究人員發(fā)現(xiàn)其能夠促進(jìn) T 淋巴細(xì)胞增殖并增加 IL-2，IL-6 和 IL-8 的表達(dá)。不僅如此，Cordysinocan激活胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶的同時(shí)還能夠增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力，提高酸性磷酸酶的活性。

3、蟲草素（Cordycepin）

1951 年，Cunningham 等首次從蛹蟲草中分離得到一種化學(xué)結(jié)構(gòu)為 3-脫氧腺苷（ 3-deoxyadenosine）的核苷類物質(zhì)，也就是蟲草素。蟲草素可以通過生物或人工進(jìn)行合成。天然蟲草素存在于某些蟲草屬菌種中，也可從一些菌株上分離得到。蟲草素能顯著增加人外周單核細(xì)胞IL-10的細(xì)胞因子分泌和IL-10的 mRNA轉(zhuǎn)錄水平，從而抑制植物血球凝集素和外周血液?jiǎn)魏思?xì)胞的擴(kuò)增。蟲草素還具有抗炎和免疫調(diào)節(jié)的活性，其機(jī)制可能與蟲草素對(duì)于 NF-κB、p38-MAPK 等信號(hào)傳導(dǎo)通路的作用有關(guān)。

Jeong 等，在蟲草素和脂多糖共孵育的小鼠脾臟細(xì)胞后，通過檢測(cè)免疫相關(guān)因子的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)經(jīng) 2 μg /mL 的 LPS 作用后，蟲草素可以通過增加 IL-4 和IL-10 的分泌從而促進(jìn)免疫調(diào)節(jié)。隨后，蟲草素還通過抑制IL-2和TGF-β的分泌，促進(jìn)IL-4分泌，阻斷TGF-β介導(dǎo)的Treg細(xì)胞分化。此外，蟲草素還可以增強(qiáng)IIFN-γ的表達(dá)，從而促進(jìn)IFN-γ產(chǎn)生細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL），它殺死腫瘤細(xì)胞并阻礙腫瘤生長(zhǎng); Seo 等發(fā)現(xiàn)在 3 μg /mL 的 LPS 刺激下，蟲草素能夠下調(diào) IL-4、IL-10、TNF-α 的水平，在不同濃度下的蟲草素具有不同的免疫調(diào)節(jié)的作用。

Kim HG 等，在使用LPS刺激 RAW264.7巨噬細(xì)胞后檢測(cè)蟲草素的抗炎作用，結(jié)果顯示蟲草素對(duì)于炎癥有一定的抑制作用，其機(jī)制可能是通過抑制NF-κB 、Akt以及p38的磷酸化，抑制一氧化氮產(chǎn)量等相關(guān)。Yang 等對(duì)使用卵清蛋白誘導(dǎo)的哮喘小鼠采用不同劑量的蟲草素干預(yù)后，結(jié)果發(fā)現(xiàn)蟲草素顯著抑制了p38-MAPK 以及 NF-κB通路，從而減少炎癥和哮喘等的相關(guān)癥狀。Jeong 等發(fā)現(xiàn)蟲草素能夠通過上述途徑作用于 BV2 小膠質(zhì)細(xì)胞的炎癥調(diào)節(jié)，因此蟲草素在神經(jīng)退行性疾病的治療中可能有著潛在的研究?jī)r(jià)值。Meng 等發(fā)現(xiàn)蟲草素可以抑制由 LPS 誘導(dǎo)的過度活化的原代小膠質(zhì)細(xì)胞 iNOS的 轉(zhuǎn)錄表達(dá)及一氧化氮的合成和釋放，且在抑制后還可以通過提高超氧化物歧化酶（ superoxide dismutase，SOD） 的活性從而降低自由基對(duì) PC12 細(xì)胞的損傷。Deng 等發(fā)現(xiàn)對(duì)于使用蟲草素預(yù)處理過后的腦缺血再灌注損傷小鼠模型，其神經(jīng)行為以及梗死面積均優(yōu)于對(duì)照組。同時(shí)ELISA 及 Western blot 結(jié)果表明， 蟲草素可以降低腦缺血小鼠側(cè)腦組織中 的IL-1β以及 TNF-α 的分泌，促進(jìn) IL-10 和 TGF-β1 的水平表達(dá)，與此同時(shí)還可抑制 NF-κB 的活化。以上結(jié)果均證實(shí)蟲草素確實(shí)可以通過抑制炎癥水平來降低小鼠腦缺血再灌注損傷，因此蟲草素還能夠通過抑制炎癥反應(yīng)作用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病。

4、麥角甾醇

麥角甾醇為脂溶性維生素 D2 的前體，麥角甾醇氧化物可由其次級(jí)代謝產(chǎn)物產(chǎn)生。上個(gè)世紀(jì) 80 年，我國科學(xué)家首次從冬蟲夏草中分離出麥角甾醇，之后開始對(duì)其進(jìn)行研究。

麥角甾醇過氧化物C28H44O3（Cpd6A）具有不可小覷的藥用價(jià)值。Kuo 等從蟲草中提取Cpd6A，發(fā)現(xiàn)其可抑制 PHA 誘導(dǎo)的 T 細(xì)胞增殖，其部分機(jī)制是抑制了IFN-γ、T 細(xì)胞生長(zhǎng)因子 （T cell growth factor，TCRF）、IL-4的分泌和周期素E（cyclin E）的表達(dá)，從而可以抑制人單核細(xì)胞的細(xì)胞周期 。有學(xué)者研究證實(shí)，麥角甾醇通過抑制細(xì)胞增殖和減弱細(xì)胞骨架蛋白表達(dá)并且直接阻礙轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（TGF-β1）誘導(dǎo)的絲裂原活化蛋白激酶通路的激活可以有效抑制慢性腎炎中TGF-β1引起的成纖維細(xì)胞活化。

5、總結(jié)與展望

冬蟲夏草及其人工制劑對(duì)免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)具有多途徑的特點(diǎn)，然而尚不清楚蟲草及其人工制劑如何發(fā)揮對(duì)于生物體內(nèi)免疫系統(tǒng)的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控功能。除了當(dāng)前蟲草研究發(fā)展仍受制于科技發(fā)展因素外，這也可能與蟲草本身制劑的類型、道地藥材的質(zhì)量、藥物使用劑量、藥材部位以及蟲草有效成分提取方法的不同相關(guān)。因此，在理化、分子生物、系統(tǒng)生物等領(lǐng)域仍需不斷進(jìn)行大量深入的探索，以明確蟲草及其人工制劑對(duì)于免疫的調(diào)控機(jī)理。

（作者單位：201203上海中醫(yī)藥大學(xué)）