ACL-200血凝儀檢測凝血四項(xiàng)影響因素探究

郭吉 王愛瑋 天津市黃河醫(yī)院檢驗(yàn)科 （天津 300110）

內(nèi)容提要： 凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)在臨床應(yīng)用十分廣泛，尤其是血栓性疾病、出血性疾病，以及內(nèi)源性或外源性凝血因子缺乏/減少等疾病中屬于常規(guī)檢驗(yàn)試驗(yàn)。凝血四項(xiàng)包括PT、APTT、TT、Fib，主要應(yīng)用血凝分析儀檢測，其中ACL-200血凝儀已有數(shù)十年的應(yīng)用歷史，在血凝四項(xiàng)檢驗(yàn)中作用巨大。不過，因一些因素的影響，可能會影響其凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果，需加強(qiáng)重視。本文就ACL-200血凝儀檢測凝血四項(xiàng)的影響因素進(jìn)行了探討，希望有助于相關(guān)工作開展。

凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)在臨床疾病診斷中有著不錯(cuò)的價(jià)值，在臨床應(yīng)用十分廣泛，包括凝血酶原時(shí)間（PT）、活性部分凝血酶原時(shí)間（APTT）、纖維蛋白原（Fib）及凝血酶時(shí)間（TT）。這四個(gè)指標(biāo)相互獨(dú)立，又可互相配合，比如APTT主要測定內(nèi)源性凝血系統(tǒng)病變，而PT則主要應(yīng)用在外源性凝血系統(tǒng)過篩試驗(yàn)，相比玻片法檢測凝血時(shí)間優(yōu)勢明顯[1]。ACL-200血凝儀已有多年應(yīng)用歷史，證實(shí)其性能穩(wěn)定，故障發(fā)生率低，操作簡單方便，且效率高，相比比濁離心法分析準(zhǔn)確度高，重復(fù)性強(qiáng)。但是，從過去臨床報(bào)道及本院實(shí)踐來看，存在部分標(biāo)本檢驗(yàn)結(jié)果有誤差，為此需要對影響ACL-200血凝儀檢測凝血四項(xiàng)指標(biāo)的因素進(jìn)行分析，才能進(jìn)一步提高檢驗(yàn)結(jié)果。本文進(jìn)行了如下分析。

1.影響因素之一：標(biāo)本

ACL-200分析儀檢測凝血四項(xiàng)影響因素最為常見的當(dāng)屬標(biāo)本，而具體又主要囊括如下一些小因素：①采集標(biāo)本方面：采集標(biāo)本若進(jìn)展不順利，則可能導(dǎo)致PT與APTT假性延長。故而，確保采集規(guī)范就十分關(guān)鍵，一般選擇大號針頭，采血管則選擇加用枸緣酸鈉溶液的抗凝真空管；采集時(shí)務(wù)必一針見血，盡量不要發(fā)生淤血；避免損傷組織，減少外源性凝血因子進(jìn)入；選擇壓力盡量小的止血帶，因壓力過大、束縛時(shí)間較長會對血液濃縮、內(nèi)皮細(xì)胞釋放t-PA造成影響，使得某些凝血因子的活性升高；采血?jiǎng)?wù)必平穩(wěn)順利進(jìn)行，避免出現(xiàn)氣泡；盡可能單獨(dú)采血，若需和其他項(xiàng)目一起進(jìn)行，則選擇第一管最佳。②抗凝劑濃度及用量方面：抗凝劑濃度準(zhǔn)確與否，直接影響試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性，一般推薦的枸緣酸鈉：血液為1:9，而枸緣酸鈉溶液的濃度則選擇0.109mmol/L。確?？鼓齽┡c血液比例準(zhǔn)確，因?yàn)榭鼓齽┰谘簶?biāo)本中的絕對含量會導(dǎo)致血漿鈣離子水平改變，影響試驗(yàn)結(jié)果。但是，前面所說的抗凝劑與血液標(biāo)本1:9比例，實(shí)際上指的是抗凝劑和正常壓積血液間的比值[2]。為此，在實(shí)際操作中，應(yīng)根據(jù)患者的紅細(xì)胞比值（Hct）靈活調(diào)整抗凝劑用量。采血結(jié)束后及時(shí)混合均勻，但應(yīng)避免過度用力震蕩，影響血液標(biāo)本。③標(biāo)本制備方面：測定PT與APTT時(shí)一般宜缺乏血小板的血漿最佳，為此使用ACL-200血凝儀時(shí)，可用2500×g離心處理15min，將血小板去除后獲取最低血小板含量的血漿，再進(jìn)行PT與APTT檢測。在這期間，應(yīng)盡量避免標(biāo)本收集、離心出現(xiàn)溶血，因溶血后紅細(xì)胞磷脂表面有凝血活酶作用，排出的紅細(xì)胞物質(zhì)會導(dǎo)致血漿凝固時(shí)間發(fā)生變化，影響檢驗(yàn)結(jié)果。④標(biāo)本放置及保存方面：標(biāo)本放置與保存影響凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果主要在其放置時(shí)間與溫度兩個(gè)方面，有報(bào)道對同一標(biāo)本分成幾份后放在室溫、4°C下保存4h、8h、10h、24h進(jìn)行了調(diào)查，均用血凝分析儀測定凝血四項(xiàng)，發(fā)現(xiàn)室溫下標(biāo)本放置8h PT差異不明顯，放置4h APTT差異不明顯，放置24h TT與Fib差異不明顯，但在4°C下標(biāo)本放置24h四項(xiàng)指標(biāo)均無明顯差異[3]。說明放置的溫度、保存的時(shí)間主要對PT、APTT影響較大。結(jié)合有關(guān)文獻(xiàn)及自身實(shí)踐，筆者認(rèn)為標(biāo)本采集后盡量及時(shí)送檢，要求采血到檢驗(yàn)時(shí)間＜4h，因超過4h后凝血因子不穩(wěn)定，放置時(shí)間越長，試驗(yàn)結(jié)果也隨之延長。若未能及時(shí)檢測，則可將標(biāo)本放置在2～8°C下進(jìn)行保存，保存時(shí)間不宜超過24h[4]。⑤脂血癥標(biāo)本方面：若標(biāo)本來源者存在脂血癥，因其標(biāo)本存在混濁，容易干擾光散射，進(jìn)而影響Fib真實(shí)含量，使得檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。基于此，若患者有脂血癥，則應(yīng)嚴(yán)格控制其標(biāo)本，先將血漿中的脂肪去除，之后再進(jìn)行檢測。

2.影響因素之二：試劑配制

試劑的選擇對于檢測結(jié)果影響也比較大，對于ACL-200血凝儀而言，盡量選擇自身配套的原裝試劑。原裝試劑應(yīng)及時(shí)檢查是否在有效期內(nèi)，看有無冷藏，尤其是氯化鈣，若未冷藏，在空氣中會受到二氧化碳的干擾，導(dǎo)致鈣離子水平下降，暴露時(shí)間較長則會影響檢測結(jié)果不準(zhǔn)確，這就需要根據(jù)當(dāng)日工作量及檢測項(xiàng)目來進(jìn)行試劑的配制。試劑配制盡可能選用無菌蒸餾水處理，輕輕搖勻，減少震蕩，放置在15～25°C下0.5h后檢測，檢測前應(yīng)再次搖勻，可使得微粒重新均勻懸浮，而不用的試劑則將其倒回瓶子，并且放置在冰箱內(nèi)保存。

3.影響因素之三：定標(biāo)血漿及質(zhì)控

ACL-200血凝儀分析時(shí)采用的是定標(biāo)血漿，主要是以此建立定標(biāo)曲線，然后對整個(gè)儀器狀況進(jìn)行監(jiān)控。ACL-200血凝儀多采取凍干血漿，用前則復(fù)溶，應(yīng)按照說明書準(zhǔn)確配置，放置在適合的溫度下0.5h，應(yīng)用前適當(dāng)搖勻，減少劇烈震蕩，影響檢測結(jié)果。血凝儀凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果應(yīng)做好質(zhì)量控制，而室內(nèi)質(zhì)量控制也是保障實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果的關(guān)鍵，為此應(yīng)每天做好質(zhì)量控制，同時(shí)做好記錄，以便后期可以核查。室內(nèi)質(zhì)控品應(yīng)合理選擇，要求其質(zhì)量可靠、穩(wěn)定性好，一旦選定，除非特殊情況，不能輕易更換；質(zhì)控品應(yīng)準(zhǔn)確應(yīng)用及保存，根據(jù)質(zhì)控品的說明書嚴(yán)格操作與保存，超過質(zhì)控品保質(zhì)期的不能使用，使用時(shí)輕微搖勻，使得內(nèi)容物可充分混合，切勿劇烈搖晃，避免泡沫生成[5]。若室內(nèi)質(zhì)控失控，則填寫失控報(bào)告單，上交專業(yè)主管，經(jīng)專業(yè)主管進(jìn)行分析，查明原因，進(jìn)一步整改。

4.影響因素之四：操作

和操作有關(guān)的因素也會影響ACL-200血凝儀凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果，比如環(huán)境因素，溫度與濕度過大，電磁干擾嚴(yán)重等都會導(dǎo)致儀器的整體性能下降，從而造成檢驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確。結(jié)合文獻(xiàn)及自身實(shí)踐，發(fā)現(xiàn)與操作有關(guān)的影響因素最主要的還是在于其使用與保養(yǎng)方面。只有正確的使用與保養(yǎng)及維護(hù)，才能維持儀器正常運(yùn)轉(zhuǎn)。操作人員應(yīng)培訓(xùn)、考核后持證上崗，操作務(wù)必按照儀器的說明書執(zhí)行，每天工作開始與結(jié)束都應(yīng)及時(shí)沖洗，將殘留的標(biāo)本與試劑充分沖洗干凈，維持分析針與沖洗池清潔。儀器表面、樣本盤與分析盤均采取紗布清潔，然后以蒸餾水擦拭干凈，定期維護(hù)儀器，避免故障，保障其處于最佳工作狀態(tài)，延長使用的壽命。

5.結(jié)語

ACL-200血凝儀在凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)中有著不錯(cuò)的價(jià)值，但其檢驗(yàn)結(jié)果會受到諸多因素的影響，為此應(yīng)積極做好分析，減少這些因素的干擾，才能進(jìn)一步保障檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性，為臨床提供科學(xué)的依據(jù)。