梅毒螺旋體三種檢測方法的比較與分析

段超英　郭旭

【摘 要】：目的 對TPPA（梅毒螺旋體明膠凝集實驗），TP-ELISA（梅毒酶聯(lián)免疫吸附實驗），TRUST（甲苯胺紅不加熱血清實驗）三種梅毒檢測方法進行比較，用于提高梅毒臨床診斷符合率。方法 運用TPPA、TP-ELIST、TRUST檢測血清中的梅毒螺旋體抗體，比較三種檢測方法的假陽性和假陰性。結(jié)果 TPPA，TP-ELISA，TRUST 3種檢測的陽性率分別是99.00%，98.50%，85.00%，TPPA、TP-ELIST的檢出率均顯著高于TRUST。結(jié)論 TPPA、TP-ELIST的檢測方法靈敏度高，特異性強，是用于梅毒抗體檢測的首選方法；TRUST對于臨床治療梅毒療效的評估具有重要意義，對于疑似患者最好進行三種方法的聯(lián)合檢測，以提高梅毒血清學檢測結(jié)果和治療的準確性。

【關(guān)鍵詞】梅毒檢測方法；TPPA；TP-ELISA；TRUST

【中圖分類號】R759.1 【文獻標識碼】A 【文章編號】1672-3783（2019）01-03--01

梅毒是由梅毒螺旋體（蒼白螺旋體）感染引起的一種慢性全身性性傳播疾病，該病病程長，危害大，臨床表現(xiàn)復(fù)雜、呈多樣性，幾乎可以累及心血管及中樞神經(jīng)系統(tǒng)等器官[1-3]。目前，臨床實驗室主要采用血清學試驗檢測梅毒抗體。我們對常用的梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗（TP-ELISA）、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（TPPA）、甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST） 3 種方法進行比較，為提高梅毒檢測及診斷的準確率提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 血清標本

將本實驗室結(jié)合臨床與流行病學確診的梅毒患者的血清200例，另外隨機抽取200例非梅毒患者的血清進行檢測。

1.2 試劑及器材

TPPA試劑由日本富士瑞比歐株式會社提供，TP-ELISA 購于北京萬泰生物藥業(yè)有限公司，TRUST 試劑購自上海榮盛生物技術(shù)有限公司。上述產(chǎn)品均為合格產(chǎn)品，均在有限期限內(nèi)。儀器主要為酶標儀，洗板機，震蕩器等。

1.3 方法 三種檢測方法均嚴格按照試劑說明書進行，結(jié)果判定依據(jù)試劑盒規(guī)定標準判定。

1.4 統(tǒng)計學分析 所有數(shù)據(jù)均運用SPSS16.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2.1 三種方法檢測血清樣本的結(jié)果比較

三種不同的方法檢測200例梅毒患者標本，其中TPPA有199例陽性，陽性率為99.50%；TP-ELISA有197例陽性，陽性率為98.50%；TRUST有179例，陽性率為89.50%，結(jié)果見表1。TPPA、TP-ELIST檢測的陽性率比較無統(tǒng)計學差異（P>0.05）；3種檢測方法比較，TPPA、TP-ELIST的陽性率均高于TRUST，（P<0.01）。3種不同的方法檢測200例非梅毒患者血清標本，結(jié)果TPPA、TP-ELISA的假陽性率均為0.50%，TRUST的假陽性率為2.50%，TPPA、TP-ELISA檢測假陽性率相互比較無統(tǒng)計學差異（P>0.05），但兩者的假陽性率均低于TRUST法（P<0.05）。

2.2 三種檢測方法比較的評價 TRUST檢測的特異度較高，但靈敏度差，為89.50%，youden指數(shù)為0.77，因此容易導(dǎo)致誤診，而TPPA，TP-ELISA檢測法的靈敏度都較高，為99.00%，98.50%，特異度都為99.50%，youden指數(shù)分別0.90和0.98，youdenz指數(shù)較高，提示了這兩種方法的準確性。

3 討論

梅毒是一種慢性性傳播疾病 ，據(jù)統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示 ，近年來梅毒在世界范圍內(nèi)的感染率不斷增加 ，已成為世界廣泛關(guān)注的社會問題 。張錫寶[8]等報道廣州市從1993年梅毒發(fā)病率僅為 0.76/10萬 ，到2000年梅毒發(fā)病率高達 42.38/10萬。孫茂利等[9]報道，大連市 2008年梅毒發(fā)病率為 1.11%，到2008年其發(fā)病率可達2.32%。因而，對梅毒患者的篩查與檢驗尤為重要。

臨床上，診斷梅毒的最主要方法是血清學的檢測[4-5]。TPPA 使用梅毒螺旋體毒株制成抗原，包被于明膠顆粒上，以檢測血清中的梅毒特異性抗體，其特異性好、靈敏度高，是目前公認的梅毒血清確診試驗。TP-ELISA 是將基因重組表達的梅毒螺旋體抗原包被在微孔板上， 用雙抗原夾心法測定梅毒螺旋體特異性抗體， 極大地提高了試驗的敏感性和特異性，其試劑成本低，操作方便，可使用全自動或半自動酶標儀，是大批量標本梅毒篩查的理想方法。有報道其特異性、靈敏度與 TPPA 相近[6]，我們實驗顯示與 TPPA 比較，TP-ELISA 的敏感性 95.5%，特異性 99.5%，兩種方法具有較高的一致性。TRUST 是檢測梅毒螺旋體的非特異性抗體，由于其為非特異性抗體，其假陽性率和假陰性率均較高，不能作為診斷梅毒的依據(jù)[7]。我們實驗結(jié)果顯示與 TPPA 比較，TRUST 的敏感性 89.5%，敏感性較低，差異有統(tǒng)計學意義（ <0.05），但是由于該法的價格低廉、操作簡單，但對梅毒患者治療中，治療后的療效評價具有重要意義。因此為了避免梅毒檢測方法學上的誤差，對于疑似患者最好進行三種方法的聯(lián)合檢測，以提高梅毒血清學檢測結(jié)果的準確性，同時對梅毒的診斷除依據(jù)檢測結(jié)果外，更要詳細了解患者的生活史和既往病史，結(jié)合患者臨床表現(xiàn)、年齡等因素綜合分析慎重做出判斷，這樣才能從根本上減少實驗方法學缺陷造成的假陽性和假陰性誤差，降低梅毒個體的漏檢和誤診。

綜上所述，TPPA 適合于梅毒抗體檢測的確診，TP-ELISA 則適合大規(guī)模篩查和臨床的診斷。TRUST 可以作為療效觀察、隨訪和復(fù)發(fā)的輔助診斷，建議 3 種檢測方法結(jié)合應(yīng)用能更有效提高梅毒臨床診斷符合率。

參考文獻

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