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    人乳頭瘤病毒和解脲脲原體、沙眼衣原體、淋病奈瑟菌的感染現(xiàn)狀分析

    2019-01-07 07:49:00周艷麗竇亞玲孔令君葉阿里徐英春
    關(guān)鍵詞:生殖道危型病原體

    張 睿,周艷麗,2,竇亞玲,孔令君,葉阿里,吳 潔,徐英春

    1中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科,北京 100730 2河北省唐山市玉田縣醫(yī)院檢驗(yàn)科,河北玉田 064100

    性傳播疾病是一類以性接觸為主要傳播方式的泌尿生殖道感染性疾病,性傳播疾病病原體主要有以下幾種:人乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)、解脲脲原體(Ureaplasmaurealyticum,UU)、沙眼衣原體(Chlamydiatrachomatis,CT)、淋病奈瑟菌(Neisseriagonorrhoeae,NG)、單純皰疹病毒Ⅱ型、部分真菌等。其中CT、NG、UU是3種最為常見的性傳播疾病的病原體。CT、UU所致炎癥主要是非淋菌性尿道炎、陰道炎,病原體合并感染時(shí)容易引起持續(xù)感染[1],NG所致炎癥主要是淋球菌性尿道炎、陰道炎。HPV是一種嗜上皮性DNA病毒,自然界中廣泛存在,人是其唯一宿主。在免疫缺陷狀態(tài)時(shí)更易感染,HPV持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的最危險(xiǎn)因素[2],而與其他病原體協(xié)同作用,不斷感染女性生殖道,使得宮頸癌變或癌前病變的概率不斷增加[3]。本研究主要探討HPV感染時(shí),CT、NG、UU的感染情況以及它們之間是否存在一定的相關(guān)性。

    資料和方法

    資料收集2014年1月至2017年12月就診于北京協(xié)和醫(yī)院皮膚性病科、婦產(chǎn)科、泌尿外科、男科門診等多個(gè)臨床科室患者的樣本;排除重復(fù)檢測(cè)樣本標(biāo)準(zhǔn):以第1次檢測(cè)結(jié)果為準(zhǔn),再次送檢結(jié)果與第1次不同按再次感染計(jì)算,納入統(tǒng)計(jì)中。如第1次結(jié)果為陽(yáng)性,之后檢測(cè)為陰性,按第1次計(jì)算。如第3、4次結(jié)果與之前任何一次相同,也剔除;如為陰性,剔除檢出率統(tǒng)計(jì),計(jì)入好轉(zhuǎn)中;如檢測(cè)幾次均為陰性,只記1次陰性。所有檢測(cè)結(jié)果按以上標(biāo)準(zhǔn)剔除后,男性207例、女性663例,共計(jì)870例,年齡14~66歲,平均(35.06±8.87)歲。

    樣本采集

    宮頸拭子:采用專用細(xì)胞刷取器沿宮頸口移行帶附近旋轉(zhuǎn)刷取1~2周,將刷取的宮頸脫落細(xì)胞置于細(xì)胞保存液中,置于4℃冰箱待檢。

    尿道拭子:用專用的尿道拭子于尿道口內(nèi)旋轉(zhuǎn)1~2周,將拭子置于無菌容器中,加入2 ml生理鹽水,置于4℃冰箱待檢。

    尿液:用專用無菌容器收集憋足2 h以上前段尿5~10 ml,吸取2 ml尿液置于尿液保存液中,置于4℃冰箱待檢。

    檢測(cè)方法用高危型(high risk,HR)HPV分型 (16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68)和低危型(low risk,LR)(6、11)核酸測(cè)定試劑盒(上海之江生物科技股份有限公司)和全自動(dòng)核酸提取儀對(duì)樣本中的HPV-DNA進(jìn)行核酸提取,采用SLAN-96P熒光定量PCR儀(上海宏石醫(yī)療科技有限公司)和SLAN全自動(dòng)醫(yī)用PCR分析系統(tǒng)8.3.1進(jìn)行數(shù)據(jù)分析;應(yīng)用沙眼衣原體、淋病奈瑟菌和解脲脲原體核酸檢測(cè)試劑盒(上海仁度生物科技有限公司)和全自動(dòng)核酸提取儀對(duì)樣本中的CT-RNA、NG-RNA、UU-RNA分別進(jìn)行核酸提取,采用Roche LightCycler 480Ⅱ熒光定量PCR儀進(jìn)行監(jiān)測(cè)和數(shù)據(jù)分析。

    統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用Excel 2007及SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析,比較采用χ2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    結(jié) 果

    陽(yáng)性檢出率870份樣本陽(yáng)性檢出率最高為UU[53.68%(467/870)],其次為HPV[32.41%(282/870)]和CT[7.24%(63/870)],最低為NG[2.18%(19/870)]。

    不同科室間HPV-DNA、UU-RNA、CT-RNA和NG-RNA陽(yáng)性檢出情況婦科門診UU-RNA檢出率最高,為60.61%,HPV-DNA檢出率為34.57%,以 HR-HPV-DNA為主檢出率為31.72%,CT-RNA檢出率為5.90%,NG-RNA檢出率為2.84%。皮膚性病門診HPV-DNA檢出率為30.69%,UU-RNA檢出率最高,為46.28%,CT-RNA檢出率為9.16%,NG-RNA檢出率為1.73%。男科門診和泌尿科門診標(biāo)本量較少,UU-RNA檢出率最高,為50.00%和33.33%。

    不同性別間HPV-DNA、CT-RNA、NG-RNA、UU-RNA陽(yáng)性檢出情況HR-HPV-DNA和UU-RNA女性總檢出率明顯高于男性,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。CT-RNA和 NG-RNA檢出率在不同性別間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表1)。

    HR-HPV組中UU-RNA、CT-RNA、NG-RNA陽(yáng)性檢出情況HR-HPV陽(yáng)性組男性和女性CT-RNA檢出率均高于陰性組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001,P=0.024);其他檢測(cè)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表2)。

    LR-HPV組中UU-RNA、CT-RNA、NG-RNA陽(yáng)性檢出情況LR-HPV陽(yáng)性組女性UU-RNA檢出率明顯高于陰性組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001);其他檢測(cè)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(表3)。

    表1 男女性別間 HR-HPV-DNA、LR-HPV-DNA、UU-RNA、CT-RNA和NG-RNA陽(yáng)性檢出率比較(%)

    HR:高危型;HPV:人乳頭瘤病毒;LR:低危型;UU:解脲脲原體;CT:沙眼衣原體;NG:淋病奈瑟菌

    HR:high risk;HPV:human papilloma virus;LR:low risk;UU:Ureaplasmaurealyticum;CT:Chlamydiatrachomatis;NG:Neisseriagonorrhoeae

    表2 HR-HPV陽(yáng)性組和陰性組UU-RNA、CT-RNA和NG-RNA陽(yáng)性檢出率比較(%)

    表3 LR-HPV陽(yáng)性組和陰性組UU-RNA、CT-RNA和NG-RNA檢出率比較(%)

    討 論

    目前發(fā)現(xiàn)HPV已有200多種基因亞型,但并不是所有的HPV感染都會(huì)演變?yōu)閷m頸癌,只有在機(jī)體免疫低下或其他感染因素存在時(shí),高危型 HPV持續(xù)感染造成宮頸上皮細(xì)胞遺傳物質(zhì)DNA失去穩(wěn)定性,惡性增殖形成浸潤(rùn)性病變,才會(huì)引導(dǎo)宮頸癌的發(fā)生[4]。大部分HPV感染為一過性的,自身免疫機(jī)制對(duì)其有一定的免疫力,但是HPV與其他泌尿生殖道病原體具有協(xié)同作用[1]:CT通過感染宮頸,沿柱狀上皮上行引起子宮內(nèi)膜炎、輸卵管炎和盆腔炎[5],其生殖道感染潛伏期長(zhǎng),1~3周才會(huì)出現(xiàn)臨床癥狀,約50%男性感染者和70%女性感染者一般無任何臨床癥狀。國(guó)外研究表明,與HPV-DNA陰性女性相比,HPV-DNA陽(yáng)性受試者感染CT的概率顯著增加,CT感染會(huì)對(duì)患者HPV感染的狀態(tài)產(chǎn)生一定的影響,增加宮頸癌變的風(fēng)險(xiǎn),影響患者自身免疫系統(tǒng)對(duì)HPV的細(xì)胞免疫反應(yīng),造成持續(xù)感染[6]。本研究顯示,在高危型HPV陽(yáng)性組中,男性和女性CT的陽(yáng)性率明顯高于HR-HPV陰性組,表明CT與HPV感染具有一定的相關(guān)性且與型別有關(guān),可能引發(fā)持續(xù)性感染,有增加宮頸癌變的風(fēng)險(xiǎn)。

    支原體是一類缺乏細(xì)胞壁、形態(tài)上呈高度多形性、能通過除濾菌器、在無生命培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖的最小原核細(xì)胞型微生物。UU能緊緊黏附于易感宿主細(xì)胞膜表面受體上,這種黏附細(xì)胞的特性成為支原體的致病性條件[7]。當(dāng)機(jī)體免疫力低下或黏膜受損時(shí)支原體感染人體,一般黏附于泌尿生殖道上皮細(xì)胞表面的受體上,導(dǎo)致細(xì)胞損傷而使炎癥上行,引起非淋菌性尿道炎、尿路結(jié)石、前列腺炎、腎盂腎炎、女性盆腔炎、陰道宮頸感染等多種疾病,并與女性不孕、習(xí)慣性流產(chǎn)及胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩等有關(guān)[8-9]。已有報(bào)道UU可在性成熟女性生殖道中處于正常攜帶狀態(tài)[10],與NG和CT相比感染率最高[11],UU代謝產(chǎn)生的尿素酶、IgA 蛋白酶、磷脂酶A和C及多帶抗原蛋白可引起細(xì)胞膜的損傷和組織的破壞,其中尿素酶可分解尿素產(chǎn)生氨,引起pH值改變,不僅有利于一些細(xì)菌的定植,對(duì)細(xì)胞也有毒害作用,IgA蛋白酶能破壞泌尿生殖道黏膜,損害免疫系統(tǒng)[12],能在細(xì)胞分化過程中導(dǎo)致染色體的丟失和移位,因此可能促進(jìn)細(xì)胞染色體變異和病毒的持續(xù)感染[13]。本研究檢測(cè)為UU-RNA,因RNA遠(yuǎn)不如DNA穩(wěn)定,病原體死后RNA很快降解,檢測(cè)病毒RNA便于鑒別菌體存活狀態(tài),判斷是否是現(xiàn)癥感染。本研究顯示,女性在LR-HPV陽(yáng)性組中UU陽(yáng)性率明顯高于陰性組,表明低危型HPV感染與UU的現(xiàn)癥感染存在一定的相關(guān)性。

    綜上,本研究UU和HPV感染率女性明顯高于男性,而UU的感染更多集中于女性,無論是單一感染還是混合感染,CT和NG的感染無性別差異;在婦科門診和皮膚性病門診,UU-RNA檢出率最高,達(dá)到60%,其次為HPV-DNA;男性和女性均以UU感染居首位,這點(diǎn)與其生理的活躍期以及職業(yè)社會(huì)背景直接相關(guān)。在高危型HPV陽(yáng)性組中,男性和女性CT的陽(yáng)性率明顯高于HR-HPV陰性組,表明CT與高危型HPV感染具有一定的相關(guān)性;在低危型HPV陽(yáng)性組中,女性UU陽(yáng)性率明顯高于陰性組,表明低危型HPV感染與UU的現(xiàn)癥感染存在一定關(guān)系。CT和UU這兩種病原體是否能引發(fā)HPV持續(xù)性感染、增加宮頸癌變的風(fēng)險(xiǎn)需要進(jìn)一步研究。由此可見,生殖道混合感染比單一感染危害更大,所以在診斷和治療泌尿生殖疾病過程中,聯(lián)合4種病原體同時(shí)檢測(cè),尤其是在HPV分型檢測(cè)陽(yáng)性后同時(shí)進(jìn)行CT、NG 和UU的檢測(cè),對(duì)感染呈上升趨勢(shì)的HPV及其致癌因子給予足夠的重視,及早發(fā)現(xiàn)和全面控制性病病原體的傳播,進(jìn)而提高混合感染的總體治愈率。

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