3種軟棗獼猴桃的離體快繁技術(shù)

韓德偉，關(guān)麗霞

（遼寧農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，遼寧營口 115009）

軟棗獼猴桃（Kiwi berry），別名：奇異莓、軟棗子、圓棗子，是獼猴桃科獼猴桃屬多年生木質(zhì)藤本植物，有“水果之王”的美稱，主要分布在我國的華北、西北、東北及長江流域，其它國家也有分布。其中，我國東北南部山區(qū)較多見，是珍貴的抗寒果樹資源，也是當(dāng)今世界新興小漿果類樹種之一。目前，丹東地區(qū)野生資源最為豐富。軟棗獼猴桃果實翠綠無毛，細(xì)嫩多汁，酸甜可口，風(fēng)味獨特，營養(yǎng)豐富。軟棗獼猴桃享有“水果之王，維C之冠”的美譽。軟棗獼猴桃不僅抗病蟲害，而且維生素C含量極高，果實無污染、口感好，全株根、莖、葉、果實均可入藥。因此，市場對軟棗獼猴桃需求量不斷增加，但軟棗獼猴桃種質(zhì)資源缺乏，采用播種方式有性繁殖難以區(qū)分雌雄株，通過嫁接、扦插等常規(guī)無性繁殖方式，繁殖系數(shù)低、周期長、繁殖困難，且品種間差異顯著，故而影響了優(yōu)良軟棗獼猴桃品種的大面積推廣。為了快速滿足市場需要，及時提供大量整齊一致、優(yōu)良的種苗，本文對3種市場深受歡迎的軟棗獼猴桃進(jìn)行了深入的離體快繁技術(shù)研究。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試材料為桓優(yōu)1號、龍成2號、魁綠。上述材料均取自遼寧營口蓋洲惠順果蔬合作社春季當(dāng)年生枝條。

1.2 試驗方法

在春季溫室內(nèi)軟棗獼猴桃萌動20d后，剪取直徑0.5cm左右、無病蟲害、健壯、未木質(zhì)化的枝條。剪去枝上葉片，留下0.3cm長的葉柄，切割為4～6cm左右長的莖梢，然后置于流水下沖洗0.5～1h，再在無菌操作工作臺上，用70%乙醇溶液消毒30s，2.0%NaClO浸泡消毒8～10min，最后用無菌水沖洗3次，瀝干水分備用。

1.2.1 初代誘導(dǎo)培養(yǎng)。將備用材料，剪切成1.5～2.5cm長、帶1～2節(jié)的莖段，接種于初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)培養(yǎng)基設(shè)3個處理：①MS+BA 0.7mg/L+NAA 0.1mg/L（附加蔗糖 30g/L、瓊脂 7g/L，pH 值 5.8～6.0，下同），②MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L，③MS+BA1.5mg/L+NAA 0.1mg/L。3個品種3種培養(yǎng)基各接種30瓶，重復(fù)2次。培養(yǎng)條件：溫度 18～21℃、光照強度 1800～2300Lx、光照14h/d。

1.2.2 繼代增殖培養(yǎng)。將外植體誘導(dǎo)出的腋芽，切割成含1～2節(jié)的莖段或莖尖，接種于繼代增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)。增殖培養(yǎng)基同樣設(shè)3個處理：①MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.05 mg/L，②MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.05mg/L，③MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L，3個品種3種培養(yǎng)基各接種30瓶，重復(fù)2次。培養(yǎng)條件同上。

1.2.3 試管生根及移栽馴化。將要進(jìn)行生根培養(yǎng)的增殖苗，剪切成高3cm以上的單苗，接種到生根培養(yǎng)基1/2 MS+IBA 0.1mg/L+NAA 0.05mg/L中進(jìn)行生根培養(yǎng)。培養(yǎng)條件同上：溫度18～21℃，光照強度20000～30000 Lx、光照14h/d。生根培養(yǎng)15d后，將根長0.5cm以上的試管苗進(jìn)行馴化移栽和養(yǎng)護(hù)管理。

2 結(jié)果與分析

2.1 3種軟棗獼猴桃的初代誘導(dǎo)

3種軟棗獼猴桃的外植體在初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，7d后，陸續(xù)可見莖段葉腋處有芽萌出，隨著時間延長，芽逐漸長大，28d后長成5cm高以上新梢。在誘導(dǎo)培養(yǎng)基①MS+BA 0.7mg/L+NA 0.1mg/L上，3個品種軟棗獼猴桃均可萌出1～4個不等新梢，在相同培養(yǎng)條件下，新梢生長時間長，生長速度相對較慢；在誘導(dǎo)培養(yǎng)基②MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L上，3個品種軟棗獼猴桃均可萌出3～6個不等新梢，在相同培養(yǎng)條件下，新梢生長時間較短，生長速度相對較快；在誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L上，3個品種軟棗獼猴桃均可萌出4～8個不等新梢，在相同培養(yǎng)條件下，新梢生長時間最長，生長速度相對最慢，且均伴有玻璃化苗產(chǎn)生。但3個品種軟棗獼猴桃在相同的初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基中差異不明顯。所以，MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L是3種軟棗獼猴桃誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基。

2.2 3種軟棗獼猴桃的增殖培養(yǎng)

轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)的增殖苗，12d后，在基部或葉腋處分化出新的芽苗，隨著時間延長，芽苗逐漸長大，30d左右統(tǒng)計各個品種在各培養(yǎng)基上的增殖情況，從而發(fā)現(xiàn)桓優(yōu)1號、魁綠2個品種在增殖培養(yǎng)基MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.05mg/L上增殖效果最好，增殖系數(shù)可達(dá)8以上；龍成2號在增殖培養(yǎng)基MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L上增殖效果最好，增殖系數(shù)在7以上。

2.3 3種軟棗獼猴桃的生根培養(yǎng)及馴化移栽

增殖苗轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，7d后，苗基部形成根原基，15d左右，長成具有2～3條、0.5cm長的根，從而形成完整植株。3種軟棗獼猴桃試管苗瓶內(nèi)生根率可達(dá)98%以上。此時，將有根試管苗移至溫室，上覆遮陽網(wǎng)，閉瓶煉苗3d，然后再開瓶煉苗3d,最后開蓋取苗，洗去苗基部培養(yǎng)基，移栽到滅菌過的河沙、中草炭（2∶1）的混合基質(zhì)中。栽后前期，上邊要搭小拱棚，栽培管理條件：空氣濕度80%以上，溫度20～25℃，光強5000Lx以下。1個月后，有新葉長出，代表成活，成活率在90%以上。

3 小結(jié)與討論

軟棗稱猴桃果實清香適口、營養(yǎng)豐富、維生素含量較高，同時是制作飲料和食品的美味原料。為滿足市場對軟棗獼猴桃種苗的需求，選育出了產(chǎn)量高、果實大、品質(zhì)好的優(yōu)良單株。為達(dá)到短期、規(guī)?；鲋?，對3個品種的優(yōu)良單株進(jìn)行了離體快繁的研究，結(jié)果表明：3種軟棗獼猴桃的初代誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基為MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L；桓優(yōu)1號、魁綠2個品種的最適宜增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.05mg/L，龍成2號的最適宜增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.05mg/L；3種軟棗獼猴桃在培養(yǎng)基1/2 MS+IBA 0.1mg/L+NAA 0.05mg/L中生根率達(dá)90%以上。