核桃青皮提取物對病原生物抑菌作用的研究進展

韓曉云，劉鵬，王震，范學紅

（商洛職業(yè)技術(shù)學院，陜西商洛 726000）

核桃青皮，即為胡桃科植物胡桃的未成熟果實的外果皮，又稱青龍衣。截至2015年年底，商洛全市核桃種植面積達310萬畝。核桃青皮作為核桃收獲中產(chǎn)生的農(nóng)林廢棄物，有著巨大的存量。在核桃果實采收后，它們被當作廢棄物堆在田間，持續(xù)污染環(huán)境，危害動植物的生存，破壞生態(tài)環(huán)境。核桃青皮作為一種寶貴的可再利用資源，其很多藥用價值需要深入開發(fā)和利用。為了更好地發(fā)展商洛核桃產(chǎn)業(yè)，延長核桃經(jīng)濟產(chǎn)業(yè)鏈，必須走綜合利用的道路。有研究表明，核桃的各個部位如樹葉、樹枝及外皮都有較高的藥用價值，具有抗菌、殺蟲等諸多功效[1-3]。本文就核桃的抑菌、抗毒及殺蟲方面的研究現(xiàn)狀進行分類綜述。

1 對細菌的抑制作用

核桃青皮提取物對致病菌性細菌與條件致病菌有較廣泛的抑制作用，例如食源性腸道致病菌大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、腸炎沙門菌、接觸感染性細菌如銅綠假單胞菌、呼吸道感染性細菌，比如肺炎克雷伯菌、普通變形桿菌等。

吳瑩[4]等以新疆核桃青皮為試驗對象，研究蒸餾水、甲醇、乙醇和丙酮的水溶液浸提核桃青皮后獲得的提取物對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌三種菌的抑菌性能，試驗表明不同濃度水溶液浸提后獲得的核桃青皮提取物都對上述三種菌的生長繁殖有一定的抑制作用，且25%乙醇提取物對大腸桿菌的抑菌圈直徑最大，即抑菌作用最好。

龔斌榮[5]等選用新疆阿克蘇核桃青皮作為試驗對象，研究95%乙醇回流相、石油醚萃取相、乙酸乙酯萃取相、正丁醇萃取相的抑菌活性，試驗結(jié)果與吳瑩等的結(jié)果相同，其不同極性的溶劑萃取相對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌的生長繁殖有較好的抑制效果。

丁存寶[6]等用牛津杯法和十字交叉法測定遵化地區(qū)的核桃青皮烘干的粉末的不同極性溶劑的萃取液對白色葡萄球菌、傷寒桿菌的抑菌作用，研究結(jié)果表明的95%乙醇、石油醚、乙酸乙酯和正丁醇的核桃青皮萃取液對受試菌都有一定的抑菌作用，且95%乙醇萃取液的抑菌圈最大，抑菌率最高。

張衛(wèi)星[7]等將四川廣元的核桃青皮作為供試對象，研究烘干粉碎過篩后獲得的核桃青皮粉的不同極性溶劑的萃取物對銅綠假單胞菌的抗菌作用，抗菌活性采用牛津杯法測定，抗菌圈直徑用十字交叉法進行測定，研究發(fā)現(xiàn)，核桃青皮乙酸乙酯提取相對銅綠假單胞菌有較強的抗菌作用。

任先偉等以云南臨滄核桃為試驗對象，研究核桃青皮不同極性有機溶劑的萃取相的抑菌活性，試驗結(jié)果表明乙酸乙酯萃取相對肺炎克雷伯菌、普通變形桿菌、粘質(zhì)沙雷菌都有較好的抑制生長作用。

2 對真菌的抑制作用

王剛霞[8]采用生長速率法和孢子萌發(fā)法研究新疆吐魯番的核桃青皮的乙醇提取物對青霉菌、匍枝根霉、灰葡萄孢、鐮刀菌、鏈孢屬的抑制作用，試驗結(jié)果表明，核桃青皮的乙醇提取物對5種受試菌的孢子萌發(fā)均有一定的抑制作用，且對青霉菌的抑制效果最好。

張衛(wèi)星等研究核桃青皮提取物對意大利青霉菌、柑橘綠霉菌及辣椒疫霉菌的抗真菌作用，石油醚相對真菌有較強的抗菌作用。

丁存寶[9]等人研究核桃青皮乙醇、石油醚、正丁醇以及乙酸乙酯萃取液對酵母菌、青霉菌、木霉菌、馬拉色菌及腳氣真菌的抗真菌活性，試驗結(jié)果表明，其不同極性溶劑的萃取液對酵母菌、青霉菌和木霉菌均有較好的抑制效果。

黃支權(quán)[10]等研究北京昌平峪溝收集的核桃青皮自然陰干后的抗真菌活性，試驗結(jié)果表明，核桃青皮各溶劑提取物對葡萄蔓枯病菌、葡萄潰瘍病菌和辣椒疫霉病菌有很好的抑制活性。

3 對害蟲的影響

翟梅枝[11]等采用陜西省渭北核桃產(chǎn)區(qū)黃龍縣的核桃為試驗對象，研究其青皮提取物對粘蟲和小菜蛾的拒食作用和胃毒作用，結(jié)果表明，核桃青皮的乙酸乙酯萃取物對粘蟲有較為明顯的拒食和胃毒作用。

王宏虬[12]等選用云南大理漾鼻縣的核桃青皮為研究對象，采用飼喂法研究核桃青皮提取物對馬鈴薯蚜蟲與瓢蟲幼蟲的觸殺作用，結(jié)果表明，乙醇提取物對瓢蟲的胃殺效果較好，而對蚜蟲的胃殺和觸殺均有較好的效果。

梁永鋒[13]選用寧夏六盤山區(qū)的核桃青皮為研究對象，采用載毒葉片法研究核桃青皮提取物對枸杞蚜蟲的拒食作用，試驗結(jié)果表明核桃青皮乙醇粗提物對枸杞蚜蟲有較強的觸殺活性。

劉妍[14]等選用北京市平谷區(qū)蘇子峪的核桃青皮為研究對象，采用玻片法來測定朱砂葉螨的觸殺活性。試驗結(jié)果表明，核桃青皮二氯甲烷提取物對朱砂葉螨有很好的觸殺活性。

何念武[15]等選用陜西省商洛市洛南縣的核桃青皮為研究對象，采用噴霧法研究不同溶劑核桃青皮提取物對煙青蟲的毒殺活性，試驗結(jié)果表明，核桃青皮不同溶劑提取物對煙青蟲具有一定的毒殺作用。

4 對病毒的影響

張新華[16]等以陜西渭北黃龍縣的核桃青皮為試材，采用半葉混合法來研究其不同溶劑的浸提物對煙草花葉病毒的抑制作用。試驗結(jié)果表明，核桃青皮的95%乙醇溶液冷浸提取液的抗病毒活性效果最好，其抑制生長率達80%。

5 影響核桃青皮提取物抑菌活性的因素

5.1 地區(qū)

呂海寧[17]選用北京市昌平區(qū)黑山寨的核桃青皮為試驗對象，采用杯碟法研究核桃青皮乙醇提取物的抑菌活性，試驗結(jié)果表明，核桃青皮乙醇提取物對大腸桿菌和枯草芽孢桿菌有較好的抑制作用，但對黃色葡萄球菌的生長繁殖并無影響，這個試驗結(jié)果與吳瑩等的研究結(jié)果相反?？赡芘c核桃的產(chǎn)地、品種相關(guān)。

5.2 核桃青皮粉的干燥方法

張立華[18]等以棗莊市山亭區(qū)核桃青皮為試驗對象，研究自然干燥、熱風干燥以及真空冷凍干燥三種方法處理核桃青皮乙醇萃取的抑菌活性，試驗結(jié)果表明，真空冷凍干燥后的核桃青皮萃取液抑菌效果最好。

5.3 提取方法與不同效率

浸提劑極性不同、浸提方法不同，其提取的核桃青皮的抑菌活性成分含量不同，因此，對不同抑菌的抑菌效果以及抑菌種類也不同。

孫墨瓏[19]等用濃度為60%的乙醇水溶液在溫度為60℃的條件下分別振蕩浸提、索氏抽提以及超聲浸提核桃青皮中抑菌活性成分，結(jié)果發(fā)現(xiàn)超聲浸提法的抑菌活性成分含量最高，抑菌效果最好。

6 核桃青皮提取物抑制病原生物的作用機理

6.1 干擾細菌的酶系統(tǒng)和代謝

吳朝霞等研究核桃青皮中胡桃醌對大腸桿菌的抑菌作用的抑制機理，主要通過測定SOD活性，CAT活性及MDA含量來研究胡桃醌對大腸桿菌的體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的影響程度，試驗結(jié)果表明，胡桃醌可使大腸桿菌細胞內(nèi)產(chǎn)生氧自由基損傷，增強細胞的過氧化反應，減弱細胞的抗氧能力，最終誘導細胞凋亡。

王海香等研究核桃青皮提取液對朱砂葉螨的毒力作用，結(jié)果表明核桃青皮中活性物質(zhì)只要通過對乙酰膽堿酯酶和Na+,K+-ATPase兩種酶活性的影響，引起神經(jīng)傳遞阻斷，從而導致螨體死亡。

6.2 損傷細菌細胞膜或細胞壁的通透性

任先偉[20]等研究核桃青皮乙酸乙酯萃取相對金黃色葡萄球菌的抑菌機理，試驗通過觀察細菌的細胞形態(tài)及檢測培養(yǎng)液中的大分子物質(zhì)，發(fā)現(xiàn)核桃青皮乙酸乙酯提取液通過破壞了菌體細胞膜、細胞壁結(jié)構(gòu)，從而增加了菌體細胞膜通透性，使得細胞內(nèi)大分子物質(zhì)大量溢出，最終導致菌體死亡。

蘇學友研究氯仿萃取物對桃褐腐病菌的抑菌機理，其采用牛津杯法研究萃取物對孢子萌發(fā)的影響，結(jié)果表明，處理后的供試菌孢子萌發(fā)受到明顯限制，再觀察桃褐菌的菌絲，發(fā)現(xiàn)病菌的菌絲斷裂，細胞膨大呈泡囊狀，且細胞質(zhì)外露。

許紫峻[21]等采用新疆喀什地區(qū)的核桃青皮來研究其乙醇提取液抑制霉菌的作用機理，他們選用電導率、丙二醛和過氧化氫酶含量這三個指標來表征霉菌細胞的破壞程度，試驗結(jié)果表明，霉菌在經(jīng)過乙醇提取物處理后2h，其細胞膜的破壞程度最大。