用高效液相色譜法測(cè)定食品中姜黃素

□ 王善鈺 山東理工大學(xué)農(nóng)業(yè)工程與食品科學(xué)學(xué)院

當(dāng)前在我國(guó)的食品生產(chǎn)及加工行業(yè)并沒有專門的針對(duì)姜黃素的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)，相應(yīng)的測(cè)定方法和樣品提取步驟也沒有具體的規(guī)定，但是目前公認(rèn)高效液相色譜法是比較科學(xué)和準(zhǔn)確的測(cè)定方法，通過(guò)專業(yè)的成分分析，能夠更好的監(jiān)督姜黃素這種食品添加劑的使用，并為今后完善姜黃素的測(cè)定和制訂檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)奠定了技術(shù)基礎(chǔ)[1]。本文主要從高效液相色譜法的檢測(cè)運(yùn)用原理入手，對(duì)具體的檢測(cè)步驟和注意事項(xiàng)進(jìn)行分析。

1 用高效液相色譜法檢測(cè)食品中的姜黃素的運(yùn)用原理

1.1 姜黃素概述

姜黃素主要就是指從姜科植物中提取而來(lái)的一種天然色素，主要來(lái)源于姜類植物的根莖，在性質(zhì)上屬于一種酸性多酚物質(zhì)，姜黃素有著比較重要的醫(yī)學(xué)用途，在食品生產(chǎn)加工領(lǐng)域主要是用于肉類、腸類、糖果、糕點(diǎn)、果凍以及飲品中，用以食品的著色，使用量必須要符合相應(yīng)的生產(chǎn)添加標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)規(guī)定，在糖果、飲品等食品中的含量不超過(guò)0.01 g/kg，在肉類食品中的含量不超過(guò)0.15 g/kg。

1.2 高效液相色譜概述

高效液相色譜法還可以稱為高壓液相色譜法或者高速、高分離液相色譜檢測(cè)法。該方法隸屬于色譜檢測(cè)法，主要是以液體作為檢測(cè)相，再利用高壓系統(tǒng)結(jié)合相應(yīng)的溶劑導(dǎo)入裝有固定相的色譜柱中，在色譜柱中實(shí)現(xiàn)各種成分的分離，之后再利用高壓液相儀對(duì)樣本進(jìn)行分析和檢測(cè)，之后根據(jù)色譜圖可以直觀的了解到某種成分的濃度及含量[2]。

1.3 測(cè)定原理

運(yùn)用高效液相色譜法能夠更加快速、簡(jiǎn)便的對(duì)食品中的姜黃素進(jìn)行提取以及濃度測(cè)定。在對(duì)一些藥物中的姜黃素進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，一般只需要利用相應(yīng)的溶劑進(jìn)行藥物溶解就可以直接進(jìn)行觀察，但是在食品中，由于食品中的成分以及添加劑種類和含量都比較多，尤其是在固態(tài)食品中，無(wú)法使用過(guò)濾提取的方式進(jìn)行測(cè)定，而是需要經(jīng)過(guò)凈化、濃縮等步驟來(lái)獲得檢測(cè)樣本，這就需要利用到高效液相色譜法來(lái)進(jìn)行具體的操作[3]。

2 高效液相色譜法測(cè)定姜黃素的主要步驟

2.1 姜黃素提取

在利用高效液相色譜法進(jìn)行食品中的姜黃素測(cè)定時(shí)，第一步就是要實(shí)現(xiàn)樣本的提取，首先要準(zhǔn)備分散器、高效液相儀、蒸發(fā)儀等設(shè)備，同時(shí)將準(zhǔn)備甲醇、氨水、乙醇以及聚酰胺等化學(xué)試劑。具體的操作步驟如下：將食品如糕點(diǎn)、糖果等攪碎并進(jìn)行攪拌，之后選取1 g樣本置于離心管中，加入氨水、乙醇試劑，比例保持在1∶3的閾值內(nèi)，之后利用分散器這一設(shè)備進(jìn)行高速離散，向分離出的上清液中加入相同比例的氨水和乙醇進(jìn)行二次提取，最后就可以用聚酰胺對(duì)上清液中的姜黃素進(jìn)行吸附。將吸附有姜黃素的聚酰胺進(jìn)行洗滌，加入適量的乙醇溶液和甲醇，之后將其導(dǎo)入到混合器中，利用高效液相儀進(jìn)行相應(yīng)的色譜檢測(cè)[4]。

2.2 姜黃素液相儀測(cè)定

利用高效液相儀進(jìn)行檢測(cè)的過(guò)程中，要對(duì)流動(dòng)相和固定相進(jìn)行確定，流動(dòng)相一般是甲醇和乙酸銨溶劑，將流速維持在0.25 mL/min，色譜的溫度要維持在30 ℃，在此條件下進(jìn)行色譜分析，并繪制相應(yīng)的檢測(cè)色譜圖和含量曲線，對(duì)食品中的姜黃素含量進(jìn)行計(jì)算。

2.3 測(cè)定結(jié)果分析

用高效液相色譜法進(jìn)行姜黃素的測(cè)定，不僅要對(duì)姜黃素的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行觀察，還要針對(duì)實(shí)驗(yàn)的具體情況對(duì)姜黃素的回收率、高效液相色譜法的檢測(cè)精密度、最佳的檢測(cè)波長(zhǎng)等進(jìn)行總結(jié)和分析。根據(jù)多次實(shí)驗(yàn)可知，將波長(zhǎng)控制在200～800 nm能夠最為靈敏的檢測(cè)出食品中的姜黃素含量，同時(shí)在這一波長(zhǎng)下，聚酰胺吸附姜黃素的回收率能夠達(dá)到85%～90%，相應(yīng)的濃度曲線也更為標(biāo)準(zhǔn)，能夠得到一個(gè)較為合理的線性回歸方程，使得食品中姜黃素的檢測(cè)有定量計(jì)算的值域范圍，也提升了高效液相色譜儀的精密度。

3 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，利用高效液相色譜法對(duì)食品中的姜黃素進(jìn)行測(cè)定，能夠在樣品提取以及濃縮分離上簡(jiǎn)化操作，同時(shí)對(duì)于得出的檢測(cè)結(jié)果也能利用線性方程進(jìn)行準(zhǔn)確的計(jì)算，能夠真正實(shí)現(xiàn)食品中姜黃素的定量分析，有助于食品檢驗(yàn)檢疫部門進(jìn)行使用量的督查。