使用Cella Vision DI60系統(tǒng)估算血小板計(jì)數(shù)應(yīng)用評(píng)價(jià)

黃繼偉 黃婧芫 陳喻

【摘 要】目的：評(píng)價(jià)Cella Vision DI60系統(tǒng)在血小板計(jì)數(shù)方面的可靠性及準(zhǔn)確性進(jìn)行驗(yàn)證及評(píng)價(jià)。方法：對(duì)100例外周血涂片分別使用人工顯微鏡計(jì)數(shù)血小板、SysmexXN10血液分析儀計(jì)數(shù)血小板及Cella Vision DI60系統(tǒng)估算血小板計(jì)數(shù)。并對(duì)三種計(jì)數(shù)血小板的方法進(jìn)相關(guān)性及統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果：Cella Vision DI60系統(tǒng)血小板估算計(jì)數(shù)結(jié)果與顯微鏡手工血小板計(jì)數(shù)的相關(guān)系數(shù)r2=0.998；Cella Vision DI60系統(tǒng)血小板估算計(jì)數(shù)結(jié)果與Sysmex XN10血液分析儀計(jì)數(shù)結(jié)果的相關(guān)系數(shù)r2=0.995，Cella Vision DI60系統(tǒng)血小板估算計(jì)數(shù)與Sysmex XN10儀器計(jì)數(shù)血小板和顯微鏡下手工血小板計(jì)數(shù)均有非常好的相關(guān)性。結(jié)論：使用Cella Vision DI60系統(tǒng)在外周血血小板計(jì)數(shù)有利于實(shí)現(xiàn)血小板計(jì)數(shù)的自動(dòng)化與標(biāo)準(zhǔn)化，提高工作效率，具有較好的臨床應(yīng)用價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】 血小板計(jì)數(shù)； Cella Vision DI60系統(tǒng)；SysmexXN10；顯微鏡手工計(jì)數(shù)；實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化

【中圖分類號(hào)】R969.4 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A 【文章編號(hào)】1005-0019（2018）17-270-01

（前言）外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)是實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢查項(xiàng)目之一，其中血小板計(jì)數(shù)為術(shù)前檢查、術(shù)后監(jiān)測(cè)、血栓形成、器官移植等具有重要作用。隨著血細(xì)胞分析儀技術(shù)的不斷成熟，大部分患者的血小板計(jì)數(shù)可由血細(xì)胞分析儀進(jìn)行，但顯微鏡鏡檢仍是金標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)血常規(guī)異?；虺霈F(xiàn)危急值時(shí)，尤其在病理?xiàng)l件下，必須進(jìn)行人工顯微鏡下手工計(jì)數(shù)血小板。隨著臨床實(shí)驗(yàn)室臨檢復(fù)檢規(guī)則的嚴(yán)格執(zhí)行以及臨床標(biāo)本量的增加，以自動(dòng)化儀器進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)分析是實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化發(fā)展的必然趨勢(shì)。Cella Vision DI60是模擬人工在顯微鏡下對(duì)外周血涂片進(jìn)行鏡檢的閱片系統(tǒng)。本研究選取本院100例患者外周血標(biāo)本，使用Cella Vision DI60估算血小板計(jì)數(shù)，Sysmex XN10血細(xì)胞分析儀血小板計(jì)數(shù)與顯微鏡下手工計(jì)數(shù)進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)結(jié)果進(jìn)行比較，評(píng)價(jià)Cella Vision DI60系統(tǒng)在外周血血小板計(jì)數(shù)的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機(jī)選取2016年12月到2017年2月，我院血常規(guī)標(biāo)本100例（PLT<50×109/L50例，PLT50～200×109/L42例，PLT201～840×109/L18例），其中男性患者54名，女性患者46名，年齡為8至81歲，中位年齡為42歲。采集靜脈血2mL，使用含乙二胺四乙酸二鉀鹽（EDTA-K2）抗凝劑的真空采血管，排除不合格標(biāo)本（如采集量不足、肉眼觀察可見(jiàn)凝塊、溶血、脂血；顯微鏡下有血小板聚集的標(biāo)本）的影響[1]。

1.2 儀器與試劑 OLYMPU光學(xué)顯微鏡CX-21；牛鮑計(jì)數(shù)板；草酸銨稀釋液；微量吸管；SysmexXN10（B3）血細(xì)胞分析儀；Cella Vision DI60系統(tǒng)全自動(dòng)閱片機(jī)；SysmexSP-10全自動(dòng)制片機(jī)；Sysme原裝玻片；SysmexXN10血液分析儀使用配套試劑及其質(zhì)控液（日本Sysmex 公司） ；瑞氏‐吉姆薩染液（珠海貝索生物技術(shù)有限公司）；SysmexDCL稀釋液及去離子水。

1.3 方法 工作前對(duì)Cella Vision DI60閱片機(jī)、SysmexXN10（B3）血液分析儀和SysmexSP-10自動(dòng)制片機(jī)、Cella Vision DI60閱片機(jī)進(jìn)行校準(zhǔn)、調(diào)試及報(bào)警信息設(shè)置。將顯微鏡鏡頭擦拭干凈，準(zhǔn)備草酸銨稀釋液、微量吸管、牛鮑計(jì)數(shù)板。并對(duì)上述100份外周血標(biāo)本分別使用SysmexXN10血液分析儀自動(dòng)計(jì)數(shù)血小板、由經(jīng)板結(jié)果作為計(jì)數(shù)金標(biāo)準(zhǔn)）和使用SysmexSP-10自動(dòng)推制片及染色（珠海貝索瑞氏-吉姆薩染液）并對(duì)制好的血片使用Cella Vision DI60系統(tǒng)估算血小板計(jì)數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用Microsoft office Excel 2007整理數(shù)據(jù)，采用回歸方程對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。分別對(duì)Cella Vision DI60系統(tǒng)估算血小板計(jì)數(shù)結(jié)果與人工顯微鏡計(jì)數(shù)血小板結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析、Cella Vision DI60系統(tǒng)估算血小板計(jì)數(shù)結(jié)果與SysmexXN10血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 Cella Vision DI60系統(tǒng)估算血小板計(jì)數(shù)結(jié)果與人工顯微鏡鏡檢的相關(guān)性y=0.980 X+2.727，r2=0.998 （見(jiàn)圖1）

2.2 Cella Vision DI60系統(tǒng)估算血小板計(jì)數(shù)結(jié)果與SysmexXN10全自動(dòng)血液分析儀計(jì)數(shù)結(jié)果的相關(guān)性y=0.978X+0.351，r2=0.995（見(jiàn)圖2）

2.3 Cella Vision DI60系統(tǒng)血小板估算計(jì)數(shù)血小板與Sysmx XN10血液分析儀自動(dòng)計(jì)數(shù)血小板、顯微鏡下手工血小板計(jì)數(shù)均有非常好的相關(guān)性。

3 討論

血細(xì)胞數(shù)字圖像分析技術(shù)從問(wèn)世至今已有近50年的歷史，尤其近十幾年出現(xiàn)了突飛猛進(jìn)的發(fā)展。在1966年，Prewitt等[]首先報(bào)道應(yīng)用自動(dòng)顯微鏡掃描系統(tǒng)進(jìn)行血細(xì)胞形態(tài)分析。隨后的幾十年中，相關(guān)的研究和報(bào)道一直沒(méi)有停止，但由于計(jì)算機(jī)軟件和硬件水平受限以及自動(dòng)化程度不高，該項(xiàng)技術(shù)并未常規(guī)用于臨床試驗(yàn)中。直到Cella Vision DI60系統(tǒng)的出現(xiàn)，實(shí)現(xiàn)了血涂片上的自動(dòng)化、單細(xì)胞層定位、細(xì)胞圖像掃描與獲取、細(xì)胞識(shí)別與預(yù)分類、報(bào)告自動(dòng)生成等功能，并顯著提高了檢測(cè)速度和細(xì)胞圖像質(zhì)量[1]。針對(duì)DI60的多項(xiàng)研究均證實(shí)該儀器與血細(xì)胞分析儀XN1000與顯微鏡下手工計(jì)數(shù)血小板具有較好的相關(guān)性。從此全自動(dòng)閱片機(jī)真正進(jìn)入臨床實(shí)驗(yàn)室，并廣泛投入使用。

在檢測(cè)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，使用DI60進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)，對(duì)推片、染色滴油的要求較高，尤其受染色質(zhì)量影響較大。在計(jì)數(shù)中發(fā)現(xiàn)因染色不均導(dǎo)致計(jì)數(shù)方格的數(shù)量不準(zhǔn)確，影響最終計(jì)算出的結(jié)果。因此，在實(shí)際工作中應(yīng)盡量將儀器參數(shù)設(shè)置在最佳狀態(tài)，以保證儀器的運(yùn)行，實(shí)現(xiàn)檢查過(guò)程中的自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化。[2]

Cella Vision DI60系統(tǒng)采用數(shù)字掃描拍攝將細(xì)胞形態(tài)顯示在電腦屏幕上，與顯微鏡相比存在一定的視差，操作人員需要適應(yīng)在電腦屏幕上觀察細(xì)胞形態(tài)。對(duì)Cella Vision DI60外周血血小板計(jì)數(shù)效果評(píng)估表明，DI60能夠準(zhǔn)確地計(jì)算出血小板的數(shù)量，與SysmexXN10全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板、顯微鏡下手工計(jì)數(shù)血小板具有較好的相關(guān)性。

此外，Cella Vision DI60系統(tǒng)的細(xì)胞圖庫(kù)（包括自帶的參考細(xì)胞圖庫(kù)和日常工作中遇到的有借鑒價(jià)值的細(xì)胞圖像）便與借鑒學(xué)習(xí)、回顧對(duì)比，有利于實(shí)驗(yàn)室人員鑒別細(xì)胞形態(tài)學(xué)能力的提高。雖然Cella Vision DI60不能完全替代人工，其結(jié)果必須經(jīng)過(guò)人工審核才能出報(bào)告，但其自動(dòng)化分析模式有助于降低操作人員的漏檢或經(jīng)驗(yàn)不足帶來(lái)結(jié)果報(bào)告的差異。

Cella Vision DI60的優(yōu)勢(shì)在于：1.閱片效率高。據(jù)相關(guān)資料顯示，Cella Vision DI60的閱片效率為每小時(shí)30-60張，人工計(jì)數(shù)為每小時(shí)5-8張，與人工顯微鏡下計(jì)數(shù)瀏覽全片相比節(jié)省大量時(shí)間。本實(shí)驗(yàn)室使用Cella Vision DI60以來(lái)，臨檢組形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)工作的效率明顯提高。2.使形態(tài)學(xué)分析趨于標(biāo)注化。細(xì)胞分類計(jì)數(shù)存在主觀差異性，不同實(shí)驗(yàn)室、不同工作人員之間，都難以做到標(biāo)準(zhǔn)完全一致，儀器標(biāo)準(zhǔn)化分析過(guò)程可降低此類問(wèn)題的發(fā)生。此外，Cella Vision DI60細(xì)胞圖像保存在數(shù)據(jù)庫(kù)中，便于同事、專家進(jìn)行交流討論，也可用于后期查詢、教學(xué)培訓(xùn)等、。

綜上所述，通過(guò)對(duì)Cella Vision DI60的系統(tǒng)評(píng)價(jià)，表明其具有操作簡(jiǎn)便、速度快、相關(guān)性好，不受主觀因素影響等優(yōu)點(diǎn)，其應(yīng)用有利于緩解實(shí)驗(yàn)室工作人員緊缺，工作強(qiáng)度大的現(xiàn)狀。因此，采用標(biāo)準(zhǔn)化工作輔助檢查，可以用于外周血血小板鏡檢計(jì)數(shù)。

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