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    PARP-1在三陰乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)及與Ca153和CEA的臨床相關(guān)性研究

    2018-12-26 10:33:14林丹麗陳機(jī)瓊馮慧艷鄒享珍劉妙娥王毅軒鄒前福
    中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué) 2018年12期
    關(guān)鍵詞:陽性細(xì)胞分化陰性

    林丹麗,陳機(jī)瓊,馮慧艷,鄒享珍,劉妙娥,王毅軒,鄒前福

    (東莞樟木頭醫(yī)院 檢驗(yàn)科,廣東 東莞523633)

    乳腺癌的發(fā)病率逐年升高[1,2],治療主要以綜合治療為主,只有當(dāng)腫瘤細(xì)胞相應(yīng)的激素受體如人類表皮生長因子受體2(HER-2)、雌激素受體(ER)或孕激素受體(PR)蛋白陽性表達(dá)時,乳腺癌的靶向治療或者全身治療藥物才能夠發(fā)揮抗腫瘤的作用[3]。三陰乳腺癌(TNBC)是指HER-2、ER和PR表達(dá)狀態(tài)均呈陰性的乳腺癌亞型[4],它的復(fù)發(fā)率和轉(zhuǎn)移率較高,患者的生存時間較短,預(yù)后也較其他類型的乳腺癌患者差,而且不能從靶向治療和內(nèi)分泌治療中受益[5]。聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)是真核細(xì)胞內(nèi)的聚ADP核糖聚合酶,在DNA的損傷修復(fù)中具有重要作用[6]。本研究對PARP-1在60例三陰乳腺癌患者細(xì)胞中的表達(dá)及與Ca153和CEA的臨床相關(guān)性進(jìn)行研究,報道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    收集2017年1月到2018年2月在本院,廣州金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心和周邊醫(yī)院檢驗(yàn)科已經(jīng)診斷為三陰乳腺癌的60例患者作為研究對象。年齡26-68歲,平均年齡(61.93±7.11),其中18例為低分化(3級),26例為中分化(2級),16例為高分化(1級)。納入標(biāo)準(zhǔn):符合乳腺癌相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)且經(jīng)免疫組織化學(xué)法證實(shí)ER、PR和HER-2均為陰性表達(dá)。排除標(biāo)準(zhǔn):在采集標(biāo)本之前接受過化療、放療或者其他治療;含有其他可能影響該研究結(jié)果的疾病者;有其他惡性腫瘤者。另選取30例非三陰乳腺癌的患者作為對照組,年齡25-68歲,平均年齡(61.54±7.27)歲,其中7例為低分化,16例為中分化,7例為高分化。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。所有患者均簽署知情同意書且該方案已經(jīng)獲得倫理委員會的批準(zhǔn)。

    1.2 方法

    利用免疫組織化學(xué)染色技術(shù)將兩組患者的乳腺組織固定脫水后用石蠟包埋制成厚約4.0 μm的切片,然后采用SP法檢測PARP-1的表達(dá)水平。單克隆抗體PARP-1購于Santa Cruz公司,SP法檢測試劑盒購于北京中杉金橋公司,按試劑盒說明書進(jìn)行操作。使用磷酸鹽緩沖液(PBS)溶液代替一抗作為陰性對照,陽性樣本片作為陽性對照。在高倍鏡下觀察樣本,每個視野計數(shù)100個腫瘤細(xì)胞,每張切片觀察5個視野。

    1.3 觀察指標(biāo)

    細(xì)胞核或者細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒時為陽性反應(yīng),發(fā)生陽性反應(yīng)的細(xì)胞為陽性細(xì)胞。陽性反應(yīng)的強(qiáng)度根據(jù)染色的深淺和視野內(nèi)陽性細(xì)胞所占的比例進(jìn)行判定。按染色深淺I進(jìn)行評分:陰性為0分;黃色為1分;棕黃色為2分;棕色為3分。按視野內(nèi)陽性細(xì)胞所占百分比P進(jìn)行評分:>75%為4分;>50%-75%為3分;5%-50%為2分;5%-25%為1分;≤5%為0分。PARP-1表達(dá)水平分值S=P×I[7]。S值<3分為陰性表達(dá),S值≥3分為陽性表達(dá),其中最高分為12分。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

    本研究所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,計數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 三陰乳腺癌和非三陰乳腺癌細(xì)胞中PARP-1的表達(dá)

    三陰乳腺癌細(xì)胞中PARP-1表達(dá)及陽性率較非三陰乳腺癌細(xì)胞中高,兩組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表1。

    表1 PARP-1在TNBC和NTNBC細(xì)胞中的表達(dá)(例數(shù),%)

    2.2 PARP-1與Ca153在三陰乳腺癌細(xì)胞中表達(dá)的相互關(guān)系

    三陰乳腺癌細(xì)胞中PARP-1與Ca153的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.52,P<0.05)。見表2。

    表2 三陰乳腺癌細(xì)胞中PARP-1與Ca153表達(dá)之間的相關(guān)性

    2.3 PARP-1與CEA在三陰乳腺癌細(xì)胞中表達(dá)的相互關(guān)系

    三陰乳腺癌細(xì)胞中PARP-1與CEA的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.26,P<0.05)。見表3。

    表3 三陰乳腺癌細(xì)胞中PARP-1與CEA表達(dá)之間的相關(guān)性

    3 討論

    乳腺癌在臨床上較為常見,是女性最常見的惡性腫瘤之一。三陰乳腺癌的惡性程度高,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率和復(fù)發(fā)率也較高,預(yù)后較差,對女性的生命健康造成嚴(yán)重威脅。目前臨床上尚未出現(xiàn)對三陰乳腺癌有效的靶向治療和全身治療方法。

    PARP-1是PARP家族中最有特點(diǎn)和含量最多的一員,它的本質(zhì)是核蛋白酶,可以在除中性粒細(xì)胞外的人體所有有核細(xì)胞中表達(dá)。PARP-1對DNA斷端敏感性高,與DNA斷端結(jié)合后被激活,啟動DNA損傷修復(fù)系統(tǒng),修復(fù)損傷DNA。PARP-1的高表達(dá)可見于所有類型的乳腺癌[8-11],其中以在ER、PR或HER2陰性的乳腺癌中PARP-1的高表達(dá)更為明顯[12]。本研究結(jié)果顯示,PARP-1在三陰性乳腺癌細(xì)胞中陽性表達(dá)率為66.67%,在非三陰乳腺癌細(xì)胞中的陽性表達(dá)率為13.34%,兩組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。血清Ca153水平常在乳腺癌中過度表達(dá),被公認(rèn)為乳腺癌較為特異的腫瘤標(biāo)志物[13]。CEA常用于乳腺癌、肺癌、消化道腫瘤和胰腺癌等輔助診斷,因?yàn)樗且环N非特異性的腫瘤標(biāo)志物,所以常常與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測[14],還有文獻(xiàn)表示CEA對乳腺癌的診斷治療、療效和預(yù)后的觀察有一定意義[15]。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),在三陰乳腺癌細(xì)胞中PARP-1與Ca153和CEA均呈正相關(guān)(r分別為0.52、0.26,P<0.05),說明PARP-1可用于乳腺癌特別是三陰乳腺癌的診治和預(yù)后判斷中。

    綜上所述,PARP-1在三陰乳腺癌細(xì)胞中高表達(dá)且與Ca153和CEA的表達(dá)均呈正相關(guān)。

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