PM 2.5對過敏性哮喘小鼠氣道炎癥反應(yīng)及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響

張 雷， 冉 琴， 王 星， 李國平

哮喘是一種以可逆性氣道阻塞和氣道高反應(yīng)(airway hyperresponsivenes，AHR)為特點的慢性炎癥性疾病。全球有3.34億人深受其害，哮喘患病率每年以1%的速度增加[1]，在兒童和青少年中尤為顯著?？諝鈩恿χ睆?2.5 μm的顆粒物，也稱為人肺可吸入顆粒物，對呼吸系統(tǒng)的危害極其嚴(yán)重，是造成煙霧污染并引起呼吸道疾病的主要污染物[2-3]。調(diào)查顯示，北京的最高日平均PM 2.5濃度是500 μg/m3，高于世界衛(wèi)生組織建議值的20倍[4]。PM 2.5的化學(xué)組成因地區(qū)及污染源的不同而差異較大，目前所知的主要組分包括：微生物成分如脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)、有機碳多環(huán)芳烴、微量元素、金屬離子、無機鹽等[5]。由于PM 2.5粒徑小、在空氣中滯留時間長，易避開氣管細(xì)胞纖毛等過濾機制進(jìn)入下呼吸道，故在哮喘病的發(fā)生和發(fā)展中起到重要作用。Zhou等研究發(fā)現(xiàn)，PM 2.5的暴露能誘導(dǎo)人氣道上皮細(xì)胞(human bronchial epithelial cells,HBE)發(fā)生氧化應(yīng)激、DNA鏈斷裂及凋亡[6]。Zhang等研究發(fā)現(xiàn)，PM 2.5通過誘導(dǎo)激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress，ERS)和自噬，對斑馬魚的發(fā)育有嚴(yán)重毒害作用[7]。So等在哮喘模型中發(fā)現(xiàn)激活核因子(nuclear factor,NF)-κB信號通路能誘導(dǎo)ERS的發(fā)生，導(dǎo)致展開和(或)錯誤折疊蛋白質(zhì)在ER的累積，干擾蛋白質(zhì)合成和分泌，誘導(dǎo)活性氧生成，并增加炎癥的發(fā)生[8]。ERS與哮喘炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、黏液高分泌都有密切關(guān)系[9]。現(xiàn)有的研究顯示，PM 2.5能夠誘導(dǎo)ERS，促進(jìn)炎癥反應(yīng)，對支氣管上皮細(xì)胞造成損害。本研究擬采用OVA建立小鼠過敏性哮喘模型，模擬人類吸入PM 2.5的方式，探討空氣污染顆粒PM 2.5對哮喘小鼠ERS、炎癥及AH的影響。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1動物 SPF級6～8周齡雌性C57BL/6J小鼠24只，體質(zhì)量(20±2) g[重慶騰鑫科技公司，許可證號：SCXK(渝)2017-0001]。分籠飼養(yǎng)于恒溫(23 ℃)恒濕(相對濕度50%～70%)的清潔級西南醫(yī)科大學(xué)實驗動物房中，12 h光照循環(huán)。

1.1.2試劑 卵清蛋白(ovalbumin，OVA，批號：326A0519，北京索萊寶科技有限公司);氫氧化鋁[Al(OH)3，批號：20120901，成都科龍化學(xué)品有限公司];乙酰甲膽堿(methacholine,Mch，批號：108K1232，美國Sigma-Aldrich公司);RNA simple Total RNA Kit總RNA提取試劑盒、RT SuperMix試劑盒和SYBR Green Realtime PCR Master Mix試劑盒均購自北京天根生化科技有限公司；IL-17和TNF-α引物由上海捷瑞生物工程有限公司合成;Mouse IL-17 Elisa 試劑盒(HTLV171101，北京安迪華泰科技有限公司);BCA蛋白濃度測定試劑盒(P0010，上海碧云天生物技術(shù)有限公司);β-actin鼠單克隆抗體(sc-130656，美國Santa Cruz公司);GRP78鼠多克隆抗體(批號：ab21685，美國Abcam公司);CHOP鼠多克隆抗體(批號：ab11419，美國Abcam公司);IRE1兔多克隆抗體(批號：ab37073，美國Abcam公司);磷酸化IRE1兔多克隆抗體(批號：ab48187，美國Abcam公司)。

1.1.3儀器 實時熒光定量PCR儀(LightCycler480 Ⅱ，瑞士Roche公司);無創(chuàng)肺功能檢測系統(tǒng)(MaxⅠ 1420，美國 Buxco公司);凝膠成像系統(tǒng)(美國BIO-RAD公司)，電泳儀電轉(zhuǎn)移裝置(PS600，美國Hoefer公司);光學(xué)顯微鏡(DM4000B，美國Leica);全波長酶標(biāo)儀(MD Spetramax Plus384，美國Molecular Devices公司)。

1.2方法

1.2.1PM 2.5的收集和制備 2017年8-12月于人口密集、附近無工業(yè)污染的北京市區(qū)采集大氣PM 2.5樣品，粒徑≤2.5 μm，樣品收集于石英纖維濾膜上，采樣前和采樣后恒溫干燥24 h。將載有樣品的濾膜剪成3 cm×4 cm大小，浸泡于MilliQ水中，超聲震蕩洗脫3次，每次30 min。以6層醫(yī)用紗布對洗脫液進(jìn)行過濾2次，濾液經(jīng)真空冷凍干燥后收集于密閉玻璃容器中-80 ℃凍存。使用前用PBS配成10 mg/mL濃度顆粒物懸液，臨用前超聲振蕩處理10 min，125 ℃高溫滅菌。

1.2.2哮喘小鼠模型的建立及處理 將24只小鼠按隨機數(shù)字表法分為陰性對照組(PBS組)、哮喘對照組(OVA組)、PM 2.5處理組(PM 2.5組)及哮喘小鼠吸入PM 2.5處理組(OVA+PM 2.5組)，每組6只。第0，7及14天，OVA組和OVA+PM 2.5組于腹腔注射0.2 mL致敏液[含25 μg OVA、1 mg Al(OH)3溶于0.2 mL PBS]致敏，PBS組和PM 2.5組腹腔注射PBS作為對照；第15～21天，OVA組和OVA+PM 2.5組小鼠用20 mg/kg戊巴比妥鈉淺麻醉后，予1 μg/μL OVA溶液50 μL滴鼻激發(fā)，OVA+PM 2.5組激發(fā)前經(jīng)鼻滴入100 μg/mL濃度的PM 2.5混懸液30 μL，PM 2.5組滴入等量PM 2.5混懸液，PBS組滴PBS作為對照，每日1次。末次激發(fā)待小鼠蘇醒后，各組小鼠檢測AHR。24 h后經(jīng)腹腔注射 50 mg/kg戊巴比妥鈉麻醉，右肺上葉用10%甲醛溶液固定后做病理切片。余肺迅速過液氮后保存于-70 ℃冰箱備用。

1.2.3小鼠無創(chuàng)肺功能檢測 用Mch依次按0，6.25，12.5，25，50 mg/mL濃度霧化，經(jīng)過小鼠無創(chuàng)肺功能系統(tǒng)，霧化時間1 min，反應(yīng)時間3 min，對小鼠進(jìn)行AHR測定。取每個濃度下反應(yīng)時間增強呼氣間歇(enchanced pause, Penh)均值作為評價AHR的指標(biāo)。Penh與經(jīng)典肺功能檢測具有高度相關(guān)性[10]，Penh=PEF/PIF(PEF為呼氣流速峰值，PIF為吸氣流速峰值)。Penh被證明與Mch刺激下的小鼠肺阻力和非動態(tài)順應(yīng)性相關(guān)，可有效檢測哮喘小鼠AHR[11]。

1.2.4肺組織蘇木精-伊紅(H-E)和過碘酸雪夫(periodic acid-schiff,PAS)染色 10%甲醛溶液浸泡固定組織24 h后，經(jīng)酒精脫水，石蠟包埋，常規(guī)H-E染色和PAS染色。200倍光學(xué)顯微鏡下觀察肺氣道、肺泡壁厚度和炎細(xì)胞浸潤等病理變化及杯狀細(xì)胞分布和黏液分泌情況,并計數(shù)杯狀細(xì)胞占?xì)獾郎掀ぜ?xì)胞的百分比和肺組織炎癥評分，炎癥評分標(biāo)準(zhǔn)：0分表示氣道及血管周圍無炎細(xì)胞；1分表示氣道和血管周圍一層炎細(xì)胞；2分表示氣道和血管周圍2層炎細(xì)胞，4分表示氣道和血管周圍4層炎細(xì)胞；5分表示氣道和血管周圍5層及以上炎細(xì)胞。

1.2.5肺泡灌洗及細(xì)胞分類計數(shù) 小鼠麻醉后，頸部分離出氣管，暴露胸腔，結(jié)扎左肺，用1 mL的注射器抽取0.5 mL冷PBS經(jīng)氣管緩慢注入左肺，反復(fù)抽吸3次后回收BAL(回收率>80%)。將BALF 離心(4 ℃，1 500 r/min，8 min)，棄上清液，重懸沉淀進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)，H-E染色后鏡下計數(shù)BALF中性粒細(xì)胞密度和嗜酸性粒細(xì)胞(eosinophils，EOS)。

1.2.6ELISA法檢測BALF中IL-17的含量 留取BALF，參照試劑盒說明書檢測和計算BALF中IL-17的含量。

1.2.7總RNA提取與mRNA檢測 熒光定量聚合酶聯(lián)反應(yīng)檢測肺組織IL-17和TNF-α的mRNA表達(dá)。液氮中研磨肺組織，用RNA simple Total RNA Kit總RNA提取試劑盒提取總RNA，RTSuperMix試劑盒進(jìn)行RNA逆轉(zhuǎn)錄，合成cDNA。根據(jù)目的基因及擴增條件進(jìn)行擴增(表1)：

表1 引物序列

以GAPDH為管家基因，參照SYBR Green Realtime PCR Master Mix試劑盒說明進(jìn)行PCR擴增。PCR反應(yīng)體系共20 μL，反應(yīng)條件：95 ℃預(yù)變性5 min→95 ℃變性10 s→57 ℃退火30 s→擴增45個循環(huán)→72 ℃延伸10 min。收集SYBR Green熒光信號，獲取各組Ct值:

ΔCt=Ct目的基因- Ct管家基因

ΔΔCt=ΔCt實驗組-ΔCt對照組

采用2-ΔΔCt法計算各目的基因mRNA相對表達(dá)量。

1.2.8Western-blot檢測蛋白表達(dá)量 液氮中充分研磨肺組織，加入裂解液，混勻，冰上裂解30 min，4 ℃離心15 min，12 000 r/min。取上清，BCA法蛋白質(zhì)定量，每孔30 μg蛋白樣品進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳并轉(zhuǎn)印至PVDF膜，經(jīng)封閉，加入抗體GRP78，CHOP，IRE，p-IRE，β-αctin和GAPDH(1∶2 000)，4 ℃孵育過夜，TBST洗膜，二抗室溫孵育2 h，TBST洗膜，顯影。Bio-Rad系統(tǒng)測定蛋白條帶灰度。

2 結(jié) 果

2.1H-E染色和PAS染色觀察 OVA組支氣管壁及周圍見中等數(shù)量的炎性細(xì)胞浸潤，管壁輕微增厚，管腔內(nèi)可見炎性細(xì)胞滲出，可見杯狀細(xì)胞增生及糖原分泌；PM 2.5+OVA組支氣管壁及周圍炎性細(xì)胞浸潤較OVA組明顯增多，管腔內(nèi)有大量炎性細(xì)胞滲出，管壁重度增厚(圖1A)，大量纖維化及杯狀細(xì)胞增生(圖2A)。PBS組和PM 2.5組見極少量炎癥細(xì)胞浸潤，支氣管壁未見增厚，偶見少量杯狀細(xì)胞。與OVA組比較，OVA+PM 2.5組肺組織炎癥評分升高(P<0.001，圖1B)，杯狀細(xì)胞占?xì)獾郎掀ぜ?xì)胞百分比顯著增加(P<0.05，圖2B)。

A：肺組織蘇木精-伊紅染色， B：肺組織炎癥評分柱狀圖. PBS：磷酸鹽緩沖液； OVA：卵清蛋白； PM 2.5：空氣污染細(xì)顆粒物. PBS組：陰性對照組；OVA組：哮喘對照組；PM 2.5組：單純吸入PM 2.5對照組；OVA+PM 2.5組：哮喘小鼠吸入PM 2.5處理組. 與PBS組比較，☆：P<0.001；與OVA組比較，#：P<0.001.圖1 小鼠肺組織H-E染色觀察及炎癥評分( ×200)Fig 1 H-E staining observation and inflammatory score of lung tissue in mice( ×200)

A：氣道過碘酸雪夫染色； B：杯狀細(xì)胞占?xì)獾郎掀ぜ?xì)胞百分比柱狀圖. PBS：磷酸鹽緩沖液； OVA：卵清蛋白； PM 2.5：空氣污染細(xì)顆粒物. PBS組：陰性對照組； OVA組：哮喘模型組； PM 2.5組：單純吸入PM 2.5組； OVA+PM 2.5組：哮喘小鼠吸入PM 2.5處理組. 與PBS組比較，☆：P<0.05；與OVA組比較，#：P<0.05.圖2 小鼠氣道PAS染色觀察及杯狀細(xì)胞百分比( ×200)Fig 2 PAS staining observation and Globlet cells of the mice airway( ×200)

2.2小鼠肺功能的Penh值 OVA組和OVA+PM 2.5組的Penh值在Mch=12.5 mg/mL時逐漸升高，與PBS組和PM 2.5組差距逐漸增大(圖3A)。在Mch=50 mg/mL濃度下，OVA組的Penh值較PBS組顯著增高(P<0.05)；OVA+PM 2.5組的Penh值較OVA組和PM 2.5組增高，差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(圖3B)；PBS組與PM 2.5組間差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

A：各組氣道高反應(yīng)趨勢圖； B：Mch=50 mg/mL時AHR柱狀圖. Penh：增強呼氣間歇值； AHR：氣道高反應(yīng)； Mch：乙酰甲膽堿； PBS：磷酸鹽緩沖液； OVA：卵清蛋白； PM 2.5：空氣污染細(xì)顆粒物. PBS組：陰性對照組； OVA組：哮喘模型組； PM 2.5組：單純吸入PM 2.5組； OVA+PM 2.5組：哮喘小鼠吸入PM 2.5處理組. 與PBS組比較，☆：P<0.05；與OVA組比較，#：P<0.05.圖3 吸入PM 2.5對哮喘小鼠肺功能Penh值的影響Fig 3 Effects of inhalation PM 2.5 on lung function Penh value in asthmatic mice

2.3BALF中炎性細(xì)胞計數(shù)及分類 與PBS組比較，OVA組EOS顯著升高(P<0.05)。OVA+PM 2.5組與OVA組比較，EOS升高，中性粒細(xì)胞升高(P<0.05，表2)；PBS組與PM 2.5組比較，細(xì)胞總數(shù)、EOS、中性粒細(xì)胞差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

2.4細(xì)胞因子IL-17和TNF-α mRNA表達(dá) 實時熒光定量PCR結(jié)果顯示，OVA+PM 2.5組的IL-17 mRNA表達(dá)量較OVA組升高明顯(P<0.05)，較PM 2.5組增高(P<0.05)；OVA+PM 2.5組TNF-α的mRNA表達(dá)量較PM 2.5組升高(P<0.05，表3)，OVA組與PM 2.5組差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

表2各組小鼠肺泡灌洗液中細(xì)胞分類計數(shù)比較

Tab 2 Comparison of the cell classification count in the alveolar lavage of mice ×104

PBS：磷酸鹽緩沖液； OVA：卵清蛋白； PM 2.5：空氣污染細(xì)顆粒物. PBS組：陰性對照組； OVA組：哮喘模型組； PM 2.5組：單純吸入PM 2.5組； OVA+PM 2.5組：哮喘小鼠吸入PM 2.5處理組. 與PBS組比較，☆：P<0.05； 與OVA組比較，#：P<0.05； 與PM 2.5組比較，△：P<0.05.

表3各組小鼠細(xì)胞因子IL-17和TNF-α mRNA表達(dá)

Tab3Expression of cytokines IL-17 and TNF-α mRNA in each group of mice

分 組IL-17TNF-αPBS11OVA3.09±0.914.40±0.98PM 2.52.00±1.112.66±0.65OVA+PM 2.57.59±1.29# △9.29±2.16△

IL-17：白細(xì)胞介素-17； TNF-α：腫瘤壞死因子-α； PBS：磷酸鹽緩沖液； OVA：卵清蛋白； PM 2.5：空氣污染細(xì)顆粒物. PBS組：陰性對照組； OVA組：哮喘模型組； PM 2.5組：單純吸入PM 2.5組； OVA+PM 2.5組：哮喘小鼠吸入PM 2.5處理組. 與OVA組比較，#：P<0.05；與PM 2.5組比較，△：P<0.05.

2.5肺泡灌洗上清液中IL-17的含量 PBS，OVA，PM 2.5及OVA+PM 2.5組的IL-17分別為(2.76±0.02)，(4.31±0.38)，(2.80±0.15)及(6.03±0.31) pg/mL。OVA組與PBS組比較，BALF中細(xì)胞因子IL-17含量升高(P<0.05)；OVA+PM 2.5組與OVA組比較，IL-17含量升高，差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.6內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白GRP78,p-IRE和CHOP的蛋白表達(dá)量 在哮喘模型小鼠中，ERS相關(guān)蛋白CHOP,GRP78和p-IRE表達(dá)量均增加。與OVA組比較，OVA+PM 2.5組的CHOP,GRP78和p-IRE表達(dá)量均顯著增加(P<0.05)。與PBS組比較，OVA組的CHOP增高，差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

A：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白電泳條帶； B：CHOP與β-actin、BIP與β-actin及p-IRE1與IRE1比值柱狀圖. CHOP：CCAAT/增強子結(jié)合蛋白同源蛋白； GRP78：葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白； IRE1：肌醇必需酶1； p-IRE1：磷酸化肌醇必需酶1； β-actin：β-肌動蛋白； GAPDH：甘油醛-3-磷酸脫氫酶； PBS：磷酸鹽緩沖液； OVA：卵清蛋白； PM 2.5：空氣污染細(xì)顆粒物. PBS組：陰性對照組； OVA組：哮喘模型組； PM 2.5組：單純吸入PM 2.5組； OVA+PM 2.5組：哮喘小鼠吸入PM 2.5處理組. 與PBS組比較，☆：P<0.05； 與OVA組比較，#：P<0.05.圖4 Western-blot分析吸入PM 2.5對哮喘小鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白CHOP，GRP78和p-IRE1表達(dá)的影響Fig 4 Western-blot analyzed the effects of inhaled PM 2.5 on the expression of endoplasmic reticulum stress related protein CHOP, GRP78and p-IRE1 in mice with asthma

3 討 論

支氣管哮喘是由多種細(xì)胞(如EOS、肥大細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞等)和細(xì)胞組分參與的一種以AHR和氣道慢性炎癥為特征的變態(tài)反應(yīng)性疾病。本研究病理結(jié)果顯示，哮喘小鼠出現(xiàn)小支氣管黏膜上皮內(nèi)杯狀細(xì)胞明顯增生，黏膜的基底膜增厚，支氣管黏膜水腫，管壁周圍組織及肺間質(zhì)有炎性細(xì)胞浸潤，大量炎性細(xì)胞浸潤沖斷黏膜肌層，杯狀細(xì)胞明顯增生等改變。吸入PM 2.5能夠加重OVA誘導(dǎo)的哮喘小鼠氣道損害，說明PM 2.5會加重氣道炎癥和破壞氣道結(jié)構(gòu)，增加黏液分泌。多種免疫細(xì)胞和細(xì)胞因子參與哮喘發(fā)病機制，其中CD4+T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫調(diào)節(jié)失衡在哮喘的氣道炎癥中發(fā)揮重要的作用[12]。當(dāng)CD4+T細(xì)胞被抗原激活后，通過多種途徑分化成具有不同生物學(xué)功能的細(xì)胞亞群，包括輔助性T2細(xì)胞(helperT cell 2，Th2)和產(chǎn)生IL-17的Th 17細(xì)胞[13]。研究發(fā)現(xiàn)，哮喘患者的外周血Th1/Th2、Th17/調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞(Treg)比例失衡，且中重度哮喘患者的Th17細(xì)胞應(yīng)答增強[14]。Rhonda等在大鼠模型中研究發(fā)現(xiàn)，單獨IL-17免疫應(yīng)答或單獨Th2免疫應(yīng)答均不能引起大鼠的AHR，但在Th2和Th17免疫反應(yīng)共同作用下，大鼠出現(xiàn)了氣道EOS、中性粒細(xì)胞浸潤，并發(fā)生AHR[15]。本研究結(jié)果顯示，吸入PM 2.5的重癥哮喘小鼠IL-17表達(dá)量明顯增高，AHR增強。筆者推斷，PM 2.5加重哮喘氣道炎癥，誘導(dǎo)炎性細(xì)胞浸潤，加重AHR，可能與IL-17相關(guān)的Th17免疫狀態(tài)有關(guān)。

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是一種動態(tài)細(xì)胞器，確保細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)能在蛋白質(zhì)翻譯或折疊及炎癥和細(xì)胞凋亡過程中建立。氧化應(yīng)激、病原體感染和過敏原暴露等刺激能引起ERS，并激活UPR誘導(dǎo)不同的炎癥反應(yīng)和先天免疫功能失衡，導(dǎo)致哮喘狀況的惡化[16]。Lee等研究發(fā)現(xiàn)，HDM能誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞發(fā)生ERS/UPR，ER分子伴侶BIP，GRP94和ERP57表達(dá)量升高[17]。PM 2.5也可激活ERS，從而損害斑馬魚的生育功能[7]。本研究結(jié)果顯示，吸入PM 2.5的哮喘小鼠炎癥更加嚴(yán)重，肺組織中ERS標(biāo)志蛋白GRP78和CHOP表達(dá)顯著增加，在ERS/UPR信號通路中磷酸化IRE1顯著增多，黏液分泌增加，氣道反應(yīng)性升高。Kim等在LPS+OVA聯(lián)合致敏小鼠哮喘模型中，發(fā)現(xiàn)肺組織中大量炎癥細(xì)胞浸潤，BALF中IFN-γ，IL-4，IL-5，IL-13和IL-17等炎癥因子增多，肺組織中ERS/UPR標(biāo)志物：BIP，CHOP，ATF6α，XBP1等表達(dá)量增加。炎癥細(xì)胞因子誘導(dǎo)ERS，進(jìn)而又促進(jìn)炎癥的發(fā)生[8]。Castaeda研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)顆粒物PM 2.5通過誘導(dǎo)哮喘小鼠氧化應(yīng)激，增強肺組織的過敏性炎癥反應(yīng)[18]。從以上研究筆者推斷，PM 2.5能激活ERS，加重哮喘發(fā)作時炎癥反應(yīng)，其機制可能是PM 2.5進(jìn)入肺組織后加重炎癥細(xì)胞浸潤，炎癥因子分泌增加，誘導(dǎo)IRE磷酸化，激活ERS，進(jìn)而又促進(jìn)炎癥反應(yīng)。

空氣污染顆粒PM 2.5可引起哮喘狀態(tài)下氣道上皮強烈的炎癥反應(yīng)，而炎癥過程中產(chǎn)生的細(xì)胞因子是引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中蛋白折疊錯誤和ERS誘發(fā)凋亡的原因之一。因此筆者推測，PM 2.5可能通過炎癥因子引起氣道上皮細(xì)胞發(fā)生ERS，促進(jìn)氣道黏液分泌，加重AHR，從而在哮喘急性發(fā)作中發(fā)揮重要作用。ERS在吸入PM 2.5加重哮喘的作用及其分子機制尚需進(jìn)一步研究，其結(jié)果將為尋找以ERS為靶點的預(yù)防哮喘急性發(fā)作治療措施提供理論和實驗依據(jù)。