條紋鋸鮨幼魚維生素C需要量

趙亭亭 陳 超 邵彥翔 張清雯 劉 玲

(1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所，青島266071；2.上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，上海201306)

維生素C(vitamin C)也被稱為抗壞血酸，是具水溶性的有機營養(yǎng)分子。在自然界中，大部分維生素C以還原形式存在，這種還原形式的抗壞血酸在動物體內(nèi)具有促進(jìn)鐵元素吸收、增強機體免疫力的作用，另外它還是脯氨酸羥化酶和賴氨酸羥化酶的輔酶，因此是魚類和哺乳動物合成組織膠原蛋白不可缺少的物質(zhì)。已有報道表明，維生素C不僅能夠加快魚體的生長發(fā)育，還可以調(diào)節(jié)經(jīng)濟(jì)魚類由于溫度和光照變化、運輸以及疾病等產(chǎn)生的應(yīng)激狀態(tài)，提高機體抗病力和免疫性[1-2]。但是，除少數(shù)軟骨魚類具有合成維生素C的能力外，硬骨魚類由于缺乏合成抗壞血酸的酶導(dǎo)致無法自給自足而必須從食物中攝取[3-4]，因此飼料中維生素C的作用尤為重要。魚類維生素C需求量受多種因素影響，如魚的種類、魚的規(guī)格、生存環(huán)境、應(yīng)激狀態(tài)以及維生素C劑型的不同等。魚體若缺乏維生素C則會出現(xiàn)一系列的癥狀，如厭食、游泳緩慢、影響正常生長發(fā)育、脊柱彎曲、內(nèi)臟出血、魚鰭潰爛與死亡率升高等病癥，影響生產(chǎn)效率，降低經(jīng)濟(jì)效益。

條紋鋸鮨(Centropristisstriata)俗稱美洲黑石斑，常簡稱為黑石斑，屬廣溫、廣鹽性魚類，因其體色艷麗、體態(tài)優(yōu)美、生長速度快、適應(yīng)性與抗病力強、成活率高、營養(yǎng)豐富、加工方便等諸多優(yōu)點，深得美國和加拿大廣大消費者的喜愛，市場供不應(yīng)求。我國山東省于2002年引入條紋鋸鮨[5]，于2006年馴化及人工繁育成功[6]。近年來，條紋鋸鮨育苗與人工養(yǎng)殖技術(shù)的逐漸成熟，為其養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的興起與壯大奠定了基礎(chǔ)。但對條紋鋸鮨配合飼料的研究，國內(nèi)僅見林星[7]、邱金海[8]對其飼料蛋白質(zhì)水平和能蛋比的報道。國外Anderson等[9]報道了用棉籽粉蛋白成功替代魚粉蛋白以降低養(yǎng)殖成本；Alam等[10-11]研究了條紋鋸鮨幼魚生長性能最佳時適宜的飼料蛋白質(zhì)水平以及飼料中添加不同水平的海鹽對其生長和存活的影響。至今未見有關(guān)條紋鋸鮨幼魚對維生素C需要量的研究報道。因此，本試驗通過在飼料中添加不同水平的維生素C，研究維生素C對條紋鋸鮨幼魚生長、免疫、組織維生素C積累量及肌肉成分的影響，為條紋鋸鮨配合飼料中適宜維生素C的添加提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料制備

試驗飼料以魚粉、酪蛋白、豆粕為蛋白質(zhì)源，以魚油和豆油為脂肪源，配制7種等氮等能飼料，每組飼料中維生素C添加量分別為0(對照組)、50、150、300、600、1 200和2 400 mg/kg(維生素C純量，非維生素磷酸酯量)，維生素C的添加形式為維生素C單磷酸酯(有效含量為35%)。試驗飼料組成及營養(yǎng)水平見表1。微量成分按照逐級擴(kuò)大法混均，豆粕、膽堿等經(jīng)粉碎后過80目篩，各組分按配比稱量后混和，所有組分混和后置于攪拌機中充分混勻，后經(jīng)制粒機制成粒徑為5 mm的圓形顆粒。置烘干機50 ℃下烘干后于-20 ℃下冷藏備用。制成飼料送青島科普研發(fā)技術(shù)中心有限公司利用高效液相色譜法檢測各組飼料的維生素C含量，實測值分別為10.97(對照組)、74.03、148.33、213.64、335.33、618.88和910.98 mg/kg。

表1 試驗飼料組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

續(xù)表1項目Items飼料維生素C含量 Dietary vitamin C content/(mg/kg)10.9774.03148.33213.64335.33618.88910.98磷酸二氫鈣 Ca(H2PO4)22.000 02.000 02.000 02.000 02.000 02.000 02.000 0羧甲基纖維素 CMCC5.000 05.000 05.000 05.000 05.000 05.000 05.000 0氯化膽堿 Choline chloride1.000 01.000 01.000 01.000 01.000 01.000 01.000 0維生素預(yù)混料(不含維生素C) Vitamin premix (without vitamin C)1)1.000 01.000 01.000 01.000 01.000 01.000 01.000 0礦物質(zhì)預(yù)混料 Mineral premix2)1.000 01.000 01.000 01.000 01.000 01.000 01.000 0維生素C磷酸酯 Vitamin C phosphate0.014 30.042 90.085 70.171 40.342 90.685 7合計 Total100.000 0100.000 0100.000 0100.000 0100.000 0100.000 0100.000 0營養(yǎng)水平 Nutrient levels粗蛋白質(zhì) Crude protein44.744.244.944.844.944.844.8粗脂肪 Crude lipid6.16.16.36.15.95.96.1維生素C Vitamin C10.9774.03148.33213.64335.33618.88910.98

1)維生素預(yù)混料(不含維生素C)為每千克飼料提供 Vitamin premix (without vitamin C) provided the following per kg of diets：VB175 mg，VB2200 mg，葉酸 folic acid 20 mg，VB650 mg，煙酸 niacin 500 mg，泛酸鈣calcium pantothenate 300 mg，肌醇 inositol 1 000 mg，生物素 biotin 6 mg，VE 500 mg，VK 60 mg，VB121 mg，維生素A乙酸酯 vitamin A acetate 15 mg，VD 0.05 mg。

2)礦物質(zhì)混合物為每千克飼料提供 Mineral premix provided the following per kg of diets：FeSO4·H2O 8 g，CuSO4·5H2O 1 g，MnSO4·H2O 2 g，ZnSO4·7H2O 30 g，MgSO4·7H2O 150 g，CaI20.5 g，Na2SeSO40.04 g，COSO4·7H2O 0.1 g，KCl 70 g，沸石粉 zeolite powder 738.36 g。

1.2 試驗設(shè)計及養(yǎng)殖管理

試驗在日照某養(yǎng)殖場進(jìn)行。正式試驗開始前，試驗魚暫養(yǎng)于500 L圓形PE養(yǎng)殖桶內(nèi)，飽食投喂基礎(chǔ)飼料2周，使之適應(yīng)試驗環(huán)境與飼料。暫養(yǎng)結(jié)束后，魚體饑餓24 h，選取規(guī)格一致、體質(zhì)健壯、平均體重為(88.34±24.10) g的條紋鋸鮨幼魚630尾，隨機分為7組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)30尾魚。試驗魚為同一養(yǎng)殖環(huán)境中養(yǎng)殖的同一批健康的1齡條紋鋸鮨幼魚，隨機分配至21個500 L圓形PE養(yǎng)殖桶內(nèi)，組間初始平均體重?zé)o顯著差異(P>0.05)。養(yǎng)殖期間分別對應(yīng)投喂7組試驗飼料，每天飽食投喂2次(07:00和17:00)，記錄投飼量，投喂半小時后，吸除殘餌與糞便，統(tǒng)計記錄殘餌數(shù)，正式養(yǎng)殖試驗進(jìn)行8周。

試驗采用溢流水養(yǎng)殖方式，養(yǎng)殖期間定期測試水溫(18～24 ℃)、pH(6.8～7.3)、溶解氧濃度(6.24～7.08 mg/L)、鹽度(22～24)和氨氮濃度(0.45～0.63 mg/L)等水質(zhì)指標(biāo)，檢查試驗魚生長情況并觀察是否有魚出現(xiàn)缺乏維生素C的癥狀。

1.3 樣品采集

試驗結(jié)束后，魚體饑餓24 h，對各桶中的試驗魚進(jìn)行計數(shù)并測量體重體長，用于計算增重率(weight gain rate，WGR)、特定生長率(special growth rate，SGR)、肥滿度(condition factor，CF)和成活率(survival rate，SR)；統(tǒng)計每組投喂的飼料質(zhì)量，用于計算飼料系數(shù)(feed conversion ratio，F(xiàn)CR)和飼料的蛋白質(zhì)效率(protein efficiency ratio，PER)。

從每個養(yǎng)殖桶中隨機抽取5尾魚，用MS-222將魚體麻醉后，于尾部靜脈采血，4 ℃過夜，3 500 r/min離心10 min，取上清，用于檢測血清生化指標(biāo)、相關(guān)酶活性、抗氧化指標(biāo)及維生素C積累量；然后在冰盤上進(jìn)行解剖，依次分離出內(nèi)臟和肝臟，分別稱重，記錄數(shù)據(jù)，計算臟體比(viscerosomatic index，VSI)和肝體比(heaptosomatic index，HSI)；后取少量肝組織，用于檢測肝臟的抗氧化指標(biāo)和維生素C積累量；取少量背部肌肉，置于凍存管內(nèi)，用于肌肉抗氧化指標(biāo)和維生素C積累量的檢測，將剩余背部肌肉置于-20 ℃冰柜中備用，用于肌肉成分的測定。

1.4 指標(biāo)測定

1.4.1 生長性能、形體指標(biāo)與飼料利用相關(guān)公式

增重率(%)=100×[(平均末重-
平均初重)/平均初重]；
特定生長率(%/d)=100×(ln平均末重-
ln平均初重)/試驗天數(shù)；
成活率(%)=100×終末魚尾數(shù)/初始魚尾數(shù)；
肝體比(%)=100×肝臟重/體重；
臟體比(%)=100×內(nèi)臟重/體重；
肥滿度(g/cm3)=體重/體長3；
飼料系數(shù)=總干物質(zhì)攝食量/魚體總增重；
蛋白質(zhì)效率=(平均末重-平均初重)/
總飼料蛋白質(zhì)攝入量。

1.4.2 血清生化及組織抗氧化指標(biāo)

血清總蛋白含量和堿性磷酸酶活性的測定均采用微量酶標(biāo)法，甘油三酯和膽固醇含量的測定分別采用甘油三酯檢測試劑盒(GPO-PAP法)和總膽固醇檢測試劑盒(COD-PAP法)，利用比濁法測定血清溶菌酶的活性。血清、肝臟與肌肉組織中的超氧化物歧化酶(SOD)活性的測定采用羥胺法，可見光法測定過氧化氫酶(CAT)活性，總抗氧化能力(T-AOC)和維生素C積累量均通過比色法進(jìn)行測定，微板法測定谷草轉(zhuǎn)氨酶(GPT)及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活性和丙二醛(MDA)含量。以上所用試劑盒均購于南京建成生物工程研究所，試驗步驟嚴(yán)格按照說明書操作。

1.4.3 肌肉成分的測定

肌肉送青島科普研發(fā)技術(shù)中心有限公司進(jìn)行檢測。肌肉的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、水分、粗灰分含量分別采用凱氏定氮法、索氏抽提法、直接干燥法與馬弗爐550 ℃高溫灼燒法進(jìn)行測定，膠原蛋白含量采用羥脯氨酸法[12]進(jìn)行測定。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

采用SPSS 17.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，并用Duncan氏多重比較法分析各組間的差異性，P<0.05時為差異顯著。試驗數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)”表示。圖表處理及回歸方程計算用Excel 2007進(jìn)行統(tǒng)計。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚生長性能、形體指標(biāo)和飼料利用的影響

由表2可知，74.03 mg/kg組條紋鋸鮨幼魚的增重率和特定生長率顯著高于10.97、618.88和910.98 mg/kg組(P<0.05)，與其他各組間無顯著差異(P>0.05)。當(dāng)飼料維生素C含量從74.03 mg/kg增加到910.98 mg/kg時，條紋鋸鮨幼魚的增重率和特定生長率均開始呈現(xiàn)下降趨勢，飼料中維生素C添加量達(dá)到910.98 mg/kg時，開始抑制其生長。飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚的存活率無顯著影響(P>0.05)。

74.03 mg/kg組條紋鋸鮨幼魚的飼料系數(shù)顯著低于10.97和910.98 mg/kg組(P<0.05)，618.88 mg/kg組的飼料系數(shù)顯著低于910.98 mg/kg組(P<0.05)，剩余各組間的飼料系數(shù)差異不顯著(P>0.05)。10.97和910.98 mg/kg組條紋鋸鮨幼魚的蛋白質(zhì)效率顯著低于74.03和618.88 mg/kg組(P<0.05)。335.33 mg/kg組條紋鋸鮨幼魚的肥滿度顯著低于74.03、148.33和213.64 mg/kg組(P<0.05)，且與10.97、618.88和910.98 mg/kg組差異不顯著(P>0.05)。飼料維生素C含量對魚體的肝體比無顯著影響(P>0.05)。74.03 mg/kg組條紋鋸鮨幼魚的臟體比顯著高于910.98 mg/kg組(P<0.05)，與其他各組無顯著差異(P>0.05)。

由圖1可見，以飼料維生素C含量與特定生長率做折線回歸模型可得：Y=0.005 4X+0.760 9 (R2=1.000 0)和Y=-0.000 5X+1.154 2(R2=0.947 8)，2條直線相交點即為條紋鋸鮨幼魚特定生長率最大時飼料維生素C含量，即維生素C需要量為66.66 mg/kg。

2.2 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚血清生化指標(biāo)的影響

由表3可知，10.97、74.03 mg/kg組血清總蛋白含量顯著低于其他各組(P<0.05)，其他各組之間無顯著差異(P>0.05)。618.88和910.98 mg/kg組血清甘油三酯含量顯著低于其他各組(P<0.05)。10.97 mg/kg組血清溶菌酶活性顯著低于213.64、335.33、618.88、910.98 mg/kg組(P<0.05)。飼料維生素C含量對血清總膽固醇含量及堿性磷酸酶活性無顯著影響(P>0.05)。

由圖2可見，以飼料維生素C含量與血清溶菌酶活性做折線回歸模型可得：Y=0.236 5X+43.694 (R2=0.893 8)和Y=-0.054 7X+144.19 (R2=1.000 0)，2條直線相交點即為條紋鋸鮨幼魚血清溶菌酶活性最高時飼料維生素C含量，即維生素C需要量為345.11 mg/kg。

表2 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚生長性能、形體指標(biāo)和飼料利用的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

圖1 飼料維生素C含量與條紋鋸鮨幼魚

2.3 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表4可知，血清SOD活性和T-AOC均隨著飼料維生素C含量的升高呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢，血清MDA含量呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢。335.33 mg/kg組血清SOD活性最高，顯著高于10.97、74.03、910.98 mg/kg組(P<0.05)；

335.33 mg/kg組血清T-AOC最高，顯著高于10.97、618.88、910.98 mg/kg組(P<0.05)；335.33 mg/kg組血清MDA含量最低，顯著低于10.97 mg/kg組(P<0.05)。飼料維生素C含量對血清CAT活性無顯著影響(P>0.05)。

由此可見，飼料維生素C含量為335.33 mg/kg時，對提高條紋鋸鮨幼魚血清抗氧化指標(biāo)的效果最好。

2.4 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

由表5可知，335.33 mg/kg組肝臟SOD和CAT活性最高，MDA含量最低。飼料維生素C含量對肝臟T-AOC無顯著影響(P>0.05)。10.97 mg/kg組肝臟SOD和CAT活性顯著低于其他各組(P<0.05)。148.33、335.33和910.98 mg/kg組肝臟MDA含量顯著低于10.97 mg/kg(P<0.05)。

由此可見，飼料維生素C含量為335.33 mg/kg時，可顯著增強條紋鋸鮨幼魚肝臟的抗氧化能力。

表3 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚血清生化指標(biāo)的影響

圖2 飼料維生素C含量與條紋鋸鮨幼魚

2.5 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚肌肉抗氧化指標(biāo)的影響

由表6可知，飼料維生素C含量對肌肉CAT活性和MDA含量無顯著影響(P>0.05)。74.03 mg/kg組肌肉SOD活性和T-AOC均顯著高于其他各組(P<0.05)。

由此可見，飼料維生素C含量為74.03 mg/kg時，可有效增強肌肉的抗氧化能力。

2.6 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚血清及肝臟GOT和GPT活性的影響

由表7可知，213.64、335.33、618.88、910.98 mg/kg組血清GOT活性顯著低于10.97 mg/kg組(P<0.05)。肝臟GOT活性隨著飼料維生素C含量的增加呈先上升后降低趨勢，10.97 mg/kg組顯著低于其他各組(P<0.05)，在335.33 mg/kg組達(dá)最高。10.97、74.03 mg/kg組血清GPT活性顯著高于其他各組(P<0.05)，其他各組之間差異不顯著(P>0.05)。飼料維生素C含量對肝臟GPT活性無顯著影響(P>0.05)。

2.7 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚血清、肝臟和肌肉中維生素C積累量的影響

由表8可知，血清中維生素C積累量隨著飼料維生素C含量的增加不斷升高，910.98 mg/kg組血清中維生素C積累量達(dá)到最高，顯著高于其他各組(P<0.05)。肝臟中維生素C積累量也是隨著飼料維生素C含量的升高而升高，910.98 mg/kg組肝臟中維生素C積累量最高，并且顯著高于10.97、74.03、148.33和213.64 mg/kg組(P<0.05)，與335.33、618.88 mg/kg組差異不顯著(P>0.05)。肌肉中維生素C積累量隨著飼料維生素C含量的升高而增加，618.88 mg/kg組的肌肉中維生素C積累量最高，顯著高于10.97、74.03、148.33和213.64 mg/kg組(P<0.05)，與335.33、618.88 mg/kg組差異不顯著(P>0.05)。

條紋鋸鮨幼魚肝臟中維生素C積累量是3個組織中最高的。由圖3可見，以飼料維生素C含量與肝臟中維生素C積累量做折線回歸模型可得：Y=0.058 5X+7.5367 (R2=0.996 7)和Y=-0.001 7X+25.141 (R2=1.000 0)，2條直線相交點即為條紋鋸鮨幼魚肝臟中維生素C積累量最高時飼料維生素C含量，即維生素C需要量為309.93 mg/kg。

表4 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚血清抗氧化指標(biāo)的影響

表5 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

表6 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚肌肉抗氧化指標(biāo)的影響

表7 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚血清及肝臟GOT和GPT活性的影響

表8 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚血清、肝臟和肌肉中維生素C積累量的影響

2.8 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚肌肉成分的影響

由表9可知，飼料維生素C含量對肌肉粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量均無顯著影響(P>0.05)。74.03mg/kg組肌肉水分含量顯著低于10.97、148.33和213.64 mg/kg組(P<0.05)。肌肉膠原蛋白含量隨著飼料維生素C含量的升高而增加，910.98 mg/kg組肌肉膠原蛋白含量最高，顯著高于其他各組(P<0.05)。

圖3 飼料維生素C含量與條紋鋸鮨幼魚肝臟中

3 討 論

3.1 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚生長性能及血清生化指標(biāo)的影響

本研究結(jié)果表明，飼料中添加一定含量的維生素C對條紋鋸鮨幼魚具有顯著的促生長作用，但維生素C含量過高(910.98 mg/kg)時不再促進(jìn)條紋鋸鮨的生長，反而出現(xiàn)抑制生長現(xiàn)象。這一結(jié)果同周歧存等[13]對點帶石斑魚(Epinephelus

coioides)、Shiau等[14]對雜交羅非魚(Oreochromisniloticus×O.aureus)的研究結(jié)果一致。對飼料維生素C含量及條紋鋸鮨幼魚特定生長率之間進(jìn)行折線模型回歸分析可知，條紋鋸鮨幼魚飼料中維生素C的適宜含量為66.66 mg/kg，與胡毅等[15]對青魚(Mylopharyngodonpieceus)的研究結(jié)果(63 mg/kg)基本一致。在試驗過程中，對照組魚體并未出現(xiàn)鰭條潰爛、脊柱彎曲、內(nèi)部出血、死亡率增加等維生素C缺乏癥，這可能因為對照組飼料含有一定量的維生素C(10.97 mg/kg)，也可能是由于試驗魚體較大，對維生素C缺乏不夠敏感所致。另外，Lee等[16]對許氏平鮋(Sebastesschlegeli)的研究表明，對魚體投喂不含維生素C的飼料12～16周后，魚體才會出現(xiàn)維生素C缺乏癥，因此維生素C缺乏是否能引起條紋鋸鮨幼魚出現(xiàn)維生素C缺乏癥，需要進(jìn)一步延長養(yǎng)殖周期才能得以證明。本試驗中，各組間條紋鋸鮨的生長性能雖有差異，但總體生長效果一般，增重率較低，猜測是由試驗魚體規(guī)格較大導(dǎo)致。因此，建議在后續(xù)的研究工作中盡量采用規(guī)格較小的試驗魚以獲得更佳的試驗效果。

表9 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚肌肉成分的影響

堿性磷酸酶是生物體內(nèi)關(guān)鍵的代謝調(diào)控酶，可以直接參與磷酸基團(tuán)的運輸和鈣磷代謝，在魚體對營養(yǎng)成分的吸收與利用過程中扮演著至關(guān)重要的角色，除此以外還能通過轉(zhuǎn)變病原體的表面構(gòu)造而強化被感染機體對病原體的識別和吞噬能力，有利于增強魚體的免疫力[17]。本試驗結(jié)果表明，飼料維生素C含量對條紋鋸鮨血清中AKP的活性無顯著影響，這可能是因為魚體對外界刺激的反應(yīng)首先反映在組織抗氧化系統(tǒng)上，血清中AKP主要用于參與代謝調(diào)控和營養(yǎng)物質(zhì)的吸收、利用上，并不需要調(diào)動血清中AKP的活性，具體原因還需進(jìn)一步深入研究。

3.2 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚組織抗氧化指標(biāo)及血清、肝臟中GOT、GPT活性的影響

動物體內(nèi)活性氧自由基的形成和清除必須維持著一個動態(tài)平衡，才可以使機體免受氧化脅迫的危害，保證機體正常的運轉(zhuǎn)。MDA是脂質(zhì)被氧化后的關(guān)鍵成分，因其可對生物體細(xì)胞的構(gòu)造和活性產(chǎn)生很強的破壞性而具有很大的生物毒性[18]，MDA的含量可以直接表明生物膜受氧化損害的水平，間接表明自由基對生物體的損害水平[19]。SOD和CAT等構(gòu)成的抗氧化酶系統(tǒng)，可清除機體代謝產(chǎn)生的過多的自由基。其中，SOD是體內(nèi)以超氧陰離子(O2-)為唯一底物的酶類和自由基連鎖反應(yīng)的阻斷劑，它可特異性地催化超氧化物自由基歧化為過氧化氫和氧氣，過氧化氫在CAT的作用下生成無毒性的水和氧氣。因此，檢測魚類組織中的SOD、CAT的活性和MDA含量的變化可以較為準(zhǔn)確地反映魚體內(nèi)的抗氧化狀況[20]。T-AOC是評價機體清除自由基和其他潛在毒性氧化物能力的指標(biāo)，機體總抗氧化力的數(shù)值與其清除自由基的能力呈正比，即T-AOC數(shù)值越大，機體的防御性越強。在條紋鋸鮨幼魚肌肉組織中，335.33 mg/kg組的SOD活性最大，飼料維生素C含量對肌肉組織中CAT的活性和MDA的含量無顯著影響，但是74.03 mg/kg組的T-AOC最強。這可能是因為抗氧化系統(tǒng)除本研究中檢測的SOD和CAT指標(biāo)外，還存在的谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)等其他抗氧化因子也做出了反應(yīng)。另外，維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚血清和肌肉中的CAT活性均無顯著影響，這可能是由于SOD是首先作用于活性氧自由基的酶，CAT是SOD的下游酶，負(fù)責(zé)清除SOD與O2-作用后產(chǎn)生的過氧化氫，另外GSH-Px也可以起到同樣的作用，所以CAT并未被調(diào)動參與血清和肌肉組織的抗氧化反應(yīng)中。

研究報道，飼料中添加316、2 000、100和630 mg/kg維生素C可提高黃顙魚(PelteobagrusfulvidracoRich)[21]、大口黑鱸(Micropterussalmoides)[22]、草魚(Ctenopharyngodonidellus)[23]、點帶石斑魚[24]等魚組織中SOD的活性；但宋理平等[25]對中國對蝦(Fenneropenaeuschinensis)幼蝦的報道稱，飼料中的維生素C含量對其組織的SOD活性無顯著影響，而艾春香[26]對河蟹(Eriochiersinensis)的研究表明，隨著飼料維生素C含量的升高其血清SOD的活性反而降低。由此可見，飼料維生素C含量對水產(chǎn)動物組織中SOD活性影響的結(jié)論尚不一致，這可能與水產(chǎn)動物的種類、生長階段、健康狀況、養(yǎng)殖環(huán)境以及添加維生素C來源的形式和維生素C與維生素E等營養(yǎng)因子的相互作用有關(guān)，具體機制需要進(jìn)一步深入研究。

GOT和GPT在正常情況下主要分布于肝臟和心肌等組織細(xì)胞中，血清中轉(zhuǎn)氨酶的含量很少且活性很低，其主要作用是參與細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的新陳代謝和轉(zhuǎn)氨基作用。當(dāng)肝臟受損時，細(xì)胞通透性增大，GOT和GPT從肝臟進(jìn)入血液中，導(dǎo)致血清中2種轉(zhuǎn)氨酶活性上升。因而血清中GOT和GPT的活性可以反映肝組織是否病變或受損[27]。本研究中條紋鋸鮨幼魚血清中GPT的活性隨著飼料維生素C含量的升高而不斷下降，后處于平穩(wěn)狀態(tài)。在條紋鋸鮨幼魚肝臟中，GOT的活性先隨著飼料維生素C含量的增加而增強，而飼料維生素C含量達(dá)到910.98 mg/kg時，GOT的活性明顯降低。這說明飼料中添加適量的維生素C可以對魚體起到一定程度保肝護(hù)肝的作用。

3.3 飼料維生素C含量對條紋鋸鮨幼魚組織維生素C積累量及肌肉營養(yǎng)成分的影響

Wang等[28]報道，魚體組織維生素C的積累量由低到高為肌肉、肝臟、腦、鰓，本研究結(jié)果與上述報道一致，肌肉是3個組織中維生素C積累量最低的組織。Al-Amoudi等[29]認(rèn)為，出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因是肌肉的活躍度造成的，肌肉中的維生素C以一種可消費的形式存在，能直接參與生理活動。而肝臟是維生素C的主要代謝場所，也是主要儲存場所，所以肝臟中的維生素C含量遠(yuǎn)高于肌肉。Dabrowski[30]認(rèn)為，魚類從外界獲取的維生素C主要用于維持組織中維生素C的穩(wěn)定狀態(tài)，所以維持組織最大積累量的維生素C添加量即為魚類的最適添加量。Foumier等[31]報道，肝臟維生素C積累量達(dá)到飽和時飼料中的維生素C含量是估算歐洲鱸魚對維生素C需要量的最可靠的指標(biāo)，因此本研究中飼料維生素C含量為335.33 mg/kg是個可信的指標(biāo)。經(jīng)折線模型回歸分析可知，飼料維生素C含量為309.93 mg/kg的時，肝臟中維生素C的積累量開始進(jìn)入平臺期。

本試驗結(jié)果表明，條紋鋸鮨幼魚肌肉中粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分的含量不受飼料維生素C含量的影響，該結(jié)果與對半滑舌鰨(Cynoglossussemilaevis)[32]、翹嘴鲌(Culteralburnus)[33]、吉富羅非魚(O.niloticus)[34]的研究結(jié)果一致，但對點帶石斑魚[9]的研究顯示，飼料中維生素C含量對其肌肉的粗脂肪含量有顯著影響。本試驗結(jié)果表明，飼料中添加高含量的維生素C可顯著提高肌肉中膠原蛋白的含量。膠原蛋白中羥脯氨酸和羥賴氨酸的含量十分豐富，維生素C是脯氨酸和賴氨酸羥化反應(yīng)不可缺少的輔酶，能夠促進(jìn)兩者的形成，因此添加維生素C有助于膠原蛋白的形成。

4 結(jié) 論

① 飼料中添加適量的維生素C，可顯著影響條紋鋸鮨幼魚的生長、飼料利用、血清生化以及組織抗氧化指標(biāo)，顯著提高條紋鋸鮨幼魚肌肉中膠原蛋白的含量。

② 本研究以特定生長率、肝臟中維生素C積累量和血清溶菌酶活性為評價標(biāo)準(zhǔn)，通過折線回歸模型得出，規(guī)格為88 g左右的條紋鋸鮨幼魚飼料中維生素C的需要量分別為66.66、309.93和345.11 mg/kg。