不同肺炎患兒降鈣素原、超敏C反應(yīng)蛋白及T細(xì)胞亞群變化的臨床意義

莊金寶，劉天明，劉彩紅，馬淑紅，王江元

(吉林大學(xué)第一醫(yī)院二部 檢驗(yàn)科，吉林 長春130031)

呼吸道感染是兒科臨床最常見、最多發(fā)的疾病之一，是僅次于早產(chǎn)的導(dǎo)致5歲一下兒童死亡的第二位原因，發(fā)達(dá)國家以病毒為主要病原菌，發(fā)展中國家以細(xì)菌為主[1]。細(xì)菌、病毒、支原體、真菌和原蟲是引起兒童社區(qū)獲得性肺炎的常見病原菌[2,3]。兒童呼吸道感染在年齡越小的患兒中表現(xiàn)越嚴(yán)重，并發(fā)癥及死亡率均較高。本文旨在研究外周血超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、降鈣素原(PCT)、T淋巴細(xì)胞亞群，在不同類型肺炎患兒中的變化情況，指導(dǎo)臨床診斷和鑒別診斷患兒肺炎。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2014年5月6日-2016年11月23日我院收治的肺炎患兒，其中細(xì)菌性肺炎32例、支原體肺炎25例、病毒性肺炎30例、健康對(duì)照38例。通過病史、體格檢查、X線攝片和實(shí)驗(yàn)室檢查，均符合小兒肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]的住院患兒，且無心、肝、 腎等重要臟器疾患及其他基礎(chǔ)疾病。細(xì)菌性肺炎組，男15例、女17例，平均年齡(5.9±3.8)，均經(jīng)痰或咽拭子細(xì)菌培養(yǎng)證實(shí)；支原體性肺炎組，男12例、女13例，平均年齡(6.1±2.8)，肺炎支原體IgM抗體均為陽性；病毒性肺炎組，男13例、女17例，平均年齡(4.9±4.2)；健康對(duì)照組，男18例、女20例，平均年齡(5.2±3.5)。各組之間性別、年齡統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均>0.05)。

1.2 方法

1.2.1樣本采集 采集肺炎患兒和健康對(duì)照兒童2 ml EDTA-K2抗凝靜脈血用于流式細(xì)胞儀檢測；含分離膠試管分離血清用于檢測hs-CRP、PCT。肺炎患兒均于接受治療前采血。

1.2.2hs-CRP檢測 采用免疫散射比濁法，由BN II(型號(hào)，國家)全自動(dòng)蛋白分析儀進(jìn)行檢測，試劑購自西門子醫(yī)學(xué)診斷產(chǎn)品有限公司。

1.2.3PCT檢測 采用化學(xué)發(fā)光法，于Smart Line分析儀上進(jìn)行，試劑為Thermo的降鈣素原檢測試劑盒，>5 mg/L為陽性。

1.2.4流式細(xì)胞儀檢測

采用FACSCalibur全自動(dòng)流式細(xì)胞分析儀，定量檢測外周血T淋巴細(xì)胞亞群。向管中加入混勻的全血50 μl，之后加入CD4+CD8+CD3聯(lián)合抗體5 μl，充分渦旋混勻后，避光靜止15 min。再向管中加入2 ml的1×溶血素，避光放置7 min。向管中加入2 ml的PBS緩沖液，渦旋混勻后離心(300 g，5 min)后，倒去上清液，將管底剩余液體渦旋混勻后，在加入2 ml PBS緩沖液，再次離心(300 g，5 min)。倒去上清液，將管底剩余液體渦旋混勻，加入0.5 ml PBS緩沖液，即可上機(jī)檢測。T淋巴細(xì)胞CD4+CD8+CD3單克隆抗體購自BD公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x—±s) 表示，多組間比較采用方差分析，兩組比較采用t檢驗(yàn)； 計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)；P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

2.1 三組肺炎于健康兒童hs-CRP的比較

與健康對(duì)照組比較，細(xì)菌性肺炎組、支原體性肺炎組患兒hs-CRP水平均較高，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(分別t為13.99，8.13；P均<0.05)。細(xì)菌性肺炎組與支原體性肺炎組、病毒性肺炎組與健康對(duì)照組比較，hs-CRP水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(分別t為1.77，0.50；P均>0.05)，見表1。

2.2 三組肺炎于健康兒童T細(xì)胞亞群的比較

細(xì)菌性肺炎組、支原體性肺炎組、病毒性肺炎組患兒CD3+、 CD3+CD4+T淋巴細(xì)胞水平均低于對(duì)照兒童，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (分別t為6.12、4.86，6.33、5.44，5.72、5.26；P均<0.05)； 三組肺炎患兒之間的差異則均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。

表1 各組hs-CRP水平比較(x—±s)

注：與正常對(duì)照組比較aP<0.05，bP>0.05；與細(xì)菌性肺炎組比較cP<0.05，dP>0.05

細(xì)菌性肺炎組、支原體性肺炎組患兒CD3+CD8+T淋巴細(xì)胞水平均低于對(duì)照兒童，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (分別t為5.64，5.51；P均<0.05)； 細(xì)菌性肺炎組與支原體性肺炎組、病毒性肺炎組與健康對(duì)照組比較，CD3+CD8+水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(分別t為0.05，1.12；P均>0.05)。

細(xì)菌性肺炎組、支原體性肺炎組、病毒性肺炎組患兒的CD4+/CD8+均低于對(duì)照兒童，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別t為7.03，6.30，6.69；P均<0.05)； 三組肺炎患兒之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0.05)，見表1。

2.3 三組肺炎于健康兒童PCT的比較

細(xì)菌性肺炎組PCT水平高于支原體性肺炎組、病毒性肺炎組和健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別t為16.68、18.45、21.27；P均<0.05)。而支原體性肺炎組、病毒性肺炎組與健康對(duì)照組比較PCT水平無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均>0.05)。細(xì)菌性肺炎組PCT陽性率高于其他兩組肺炎患兒和正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別χ2為32.25、40.51、55.42；P均<0.05)，見表2。

表2 各組PCT水平比較

注：與細(xì)菌性肺炎組相比eP<0.05。

3 討論

C反應(yīng)蛋白是由肝臟合成的一種全身性炎癥反應(yīng)急性期的非特異性標(biāo)志物，提高檢測精度所測的CRP，稱為超敏CRP[5]。在炎癥反應(yīng)階段4-6 h內(nèi)，hs-CRP水平迅速升高，其升高幅度與細(xì)菌感染的嚴(yán)重程度相關(guān)，感染越重，hs-CRP升高幅度越大，但在非細(xì)菌性感染時(shí)，hs-CRP的升高并不明顯[6]，已逐漸成為診斷、鑒別診斷細(xì)菌感染的可靠指標(biāo)。本研究中，細(xì)菌性肺炎和支原體性肺炎hs-CRP均較正常兒童升高明顯，病毒性肺炎與正常兒童hs-CRP無明顯差異，表明hs-CRP高效、靈敏，為早期診斷細(xì)菌性和非細(xì)菌性兒童肺炎提供了非常重要的依據(jù)[7]。而細(xì)菌性PCT水平、PCT陽性率明顯高于支原體性肺炎、病毒性肺炎和正常兒童，可見PCT可鑒別診斷細(xì)菌性肺炎和支原體性肺炎。其機(jī)制為，PCT由甲狀腺濾泡旁細(xì)胞分泌，細(xì)菌及其毒素是促進(jìn)PCT升高的主要物質(zhì)，在細(xì)菌感染，尤其是全身性感染時(shí)PCT會(huì)逐漸升高[5,8]。

T淋巴細(xì)胞來源于骨髓的多能干細(xì)胞，在胸腺激素的誘導(dǎo)下分化成熟，成為具有免疫活性的T細(xì)胞，它既是機(jī)體的免疫反應(yīng)的效應(yīng)細(xì)胞，又是免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞。目前，評(píng)價(jià)細(xì)胞免疫功能的常用方法是T淋巴細(xì)胞亞群檢測[9]。外周成熟的T臨床細(xì)胞均表達(dá)CD3，再分為CD4+和CD8+亞群[10]。CD4+T細(xì)胞是輔助誘導(dǎo)性T細(xì)胞亞群(Th細(xì)胞)，其減少說明B細(xì)胞產(chǎn)生免疫球蛋白減少，細(xì)胞免疫功能下降；CD8+T細(xì)胞是抑制性細(xì)胞亞群，其數(shù)量增多，表示免疫受到抑制。CD4+/CD8+是人體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的最重要指標(biāo)，比值降低，則提示細(xì)胞免疫受抑制。當(dāng)致病因子侵入人體后，會(huì)導(dǎo)致正常免疫平衡失調(diào)，T淋巴細(xì)胞大量凋亡，數(shù)量減少，CD4+/CD8+比例失衡，導(dǎo)致機(jī)體免疫功能紊亂[11]。

本研究中，三組肺炎患兒CD3+、CD3+CD4+、CD4+/CD8+水平均明顯低于健康對(duì)照兒童；細(xì)菌性、支原體性肺炎組患兒CD3+CD8+T淋巴細(xì)胞水平均顯著高于對(duì)照兒童，表明兒童肺炎存在一定程度的免疫失調(diào)，有研究發(fā)現(xiàn)免疫佐劑聯(lián)合常規(guī)治療可有效治療兒童反復(fù)的呼吸道感染[12]。

綜上所述，hs-CRP、PCT為早期診斷、鑒別診斷細(xì)菌性肺炎、支原體性肺炎和病毒性肺炎有較高的臨床價(jià)值；且兒童肺炎存在一定程度的免疫功能失調(diào)，臨床應(yīng)將恢復(fù)免疫功能和常規(guī)抗感染治療相結(jié)合，為臨床治療兒童肺炎提供新思路。