子宮內(nèi)膜異位癥患者血清VEGF、HE4及MMP-9的表達(dá)及意義

陳志華,李愛軍,白 晶,喬玉環(huán)

(鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院 婦科,河南 鄭州450000)

子宮內(nèi)膜異位癥(EMT)屬于婦科臨床常見的良性疾病，主要是子宮內(nèi)膜組織出現(xiàn)在卵巢、盆腔腹膜、子宮直腸凹等子宮體以外部位所引起的病變，多表現(xiàn)為痛經(jīng)、性交痛以及不孕不育等[1]。據(jù)統(tǒng)計[2,3]，EMT的發(fā)病率高達(dá)10%-15%，且呈逐年上升趨勢，嚴(yán)重影響女性的生活健康。由于EMT病因復(fù)雜、發(fā)病機(jī)制尚不清楚、治療難度高、易復(fù)發(fā)原因，導(dǎo)致該病成為目前婦產(chǎn)科醫(yī)師研究的重點(diǎn)課題。國內(nèi)外研究[4,5]表明，多種細(xì)胞因子參與EMT的發(fā)病和進(jìn)展過程。本研究檢測分析了EMT患者血清內(nèi)皮生長因子(VEGF)、人附睪分泌蛋白4(HE4)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)水平，并與健康體檢者進(jìn)行對比，旨在探索血清VEGF、HE4及MMP-9水平檢測在EMT診斷及病情判斷中的價值?，F(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年6月至2017年6月本院收治的100例EMT患者為EMT組，入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)經(jīng)腹腔鏡手術(shù)或病理檢測確診為EMT患者[6]；(2)年齡21-55歲，月經(jīng)規(guī)律；(3)同意參加本研究，依從性良好。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除心肝肺腎等重要臟器功能異常者；排除患有自身免疫疾病、急性炎癥或生殖器官發(fā)育不良者；排除肝炎、結(jié)合以及惡性腫瘤患者；排除近期服用過激素類藥物患者。EMT組患者年齡21-48歲，平均(37.52±6.81)歲；根據(jù)美國生育協(xié)會修訂EMT評分標(biāo)準(zhǔn)分期：Ⅰ期17例，Ⅱ期40例，Ⅲ期34例，Ⅳ期9例。選取同期本院健康體檢的100例育齡婦女為健康組，年齡21-51歲，平均(38.16±6.86)歲。兩組受試者年齡、體重、基礎(chǔ)病等方面比較，差異不顯著(P>0.05)，具有可比性。本研究由醫(yī)院倫理道德委員會審核通過，所有受試人員均知情同意。

1.2 觀察指標(biāo)與方法

兩組受試者均于治療前非經(jīng)期抽取空腹肘靜脈血5 ml，室溫靜置10 min，采用低速離心機(jī)以3 500 r/min進(jìn)行離心10 min，小心吸取上清于干凈EP管中，-80℃保存待檢。血清VEGF、HE4及MMP-9水平采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)法檢測，其中VEGF試劑盒購自武漢博士德公司，HE4試劑盒購自上海裕平生物公司，MMP-9試劑盒購自深圳晶美生物公司。檢測儀器為Multiskan MK3型全自動酶標(biāo)儀(芬蘭Labsystem公司)。所有試驗(yàn)操作均由專人按說明書執(zhí)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，研究中所有計量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x—±s)表示，多組數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析，兩組數(shù)據(jù)比較采用t檢驗(yàn)；計數(shù)資料以率(%)表示，采用χ2檢驗(yàn)；采用Pearson法分析EMT患者血清VEGF、HE4及MMP-9之間的相關(guān)性；采用受試者工作特征曲線(ROC)分析各指標(biāo)對EMT的診斷價值；P<0.05表示差異具有顯著性。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清VEGF、HE4及MMP-9水平表達(dá)

EMT組患者血清VEGF、HE4及MMP-9水平均明顯高于健康組，差異具有顯著性(P<0.05)。見表1。

2.2 血清VEGF、HE4及MMP-9對EMT的診斷價值

見表2、圖1。

表1 兩組血清VEGF、HE4及MMP-9水平比較(x—±s)

表2 血清VEGF、HE4及MMP-9對EMT的診斷價值

圖1 血清VEGF、HE4及MMP-9診斷EMT的ROC曲線

2.3 不同分期EMT患者血清VEGF、HE4及MMP-9水平表達(dá)

隨著EMT分期的升高，患者血清VEGF、HE4及MMP-9水平也明顯升高；不同EMT分期患者血清VEGF、HE4及MMP-9水平比較，差異具有顯著性(P<0.05)。見表3。

表3 不同分期EMT患者血清VEGF、HE4及MMP-9水平比較(x—±s)

2.4 EMT患者血清VEGF、HE4及MMP-9的相關(guān)性分析

EMT患者血清VEGF、HE4與MMP-9水平呈顯著正相關(guān)，且VEGF與HE4之間也呈顯著正相關(guān)(P<0.05)。見表4。

表4 EMT患者血清VEGF、HE4及MMP-9的相關(guān)性分析[r(P)]

3 討論

EMT是育齡女性常見的慢性疾病，雖然其在組織形態(tài)學(xué)方面屬于良性病變，但EMT卻具有侵襲、浸潤、轉(zhuǎn)移以及粘附等惡性腫瘤相似的生物學(xué)行為，存在一定的惡變趨勢。EMT是導(dǎo)致女性不孕的重要原因之一，約有0.7%-1.0%的EMT患者會發(fā)生惡性轉(zhuǎn)變[7]。早期診斷和治療有助于提高EMT患者預(yù)后情況和改善生活質(zhì)量。目前，腹腔鏡檢查是EMT診斷的主要方法，但腹腔鏡手術(shù)創(chuàng)傷較大，費(fèi)用高且并發(fā)癥多，給患者身心帶來較大壓力。因此，尋找一種簡單易行、靈敏度和特異度較高的EMT診斷方法成為臨床研究的熱點(diǎn)[8]。

隨著對EMT發(fā)生機(jī)制研究的深入，國內(nèi)外學(xué)者關(guān)于EMT提出了遺傳學(xué)說、子宮內(nèi)膜種植學(xué)說、環(huán)境與激素學(xué)說等多個學(xué)說，其中較為主流的學(xué)說是子宮內(nèi)膜種植學(xué)說，即子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞或間質(zhì)細(xì)胞經(jīng)血逆流，在卵巢和附件盆腔黏膜上定植，并生長蔓延[9]。研究[10]發(fā)現(xiàn)，脫落的子宮內(nèi)膜在卵巢等處定植過程中需要新生大量血管來提供充足血供，可見新血管的形成在EMT的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用。VEGF是最近發(fā)現(xiàn)的強(qiáng)效血管生長因子，作為特異性內(nèi)皮細(xì)胞的有絲分裂原，通過與血管內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合，刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、分化、遷移，增大血管的通透性，從而促進(jìn)皮下血管網(wǎng)絡(luò)的形成[11]。近年來研究[12]表明，血清VEGF表達(dá)量升高會促進(jìn)EMT患者病灶處血管新生，加快異位內(nèi)膜的生長和增生，造成病情加重。HE4是近些年發(fā)現(xiàn)的新型腫瘤標(biāo)志物，能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的浸潤、轉(zhuǎn)移以及血管生成，是卵巢癌與子宮內(nèi)膜癌等惡性疾病的重要標(biāo)志物[13]。EMT具有侵襲、轉(zhuǎn)移和易復(fù)發(fā)等腫瘤樣疾病特征，因此HE4可能參與EMT疾病的發(fā)生和發(fā)展過程[14]。MMP-9是一種大分子膠原酶，可降解基質(zhì)膜、纖維連接蛋白、明膠等胞外基質(zhì)，誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞出芽，加快新血管形成，促使腫瘤細(xì)胞向周圍浸潤和轉(zhuǎn)移[15]。胞外基質(zhì)的降解是EMT患者子宮內(nèi)膜細(xì)胞轉(zhuǎn)移和定植的重要步驟，王平[16]等研究發(fā)現(xiàn)，MMP-9通過降解胞外基質(zhì)膜，加強(qiáng)細(xì)胞間黏附作用，從而促進(jìn)子宮內(nèi)膜細(xì)胞的異位黏附和定植生長。本研究中，EMT組患者血清VEGF、HE4及MMP-9水平明顯高于健康組，說明三種因子可能參與EMT的發(fā)病過程；而隨著疾病分期的升高，EMT患者血清VEGF、HE4及MMP-9水平也顯著提高，證實(shí)了VEGF、HE4及MMP-9的高表達(dá)可促進(jìn)以為內(nèi)膜細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、黏附和生長，進(jìn)而破壞周圍組織，導(dǎo)致病情加重，血清VEGF、HE4及MMP-9可作為判斷EMT患者病情的重要標(biāo)志物。相關(guān)性研究發(fā)現(xiàn)，EMT患者血清VEGF、HE4及MMP-9之間均呈顯著正相關(guān)，推測三種細(xì)胞因子在EMT的發(fā)病和發(fā)展過程中發(fā)揮著協(xié)同作用。

采用ROC曲線分析VEGF、HE4及MMP-9檢測對EMT的診斷價值，三者的ROC曲線下面積分別為0.861、0.816、0.793，說明三項(xiàng)血液指標(biāo)在EMT臨床診斷方面具有較高應(yīng)用價值；其中HE4診斷靈敏度最高，VEGF和MMP-9診斷的特異性較好，故檢測血清VEGF、HE4及MMP-9水平有助于EMT的早期診斷。

綜上所述，VEGF、HE4及MMP-9水平與EMT的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，臨床上可通過檢測血清VEGF、HE4及MMP-9水平來診斷EMT和評估患者病情。