不同產(chǎn)地藍(lán)莓關(guān)鍵品質(zhì)因子分析及其抗氧化特性

,,,,*

(1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院,湖北武漢 430000; 2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院,湖北武漢 430000)

藍(lán)莓為杜鵑花科越桔屬(Vaccinium)多年生落葉或常綠灌木,是一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高的水果,富含糖類、維生素、蛋白質(zhì)、礦質(zhì)元素等。酚類物質(zhì)尤其是花色苷類物質(zhì)含量很高,具有廣泛的生物活性、如抗炎、抗病毒、抗突變、抗癌、防止DNA 損傷、預(yù)防心血管疾病等[1]。其中很多生物活性都來源于它的抗氧化作用和對(duì)自由基的清除作用。藍(lán)莓在世界上許多國(guó)家都有種植,我國(guó)藍(lán)莓種植起步較晚,目前已有20年種植歷史,主產(chǎn)區(qū)在我國(guó)東北地區(qū),近年來在華北、江浙、遼東半島、華南地區(qū)也有種植[2]。隨著人們生活水平的提高,藍(lán)莓果以其風(fēng)味獨(dú)特,營(yíng)養(yǎng)保健功能強(qiáng)受到人們關(guān)注[3]。藍(lán)莓花色苷是藍(lán)莓中主要的關(guān)鍵品質(zhì)因子之一,也是藍(lán)莓中主要的抗氧化物質(zhì)。有研究表明不同產(chǎn)地及氣候條件對(duì)藍(lán)莓花色苷的含量和抗氧化能力具有一定的影響[4]。目前,國(guó)內(nèi)外有關(guān)藍(lán)莓品質(zhì)的研究多集中于不同藍(lán)莓品種之間,而對(duì)不同產(chǎn)地同一品種藍(lán)莓品質(zhì)特性以及抗氧化能力差異的報(bào)道較為少見。因此,分析不同產(chǎn)地環(huán)境的同一品種藍(lán)莓品質(zhì)特性及其花色苷抗氧化能力,可以更加深入的了解不同產(chǎn)地藍(lán)莓關(guān)鍵品質(zhì)的差異,對(duì)藍(lán)莓的引種及栽培生產(chǎn)和加工具有實(shí)際意義。有研究表明“燦爛”藍(lán)莓品質(zhì)優(yōu)良,花色苷含量較高,在我國(guó)南方地區(qū)栽培廣泛。

本研究擬通過對(duì)比采自南京、玉溪、貴陽、湖州四個(gè)不同地區(qū)的“燦爛”藍(lán)莓果實(shí)為試驗(yàn)材料,對(duì)其內(nèi)在品質(zhì),花色苷抗氧化活性進(jìn)行了比較,分析了不同產(chǎn)地藍(lán)莓品質(zhì)指標(biāo)的差異性,并對(duì)比分析了不同產(chǎn)地藍(lán)莓花色苷抗氧化能力的強(qiáng)弱,旨在為藍(lán)莓種植和深加工的進(jìn)一步發(fā)展做出理論和技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

“燦爛”藍(lán)莓 浙江省安吉縣天子湖鎮(zhèn)高莊村藍(lán)莓谷、貴州省三穗縣長(zhǎng)吉鄉(xiāng)新盤村、南京市溧水區(qū)白馬石頭鎮(zhèn)、玉溪市澄江縣海口鎮(zhèn)?？诖?均選擇果實(shí)成熟度均勻一致,且無病、蟲害的果實(shí)分別進(jìn)行采收,分裝在帶有小孔的塑料盒(材質(zhì):高溫聚酯薄膜,規(guī)格:長(zhǎng)11 mm、寬11 mm、高4 mm、壁厚0.38 mm;廠家:義烏市尚美塑料有限公司)中,4 ℃貯藏;酚酞、鄰苯二甲酸氫鉀、氫氧化鈉、蒽酮、濃硫酸、硫酸銅、硼酸、亞甲基藍(lán)、溴甲酚綠、硫酸鉀、乙醇、鹽酸、葡萄糖、硝酸、高氯酸、VC、乙酸鈉、氯化鉀、碳酸氫鈉、活性炭、酒石酸氧銻鉀、鉬酸銨、乙酸銨、氯化鉀、氯化鍶、乙酸乙酯、正己烷、鐵氰化鉀、三氯乙酸、三氯化鐵、硫酸鐵、過氧化氫(30%)、水楊酸、AB-8大孔樹脂、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2′-聯(lián)氨-雙-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)、甲酸、甲醇(色譜純)等 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

HH-2數(shù)顯恒溫水浴鍋 常州澳華儀器有限公司;紫外-可見分光光度計(jì) 美國(guó)惠普公司;SQP電子天平 賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司;SHB-IIIS循環(huán)水式多用真空泵 鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司;半自動(dòng)凱氏定氮儀 上海沛歐分析儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 藍(lán)莓理化指標(biāo)分析

1.2.1.1 藍(lán)莓總酸的測(cè)定 總酸測(cè)定按GB/T 12456-2008,采用酸堿滴定法測(cè)定。藍(lán)莓果實(shí)用榨汁機(jī)打漿(功率:250 W、時(shí)間:2 min)后取10.00 g,轉(zhuǎn)入250 mL容量瓶中,加蒸餾水至刻度、搖勻,用濾紙過濾,濾液待測(cè)。準(zhǔn)確吸取濾液10 mL放入100 mL錐形瓶中,加入1%酚酞2～3滴,用0.01 mol/L的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(以0.01 mol/L的鄰苯二甲酸氫鉀標(biāo)定)進(jìn)行滴定,計(jì)算藍(lán)莓總酸度。

1.2.1.2 藍(lán)莓可溶性總糖含量的測(cè)定 蒽酮比色法,取藍(lán)莓果實(shí)用榨汁機(jī)打漿(功率250 W，時(shí)間2 min),取5 g藍(lán)莓漿,加入20 mL蒸餾水,沸水浴30 min,冷卻后4000 r/min離心15 min,重復(fù)2次,上清液過濾定容至100 mL。取1 mL稀釋后的提取液與1 mL 2%蒽酮-80%硫酸(體積比1∶1)混合后,加入5 mL濃硫酸,沸水浴保溫20 min,自然冷卻至室溫,于630 nm處測(cè)定吸光值[5]。根據(jù)上述方法測(cè)得葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線,y=0.8705x+0.0028(R2=0.9950)。

式中:N-稀釋倍數(shù),V0-測(cè)定時(shí)取樣體積(mL),V1-定容總體積(mL),W-樣品重量(g)。

1.2.1.3 藍(lán)莓水分含量的測(cè)定 水分測(cè)定:參考GB 5009.3-2010,采用直接干燥法進(jìn)行測(cè)定。

1.2.1.4 藍(lán)莓蛋白質(zhì)的測(cè)定 參考GB/T 5009.5-2016,采用凱氏定氮法進(jìn)行測(cè)定。

1.2.1.5 藍(lán)莓礦質(zhì)元素的測(cè)定 礦物質(zhì)元素測(cè)定:參考GB 5009.91-2017、GB 5009.92-2016、GB 5009.241-2017、GB 5009.90-2016與GB 5009.87-2016。

1.2.1.6 藍(lán)莓可溶性固形物含量測(cè)定 藍(lán)莓果實(shí)打漿(功率:250 W、時(shí)間:2 min),用手持?jǐn)?shù)顯糖度儀測(cè)定,直接讀取得到可溶性固形物含量。

1.2.2 藍(lán)莓花色苷提取及抗氧化能力分析

1.2.2.1 藍(lán)莓花色苷的提取 花色苷提取方法參照陳云霞等[6]的方法,并做進(jìn)一步改進(jìn)?；ㄉ赵谒嵝詶l件下比較穩(wěn)定,藍(lán)莓果實(shí)用體積濃度為60%、pH為3.0(鹽酸調(diào)pH)的乙醇作為提取液,料液比1∶10 (g/mL),在40 ℃條件下提取,殘?jiān)赐瑯臃椒ㄌ崛?次。濾液合并,在40 ℃條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮。濃縮液存于-20 ℃冰箱備用。

1.2.2.2 藍(lán)莓花色苷含量的測(cè)定 花色苷含量測(cè)定參照Lohachoompol等[7]的方法稍作修改,將1.2.2.1中得到的提取液離心抽濾,取1 mL提取液,分別用pH1.0緩沖液(1.49 g KCl用蒸餾水定容到100 mL,HCl調(diào)pH至1.0)和pH4.5緩沖液(1.64 g CH3COONa用蒸餾水定容到100 mL,用HCl調(diào)pH至4.5)定容至25 mL,分別在510、700 nm下測(cè)定吸光值,通過示差法測(cè)定。

計(jì)算公式:花色苷(mg/mL)={[(A1-A2)-(A3-A4)]×449.2×稀釋倍數(shù)×1000×V}/(29600×m)

式中:A1-pH1.0稀釋液在510 nm測(cè)得吸光度,A2-pH4.5稀釋液在500 nm測(cè)得吸光度,A3-pH1.0稀釋液在700 nm測(cè)得吸光度,A4-pH4.5稀釋液在700 nm測(cè)得吸光度,V-提取液總體積(mL),m-樣品質(zhì)量(g)。

1.2.2.3 藍(lán)莓花色苷分離純化 取1.2.2.1藍(lán)莓花色苷提取液5 mL,加入20 mL正己烷液液萃取去除脂類物質(zhì),下層萃取物繼續(xù)用乙酸乙酯萃取,萃取物∶乙酸乙酯=1∶4(體積比)去除脂溶性黃酮類物質(zhì)[8]。之后用AB-8大孔樹脂純化,用pH3.0(鹽酸調(diào)pH)、60%乙醇洗脫,洗去糖類物質(zhì),提取液洗脫花色苷物質(zhì),懸蒸濃縮,真空冷凍干燥[9],即得藍(lán)莓花色苷凍干粉。

1.2.2.4 藍(lán)莓花色苷總還原能力的測(cè)定 VC濃度梯度:取VC儲(chǔ)備液(5 mg/mL)進(jìn)行梯度稀釋,稀釋后梯度濃度分別為:0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.00 mg/mL。

樣品的梯度稀釋:取湖州、南京、玉溪、貴陽四個(gè)產(chǎn)地藍(lán)莓花色苷凍干粉,用pH=3.0(鹽酸調(diào)pH)的酸化水溶解,配制成0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.00 mg/mL。

以鐵氰化鉀還原法[10]定花色苷的總還原能力,向試管中加入稀釋至不同濃度的樣品各2 mL,之后加入5 mL磷酸鹽緩沖液(0.2 mol/L,pH=6.6)和5 mL的2%鐵氰化鉀溶液,隨后放置在40 ℃恒溫水浴鍋中反應(yīng)30 min,流水冷卻至室溫。再向其中加入5 mL 10%三氯乙酸,室溫放置15 min,取5 mL的反應(yīng)液,向其中加入5 mL蒸餾水和1 mL 0.1%三氯化鐵溶液,混合均勻,反應(yīng)10 min后使用分光光度計(jì)在700 nm的波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度,以蒸餾水代替鐵氰化鉀溶液作為空白對(duì)照,以VC作為陽性對(duì)照,同樣的方法測(cè)定。

1.2.2.5 藍(lán)莓花色苷清除羥基自由基能力的測(cè)定 VC濃度梯度:取VC儲(chǔ)備液(1 mg/mL)進(jìn)行梯度稀釋,稀釋后梯度濃度分別為:0.01、0.08、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/mL。

樣品的梯度稀釋:取湖州、南京、玉溪、貴陽四個(gè)產(chǎn)地藍(lán)莓花色苷凍干粉,用pH=3.0(鹽酸調(diào)pH)的酸化水溶解,配制成0.01、0.08、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/mL。

以水楊酸法測(cè)定,向試管中加入1 mL 稀釋至不同濃度的樣品液,隨后加入1 mL FeSO4溶液(9 mmol/L),1 mL水楊酸溶液(9 mmol/L),最后加入1 mL H2O2(2.6 mmol/L)溶液?jiǎn)?dòng)反應(yīng),放入35 ℃水浴保溫30 min,510 nm下測(cè)定吸光值。以VC作為陽性對(duì)照,同樣方法進(jìn)行測(cè)定。記錄吸光度值,平行測(cè)定三次,按照公式計(jì)算樣品花色苷和VC的羥基自由基清除率[11]。

式中:A-反應(yīng)體系中以蒸餾水代替樣品測(cè)得吸光度,Ai-反應(yīng)體系中樣品某濃度下測(cè)得吸光度,Ai0-反應(yīng)體系中以蒸餾水代替水楊酸測(cè)得吸光度

1.2.2.6 藍(lán)莓花色苷清除DPPH自由基能力的測(cè)定 VC濃度梯度:取VC儲(chǔ)備液(1 mg/mL,乙醇配制)進(jìn)行梯度稀釋,pH=3.0(鹽酸調(diào)pH)的酸化稀釋,稀釋后梯度濃度分別為:0.025、0.05、0.075、0.1、0.3、0.5、0.7 mg/mL。

樣品的梯度稀釋:取湖州、南京、玉溪、貴陽四個(gè)產(chǎn)地藍(lán)莓花色苷凍干粉,用pH=3.0(鹽酸調(diào)pH)的酸化水溶解,配制成0.025、0.05、0.075、0.1、0.3、0.5、0.7 mg/mL。

向10 mL離心管中加入3 mL稀釋至不同濃度的樣液,向其中加入3 mL DPPH溶液(0.2 mmol/L,乙醇配制,4 ℃冰箱避光保存),25 ℃恒溫水浴鍋溫浴 30 min,在 517 nm波長(zhǎng)下測(cè)定反應(yīng)液吸光度,平行測(cè)定三次,以VC溶液作為陽性對(duì)照,DPPH自由基清除率的公式如下[12]。

式中:A-反應(yīng)體系中以乙醇代替樣品測(cè)得的吸光度,Ai-反應(yīng)體系中樣品某濃度下測(cè)得的吸光度,Ai0-反應(yīng)體系中以乙醇代替DPPH溶液測(cè)得的吸光度。

1.3 數(shù)據(jù)處理

每個(gè)實(shí)驗(yàn)平行測(cè)定三次,數(shù)據(jù)處理采用SPSS 17.0(IBM公司)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,利用Duncan新復(fù)極差法進(jìn)行顯著性分析,文中圖采用Oringe 8.0(美國(guó)OriginLab公司)進(jìn)行繪制。

2 結(jié)果與分析

2.1 藍(lán)莓關(guān)鍵品質(zhì)因子分析

藍(lán)莓果實(shí)營(yíng)養(yǎng)豐富,關(guān)鍵品質(zhì)因子主要體現(xiàn)在總糖、總酸、水分、蛋白質(zhì)、可溶性固形物等品質(zhì)指標(biāo)上[13]。由表1看出,不同產(chǎn)地藍(lán)莓的總酸、總糖含量有顯著差異(p<0.05);湖州產(chǎn)地藍(lán)莓總酸含量最高為0.82%,貴陽產(chǎn)地藍(lán)莓總酸含量最低為0.39%?？偺呛抠F陽藍(lán)莓含量最高為11.91%,湖州藍(lán)莓含量最低為6.62%。貴陽藍(lán)莓糖酸比最高為30.54;可溶性固形物含量為:南京>貴陽>玉溪>湖州,其中,南京藍(lán)莓含量最高為15.03%?？扇苄怨绦挝?、總酸及糖酸比無論是對(duì)鮮食還是加工果汁果酒都是重要的考量指標(biāo),鮮食藍(lán)莓一般選用可溶性固形物含量較高,總酸含量較低,糖酸比適中的品種[14]。通過比較分析可知,貴陽產(chǎn)地藍(lán)莓鮮食口感較佳。玉溪藍(lán)莓和湖州藍(lán)莓在水分含量和蛋白質(zhì)含量方面無顯著差異(p>0.05)。

表1 不同產(chǎn)地藍(lán)莓理化指標(biāo)(n=3)Table 1 Physical and chemical indicators of blueberries from different producing areas(n=3)

根據(jù)鄭紅巖[15]的研究,“燦爛”藍(lán)莓水分含量為83.47%,蛋白質(zhì)含量為545.66 mg/100 g,可溶性糖含量為3.67%,有機(jī)酸(以檸檬酸計(jì))含量為1.75%,糖酸比為5.01。李金星等[16]報(bào)道,“燦爛”藍(lán)莓可溶性固形物含量為12.88%,可溶性糖含量為7.04%,可滴定酸含量為0.73%。楊維[17]等發(fā)現(xiàn)“燦爛”藍(lán)莓可溶性糖含量為9.58%,有機(jī)酸含量為0.52%,可溶性固形物含量為10.83%。本研究四產(chǎn)地“燦爛”藍(lán)莓各關(guān)鍵品質(zhì)因子含量與文獻(xiàn)相比含量相當(dāng),且不同產(chǎn)地藍(lán)莓關(guān)鍵品質(zhì)因子含量均有差異。

2.2 藍(lán)莓礦質(zhì)元素分析

不同產(chǎn)地藍(lán)莓果實(shí)礦質(zhì)元素分析結(jié)果見表2。從表2可以看出不同產(chǎn)地藍(lán)莓果實(shí)礦質(zhì)元素含量不同,在所測(cè)的礦質(zhì)元素中,K含量最高,含量在605.85～757.29 mg/kg。其次為Ca、P含量,Mg、Fe含量較低。K含量南京藍(lán)莓最高,湖州藍(lán)莓最低。Ca含量由高至低依次為貴陽藍(lán)莓、湖州藍(lán)莓、玉溪藍(lán)莓、南京藍(lán)莓。P含量四產(chǎn)地差異顯著(p<0.05),南京藍(lán)莓P含量最高為(86.28±1.40) mg/kg,顯著高于其他三個(gè)地區(qū),湖州和貴陽藍(lán)莓次之,玉溪藍(lán)莓P含量最低為(36.29±0.58) mg/kg。Fe含量南京與貴陽藍(lán)莓無顯著差異,湖州藍(lán)莓含量最高,玉溪藍(lán)莓含量最低僅為(2.43±0.37) mg/kg。四產(chǎn)地藍(lán)莓Mg含量大小為:玉溪>貴陽>南京>湖州。姜晶[18]測(cè)得“燦爛”藍(lán)莓K含量為830.00 mg/kg,Ca含量為92.65 mg/kg,Fe含量為60.15 mg/kg。史海芝[19]研究發(fā)現(xiàn),“燦爛”藍(lán)莓果實(shí)中K含量最高為917.00 mg/kg,P含量為98.80 mg/kg,Ca含量為77.90 mg/kg,Mg含量為51.20 mg/kg。

表2 不同產(chǎn)地藍(lán)莓的礦質(zhì)元素分析(mg/kg,n=3)Table 2 Mineral elements in blueberries from different producing areas(mg/kg,n=3)

通過比較分析表明,藍(lán)莓果實(shí)的礦質(zhì)元素含量差異明顯。整體來看Ca、K和Mg元素含量豐富。不同品種藍(lán)莓果實(shí)中礦質(zhì)元素含量不同,不同產(chǎn)地同種藍(lán)莓果實(shí)中礦質(zhì)元素含量也有差異,有研究表明這是由于水果中的礦質(zhì)元素含量與果樹品種、土壤質(zhì)地、土肥水條件和栽培管理技術(shù)等因素密切相關(guān)[20]。

2.3 藍(lán)莓花色苷含量分析

從圖1可知,四產(chǎn)地“燦爛”藍(lán)莓花色苷含量存在顯著差異(p<0.05)。其中,貴陽藍(lán)莓花色苷含量最高,為(1.6418±0.0123) mg/g,南京藍(lán)莓花色苷含量最低,為(0.8339±0.0143) mg/g。玉溪藍(lán)莓花色苷含量為(1.1332±0.0231) mg/g,湖州藍(lán)莓花色苷含量為(1.3430±0.0240) mg/g。四產(chǎn)地“燦爛”藍(lán)莓花色苷含量在0.8339～1.6418 mg/g。吳文龍等[21]研究發(fā)現(xiàn)采自南京地區(qū)的“燦爛”藍(lán)莓花色苷含量為(0.8080±0.0380) mg/g,本文測(cè)得南京地區(qū)“燦爛”藍(lán)莓花色苷含量相與此結(jié)果一致。鄭紅巖等[15]測(cè)得“燦爛”花青苷含量為(1.5949±0.6750) mg/g,此結(jié)果在本實(shí)驗(yàn)四產(chǎn)地“燦爛”藍(lán)莓花色苷含量范圍內(nèi)?？梢钥闯霎a(chǎn)地不同“燦爛”藍(lán)莓花色苷含量不同,產(chǎn)生這一現(xiàn)象的原因可能是由于產(chǎn)地環(huán)境因素不同。

圖1 四產(chǎn)地藍(lán)莓花色苷含量(mg/g)Fig.1 Anthocyanin content in blueberries from 4 different producing areas(mg/g)

2.4 藍(lán)莓花色苷的總還原能力

一般情況下,樣品的還原力與其抗氧化活性有明顯相關(guān)性[22]。從圖2可以看到在研究范圍內(nèi)(濃度0.05～1.0 mg/mL),隨著VC以及藍(lán)莓花色苷濃度的增加,吸光值逐漸增大,表明總還原能力漸增強(qiáng),抗氧化活性逐漸增強(qiáng),表現(xiàn)出良好的劑量效應(yīng)關(guān)系。其總還原能力可以用半最大效應(yīng)濃度EC50表示,EC50越小,表明其總還原能力越強(qiáng)[23]?？梢钥闯鲇裣⒛暇┧{(lán)莓花色苷總還原能力差異較大,貴陽、湖州藍(lán)莓花色苷總還原能力差異較小。VC的EC50為0.067 mg/mL,四個(gè)產(chǎn)地花色苷的EC50分別為:貴陽0.213 mg/mL,湖州0.234 mg/mL,玉溪0.289 mg/mL,南京0.707 mg/mL。即VCEC50<貴陽花色苷EC50<湖州花色苷EC50<玉溪花色苷EC50<南京花色苷EC50。表明總還原能力VC>貴陽花色苷>湖州花色苷>玉溪花色苷>南京花色苷。李穎暢等[24]研究發(fā)現(xiàn)藍(lán)莓花色苷還原能力低于同等濃度抗壞血酸還原能力,這一結(jié)果與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。此外李穎暢研究發(fā)現(xiàn)抗壞血酸還原能力約為藍(lán)莓花色苷還原能力的2.15倍。本實(shí)驗(yàn)VC還原能力約為四產(chǎn)地藍(lán)莓花色苷還原能力的3.18～10.55倍,這一結(jié)果與李穎暢等研究結(jié)論不一致,這可能是由于藍(lán)莓花色苷含量及種類不同的原因。

圖2 不同產(chǎn)地藍(lán)莓花色苷的總還原能力的比較Fig.2 Comparison of total reducibility of blueberry anthocyanins from different producing areas

2.5 藍(lán)莓花色苷的清除羥基自由基的能力

由圖3可知,隨著VC以及藍(lán)莓花色苷濃度的增加,羥基自由基清除率也隨之增加。當(dāng)濃度達(dá)到0.4 mg/mL時(shí),湖州藍(lán)莓花色苷羥基自由基清除率為79.35%、玉溪和南京清除率相當(dāng),分別為68.65%和63.41%,貴陽藍(lán)莓花色苷羥基自由基清除率為95.63%,此時(shí)VC的清除率已達(dá)100%。研究范圍內(nèi)(濃度0.05～0.5 mg/mL),陽性對(duì)照VC清除羥基自由基能力高于四產(chǎn)地藍(lán)莓花色苷清除羥基自由基能力。通常用IC50值表示清除羥基自由基能力,IC50值越小,清除羥基自由基能力越強(qiáng)[25]。VC、湖州花色苷、貴陽花色苷、玉溪花色苷、南京花色苷IC50分別為0.1352、0.2693、0.1933、0.2918、0.3545 mg/mL。因此清除羥基自由基能力從高到低依次是VC>貴陽>湖州>玉溪>南京。

2.6 藍(lán)莓花色苷的清除DPPH自由基能力

由圖4可知,隨著VC以及藍(lán)莓花色苷濃度的增加,DPPH自由基的清除率逐漸增加。湖州、貴陽藍(lán)莓花色苷濃度在0.025～0.1 mg/mL之間,清除率幾乎呈線性增加,在此濃度范圍內(nèi),VCDPPH清除率由23.8%迅速增加至66.31%,貴陽藍(lán)莓花色苷DPPH清除率由16.32%升至43.26%。當(dāng)花色苷濃度為0.7 mg/mL時(shí),貴陽藍(lán)莓花色苷、VCDPPH自由基清除率已達(dá)100%。四個(gè)產(chǎn)地花色苷的IC50分別為:貴陽0.095 mg/mL,湖州0.114 mg/mL,南京0.289 mg/mL,南京0.203 mg/mL。研究范圍內(nèi)(濃度0.025～0.7 mg/mL),四個(gè)產(chǎn)地藍(lán)莓花色苷清除DPPH能力均小于陽性對(duì)照VC清除能力。四產(chǎn)地藍(lán)莓花色苷清除DPPH能力大小為:貴陽>湖州>玉溪>南京。四個(gè)地區(qū)藍(lán)莓花色苷清除DPPH能力有差異。這可能是由于四個(gè)地區(qū)花色苷含量及種類不同。

圖4 不同產(chǎn)地藍(lán)莓花色苷的清除DPPH自由基能力的比較Fig.4 Comparison of scavenging DPPH free radical ability of blueberry anthocyanins from producing areas

3 結(jié)論

本文對(duì)比了采自南京,玉溪,貴陽,湖州四個(gè)不同地區(qū)的“燦爛”藍(lán)莓果實(shí)品質(zhì)因子,比較花色苷含量及其抗氧化活性。結(jié)果表明,四地區(qū)“燦爛”藍(lán)莓果實(shí)糖含量均較高,總酸含量在0.39%～0.82%,貴陽藍(lán)莓含酸量最低為0.39%±0.01%?？扇苄钥偺呛抠F陽含量最高為11.91%±0.20%,湖州含量最低為6.62%±0.04%?？扇苄怨绦挝锖抠F陽藍(lán)莓最高為12.38%,湖州藍(lán)莓最底為11.97%。蛋白質(zhì)含量由高至低依次為:玉溪藍(lán)莓>湖州藍(lán)莓>南京藍(lán)莓>貴陽藍(lán)莓;水分含量均較高,達(dá) 80.37%以上。果實(shí)中除含以上的成分外,還含有豐富的礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素,具有較高的營(yíng)養(yǎng)保健價(jià)值,其中果實(shí)中 K、P含量最高的為南京藍(lán)莓,Ca含量最高的為貴陽藍(lán)莓,果實(shí)中Fe含量的最高為湖州藍(lán)莓。其果實(shí)中的礦質(zhì)元素含量綜合排序?yàn)镵>Ca>P>Mg>Fe均是人體不可缺少的礦物質(zhì)元素。

四產(chǎn)地“燦爛”藍(lán)莓花色苷含量顯著差異(p<0.05),貴陽藍(lán)莓花色苷含量最高為(1.6418±0.0123) mg/g,南京藍(lán)莓花色苷含量最低為(0.8339±0.0143) mg/g。藍(lán)莓花色苷總還原能力,清除DPPH自由基、羥基自由基能力,結(jié)果趨勢(shì)相同,抗氧化能力強(qiáng)弱均為:貴陽花色苷>湖州花色苷>玉溪花色苷>南京花色苷,且均小于陽性對(duì)照VC抗氧化能力。不同產(chǎn)地藍(lán)莓花色苷含量不同,抗氧化能力也有差異,總體趨勢(shì)為藍(lán)莓花色苷含量越高,抗氧化能力越強(qiáng)。

分析不同產(chǎn)地環(huán)境的同一品種藍(lán)莓品質(zhì)特性及其花色苷抗氧化能力,可以更加深入的了解不同產(chǎn)地藍(lán)莓關(guān)鍵品質(zhì)的差異,為藍(lán)莓品種選育、種植和良種采后加工及銷售提供理論參考。