紅藤虎杖復(fù)方免煎劑治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的實驗研究

劉峻承 鄭德勇

摘要：目的 通過急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎小鼠模型的建立，觀察紅藤虎杖復(fù)方免煎劑治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的療效。方法 取KM雌雄性小鼠各36只，稱重后隨機分成空白組、模型組、陽性組和中藥高、中、低劑量組，采用小鼠足踝腫脹法、觀察扭體次數(shù)進行抗炎癥痛實驗;取KM雌雄性小鼠各48只，稱重后隨機分成空白組、模型組、陽性組和中藥高、中、低劑量組，除空白組外，其余各組以尿酸腹腔注射小鼠，進行高尿酸血癥試驗。 結(jié)果 抗炎實驗0h小鼠右足踝直徑模型組與陽性組、中藥中、低劑量組比較，無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;2h、3h、4h小鼠右足踝直徑模型組與陽性組、中藥高、中、低劑量組比較，顯著性差異（P<0.01）;小鼠扭體次數(shù)模型組與陽性組、中藥高、中劑量組有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與中藥低劑量組比較，無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;陽性組與模型組、中藥低劑量組有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與中藥高、中劑量組比較，無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;血尿酸空白組與模型組、陽性組有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與中藥高、中、低劑量組無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;模型組與空白組、陽性組、中藥高、中、低劑量組有顯著性差異（P<0.05）;陽性組與空白組、模型組、中藥中劑量組有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與中藥高、低劑量組無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 說明紅藤虎杖復(fù)方免煎劑有較好的抗炎、鎮(zhèn)痛、降低血尿酸的效果。

關(guān)鍵詞：紅藤虎杖復(fù)方免煎劑;急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎;實驗研究

中圖分類號：R285.5 文獻標(biāo)志碼：A 文章編號：1007-2349（2018）09-0075-02

急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎是原發(fā)性痛風(fēng)的最常見首發(fā)癥狀，是尿酸鈉鹽在關(guān)節(jié)及周圍軟組織以結(jié)晶形式沉積引起的急性反應(yīng)炎癥，在國內(nèi)發(fā)病率接近0.3%，如不及時治療，體內(nèi)嘌呤代謝障礙進一步發(fā)展，可發(fā)生痛風(fēng)石的沉積，致使出現(xiàn)痛風(fēng)石、關(guān)節(jié)畸形及功能障礙等[1]。筆者通過臨床病例觀察[2]，達到較好的臨床治療效果，并進行了動物實驗，報道如下。

1 材料

1.1 實驗動物 KM雌雄性小鼠共216只，清潔級，體重20-25 g，購自重慶騰鑫生物技術(shù)有限公司，實驗動物許可證號：SCXK（川）2015-30。

1.2 實驗藥物 紅藤虎杖復(fù)方免煎劑（紅藤15 g，虎杖20 g，土茯苓30 g，蒼術(shù)15 g，車前子15 g，蜈蚣6 g，地龍15 g等藥組成，由四川新綠色藥業(yè)科技發(fā)展股份有限公司提供）;苯溴馬隆片，50 mg/片，宜昌長江藥業(yè)有限公司，批號：H20040348;雙氯芬酸鈉腸溶片，25 mg/片，北京諾華制藥有限公司，批號：H1102164;吲哚美辛腸溶片，25 mg/片，廣東華南藥業(yè)集團有限公司，國藥準字：H44020701。

1.3 主要儀器和試劑 血尿酸（BUA）測定試劑盒，美國貝克曼公司，批號：AUZ4528;TDZ5-WS臺式低速離心機，湖南湘鷹離心機有限公司;Au680全自動生化儀，美國貝克曼公司。

2 方法

2.1 抗炎鎮(zhèn)痛實驗動物分組及給藥 采用小鼠腫脹法時，取KM雌雄性小鼠各36只，稱重后隨機分成空白組、模型組、陽性組（吲哚美辛腸溶片）和中藥高、中、低劑量組各60 mL、30 mL、15 mL（kg-1·d-1）。連續(xù)給藥4 d，用尿酸鈉造模成功后，觀察記錄小鼠足踝直徑。觀察扭體次數(shù)時，取KM雌雄性小鼠各30只，稱重后隨機分成模型組、陽性組（雙氯芬酸鈉腸溶片）和中藥高、中、低劑量組各40 mL、20 mL、10 mL（kg-1·d-1）。連續(xù)給藥3 d，用0.6%的醋酸造模后，觀察小鼠出現(xiàn)腹部內(nèi)凹、軀干與后肢伸張、臀部高起等行為反應(yīng)。

2.2 高尿酸血癥實驗動物分組及給藥 取KM雌雄性小鼠各48只（30±2）g，稱重后隨機分為空白組、模型組、陽性組（苯溴馬隆片）、中藥高、中、低劑量組各60 mL、30 mL、15 mL（kg-1·d-1）。除空白組外，其余各組以尿酸腹腔注射小鼠[3];中藥各劑量組從d1開始予以中藥，連續(xù)3天，d2對照組給予苯溴馬隆灌胃給藥，d4眼眶后靜脈叢取血，測定小鼠血尿酸（BUA）值。

2.3 觀察指標(biāo) 測量各組給藥前后小鼠足踝腫脹變化;觀察扭體次數(shù)和發(fā)生反應(yīng)的鼠數(shù)為疼痛定量指標(biāo);測定小鼠血尿酸（BUA）值。

2.4 統(tǒng)計學(xué)方法 本研究采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件，計量資料用t檢驗，方差齊采用LSD檢驗，方差不齊采用Dunnett T3進行檢驗。

3 實驗結(jié)果

因飼養(yǎng)、灌胃等因素，小鼠腫脹實驗死亡小鼠5只，剩余55只，每組死亡1只;觀察扭體次數(shù)實驗時死亡小鼠7只，剩余53只，其中模型組以及中藥中、低劑量組死亡1只，陽性組及中藥高劑量組死亡2只;高尿酸血癥實驗時死亡小鼠9只，剩余87只，其中空白組及中藥高劑量組死亡3只，模型組死亡2只，中藥中劑量組死亡1只。

5.1 抗炎實驗 經(jīng)方差分析，0h、2h、3h、4h小鼠右足踝直徑空白組與模型組、陽性組、中藥高、中、低劑量組比較，顯著性差異（P<0.01）;0h小鼠右足踝直徑模型組與陽性組、中藥中、低劑量組比較，無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;2h、3h、4h小鼠右足踝直徑模型組與陽性組、中藥高、中、低劑量組比較，顯著性差異（P<0.01），有統(tǒng)計學(xué)意義。（見表1）

表1 各組模型小鼠右足踝腫脹度結(jié)果（x±s）

注：與模型組比較，*P<0.01

5.2 鎮(zhèn)痛及高尿酸血癥實驗 扭體法鎮(zhèn)痛實驗經(jīng)方差分析，模型組與陽性組、中藥高、中劑量組有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與中藥低劑量組比較，無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;陽性組與模型組、中藥低劑量組有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與中藥高、中劑量組比較，無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。（見表2）

高尿酸血癥實驗經(jīng)方差分析，空白組與模型組、陽性組有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與中藥高、中、低劑量組無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;模型組與空白組、陽性組、中藥高、中、低劑量組有顯著性差異（P<0.05）;陽性組與空白組、模型組、中藥中劑量組有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），與中藥高、低劑量組無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。（見表2）

表2 各組模型小鼠扭體次數(shù)、血尿酸結(jié)果（x±s）

注：扭體次數(shù)中，與模型組比較，*P<0.05，與與陽性組比較，△P<0.05;血尿酸值中，與模型組比較，*P<0.05，與陽性組比較，△P<0.05

6 討論

痛風(fēng)屬中醫(yī)“痹證”范疇，多因飲食失宜，濕濁內(nèi)蘊，日久化熱，阻滯經(jīng)絡(luò)，以致氣滯血瘀，不通則痛[4]。金元四大家之一的朱丹溪在《格致余論·痛風(fēng)》中說：“彼痛風(fēng)者，大率因血受熱，已自沸騰，其后或涉冷水，或立濕地，或扇取涼，或臥當(dāng)風(fēng)，寒涼外搏，熱血得寒，污濁凝澀，所以作痛，夜則痛甚，行于陰也?！闭J為該病起于血分受熱，復(fù)加外受風(fēng)寒濕邪所致，與一般痹證之病起于外受風(fēng)寒濕等六淫之邪不同。并提出“更節(jié)厚味自愈矣”，說明已在臨床實踐中認識到痛風(fēng)的發(fā)病及治療與飲食有關(guān)。方中紅藤，苦平，有清熱解毒、活血止痛的功效;虎杖，苦寒，有清熱利濕、活血止痛、解毒的功效;蒼術(shù)健脾利濕;土茯苓、車前子解毒除濕，通利關(guān)節(jié);蜈蚣、地龍祛風(fēng)解痙止痛等，諸藥合用，共湊清熱通絡(luò)、祛風(fēng)除濕的功效?，F(xiàn)代藥理研究表明[5]、[6]，紅藤含有生物堿、苷類，具有排泄尿酸及抗炎作用;虎杖有抗炎、鎮(zhèn)痛作用，所含的蒽醌衍生物大黃素具有細胞毒作用和免疫抑制作用;蜈蚣、地龍具有抗炎、鎮(zhèn)痛等?；谖覀儗t藤虎杖復(fù)方免煎劑的初期動物實驗研究，特別是該方藥具有降低血尿酸、抗炎、鎮(zhèn)痛的效果，對進一步從分子生物學(xué)層面探討該方藥對緩解本病的作用機制奠定了基礎(chǔ)。

參考文獻：

[1]吳生元.扶陽理論與臨床實踐[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2016：286-287.

[2]鄭德勇，劉峻承.紅藤虎杖湯治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎43例[J].中醫(yī)雜志，2013，54（3）：250-251.

[3]楊韜，陳真.高尿酸血癥的動物模型研究現(xiàn)狀和評價[J].安徽醫(yī)藥，2014，18（8）：1582-1583.

[4]閻小萍.常見風(fēng)濕病診治手冊[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2011：161-162.

[5]高學(xué)明.中藥學(xué)[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2002：110-542.

[6]沈丕安.中藥藥理與臨床應(yīng)用[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：305-306.

（收稿日期：2018-05-08）