HPLC法測(cè)定養(yǎng)脾散中桂皮醛的含量

張明珠，孫廣澤

摘 要：建立反相高效液相色譜法測(cè)定養(yǎng)脾散中桂皮醛的含量。方法：采用奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm），乙腈-0.1%磷酸溶液（38：62）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為290nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。桂皮醛在10～100μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。桂皮醛平均回收率分別為99.6%。結(jié)論：本法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可用于養(yǎng)脾散中桂皮醛的含量測(cè)定。

關(guān)鍵詞：養(yǎng)脾散；含量；測(cè)定

養(yǎng)脾散具有養(yǎng)脾健胃，開(kāi)郁消食的功效。養(yǎng)脾散用于脾胃虛弱、水土不服引起的消化不良、飲食積滯、腹瀉、食欲不振、面黃肌瘦等。養(yǎng)脾散由肉桂、薏苡仁、麥芽、丁香、砂仁、蓮子、老范志萬(wàn)應(yīng)神曲、甘草、山橘干等組成。肉桂（拉丁學(xué)名：Cinnamomum cassia Presl），又名玉桂、牡桂、玉樹(shù)、大桂、辣桂、平安樹(shù)、中國(guó)桂皮，為樟科植物肉桂的干燥樹(shù)皮。肉桂常用于陽(yáng)痿、目赤咽痛、虛寒吐瀉、宮冷、腰膝冷痛、陽(yáng)虛眩暈、經(jīng)閉、痛經(jīng)等。《藥性論》記載：“主治：幾種心痛，殺三蟲(chóng)，主破血，通利月閉，治軟腳，痹、不仁，胞衣不下，除咳逆，結(jié)氣、癰痹，止腹內(nèi)冷氣，痛不可忍，主下痢，鼻息肉。殺草木毒?！北疚牟捎酶咝б合喾▽?duì)養(yǎng)脾散中的桂皮醛的進(jìn)行了含量測(cè)定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：電子天平FA1004型（南京華欣分析儀器制造有限公司）；YL9100液相色譜儀（汕頭市科毅儀器設(shè)備有限公司）；RU超純水機(jī)（上海同田生物技術(shù)有限公司）；長(zhǎng)城獅鼎SHB-III型臺(tái)式循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）；美國(guó)澤拉布Super超越系列全觸屏超純水系統(tǒng)（上海和泰儀器有限公司）；天星進(jìn)樣瓶清洗機(jī)TX-500型（北京天星科儀科技有限公司）。

1.2 色譜柱：奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對(duì)照品：桂皮醛

1.4 試劑：醋酸鈉（盛陽(yáng)潤(rùn)澤（北京）科技有限公司）、冰醋酸（杭州蕭山創(chuàng)益化工儀器有限公司）、甲醇（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、三乙胺（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、磷酸二氫銨（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、乙腈（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）。

1.5 試藥：養(yǎng)脾散

2 測(cè)定方法確定

2.1 色譜條件

依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[1-6]。流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸溶液（38：62）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)：290nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按桂皮醛峰計(jì)算應(yīng)不得低于2500。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

取在60℃減壓干燥4小時(shí)的桂皮醛對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加流動(dòng)相制成每lml含0.02μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

取本品內(nèi)容物適量，精密稱(chēng)定，加15毫升甲醇溶液超聲處理0.5小時(shí)，放冷，濾過(guò)，濾液置25ml量瓶中，用少量甲醇溶液分次洗滌容器和殘?jiān)匆簽V人同一量瓶中，加甲醇溶液至刻度，搖勻，即得。

2.4 精密度試驗(yàn)

精密稱(chēng)取桂皮醛對(duì)照品適量，加流動(dòng)相使溶解，制成濃度為0.02μg·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.86%，表明本方法精密度良好。

2.5 對(duì)照品的線性考察

精密稱(chēng)取適量桂皮醛對(duì)照品，加入流動(dòng)相溶液使溶解分別配制成每毫升含0.01、0.02、0.04、0.08、0.16、0.32微克的溶液。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對(duì)照品進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，桂皮醛在0.01～0.32μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn)

稱(chēng)取同一批的桂皮醛樣品6份，按測(cè)定方法項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，測(cè)定含量，并計(jì)算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.88%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

2.7 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

取對(duì)照品適量，精密稱(chēng)取已知含量的樣品9份，置量瓶中，分別精密加入桂皮醛對(duì)照品，按項(xiàng)下方法制備成80%、100%、120%。取模擬樣品照“含量測(cè)定”項(xiàng)下方法試驗(yàn)，計(jì)算回收率為99.6%，RSD為0.71%。

2.8 樣品含量測(cè)定

依照上述含量測(cè)定方法，測(cè)定養(yǎng)脾散三批樣品。

3 討論

分別考察甲醇-0.03mol·L-1醋酸銨（60∶40），甲醇-水（45∶55），乙腈-甲醇-四氫呋喃-0.5%醋酸（2：2：30：80），乙腈-0.1%磷酸溶液（38：62）不同比例的流動(dòng)相，結(jié)果以乙腈-0.1%磷酸溶液（38：62）為流動(dòng)相為流動(dòng)相，供試品各峰分離效果最好，故選用乙腈-0.1%磷酸溶液（38：62）為流動(dòng)相為流動(dòng)相。本實(shí)驗(yàn)采用高效液相法效果好、方法簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確、專(zhuān)屬性好，可用于養(yǎng)脾散中桂皮醛的含量測(cè)定。

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