老年腦惡性膠質(zhì)瘤患者血清TGF-β和GFAP的表達(dá)及與臨床預(yù)后的關(guān)系

張極星 張淑榮 趙 亮 黃麗娟 王占強(qiáng) 高鳳全 (齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院神經(jīng)外科，黑龍江 齊齊哈爾 6000)

腦膠質(zhì)瘤約占顱腦腫瘤的60%，在顱腦各部位均可能發(fā)生。近年來(lái)老年患者的發(fā)病率逐年增加，且老年患者身體各項(xiàng)功能下降明顯，化療耐受力較差，常出現(xiàn)意識(shí)障礙、高熱、肺部感染等并發(fā)癥，預(yù)后較差〔1〕。根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)分級(jí)將腦膠質(zhì)瘤分為Ⅰ～Ⅳ級(jí)，其中Ⅲ～Ⅳ級(jí)為腦惡性膠質(zhì)瘤〔2〕。手術(shù)是臨床治療腦惡性膠質(zhì)瘤的關(guān)鍵，手術(shù)后同步進(jìn)行放化療具有較好的臨床療效，能有效改善患者的預(yù)后〔3〕。治療后應(yīng)及時(shí)隨訪患者的情況，觀察是否存在復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)而及早進(jìn)行干預(yù)延長(zhǎng)患者的生命〔4〕。然而，術(shù)后病理組織取材較麻煩，因此尋找血清學(xué)標(biāo)志物來(lái)監(jiān)測(cè)患者的預(yù)后具有重要意義。血清膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)是一種星形膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)志蛋白，當(dāng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷時(shí)會(huì)表達(dá)升高，腦膠質(zhì)瘤患者GFAP也會(huì)明顯升高，且具有較高的特異性〔5〕。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-β與多種腫瘤發(fā)生和發(fā)展存在較大關(guān)系，與腦惡性膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展也存在一定關(guān)系〔6，7〕。本研究旨在分析腦惡性膠質(zhì)瘤患者血清TGF-β和GFAP的表達(dá)及其與臨床預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2011年1月至2014年1月選取齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院進(jìn)行治療的老年腦膠質(zhì)瘤患者70例作為研究組。納入標(biāo)準(zhǔn):①年齡≥60歲;②均經(jīng)病理確診為腦膠質(zhì)瘤;③分級(jí)為Ⅲ～Ⅳ級(jí);④患者及家屬均知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn):①不能耐受手術(shù)者;②術(shù)后未接受放化療者;③存在其他部位惡性腫瘤者。研究組男37例，女33例，年齡60～78歲，平均(67.3±3.5)歲，隨訪3年，根據(jù)患者生存期分為預(yù)后良好組25例(生存期≥3年)和預(yù)后不良組45例(生存期＜3年)。另選取健康體檢者60例為對(duì)照組，其中男32例，女28例，年齡61～78歲，平均(66.9±3.2)歲。各組一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P＞0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法 所有患者行手術(shù)治療，手術(shù)后2～4 w開始進(jìn)行放化療治療，放化療前行CT檢查定位，根據(jù)手術(shù)殘留腫瘤及術(shù)前水腫情況進(jìn)行放療治療，給予電子直線加速器6MVX進(jìn)行曲線60 Gy/30 F 95%劑量照射，2 Gy/次，每天1次，每周照射5 d，連續(xù)治療6 w;放療2 w后進(jìn)行序貫化療，口服替莫唑胺(江蘇天士力帝益藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20040637，規(guī)格:50 mg)150～200 mg/m2，每天 1次，每周治療5 d，4 w 為 1個(gè)療程，共化療6個(gè)療程。

1.3 療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 近期療效采用WHO制定的實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定，完全緩解(CR):病灶消失且無(wú)新的病灶出現(xiàn)，維持時(shí)間超過(guò)4 w;部分緩解(PR):病灶縮小50%以上且無(wú)新的病灶出現(xiàn)，維持時(shí)間超過(guò)4 w;穩(wěn)定(SD):病灶縮小不足50%或增大不足25%，且無(wú)新的病灶出現(xiàn);進(jìn)展(PD):病灶增大超過(guò)25%或有新的病灶出現(xiàn)。

1.4 觀察指標(biāo) 術(shù)前、術(shù)后1 w、放化療后清晨抽取兩組空腹靜脈血3 ml，3 000 r/min離心10 min，分離血清后放置在－20℃環(huán)境中待用。血清TGF-β、GFAP水平采用雙抗體夾心法檢測(cè)，應(yīng)用上海生物技術(shù)有限公司提供的試劑，嚴(yán)格根據(jù)試劑說(shuō)明進(jìn)行操作。比較各組TGF-β、GFAP水平。放化療結(jié)束后1個(gè)月分析不同療效等級(jí)患者血清TGF-β、GFAP的差異。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、單因素方差分析。

2 結(jié)果

2.1 兩組TGF-β、GFAP水平比較 研究組術(shù)前TGF-β、GFAP水平均明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

2.2 研究組不同時(shí)期TGF-β、GFAP水平比較 術(shù)后1 w TGF-β、GFAP水平顯著低于術(shù)前，放化療后顯著低于術(shù)后1 w(P＜0.05)，見表1。

2.3 不同預(yù)后患者TGF-β、GFAP水平比較 預(yù)后良好組TGF-β、GFAP水平顯著低于預(yù)后不良組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

2.4 不同療效等級(jí)患者血清TGF-β、GFAP水平比較研究組CR 30例，PR 15例，SD 14例，PD 11例。不同療效等級(jí)患者血清TGF-β、GFAP水平整體比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);CR、PR、SD、PD患者血清TGF-β、GFAP水平呈增高趨勢(shì)，兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表3。

表1 兩組TGF-β、GFAP水平比較(ng/L，)

表1 兩組TGF-β、GFAP水平比較(ng/L，)

與研究組術(shù)前比較:1)P＜0.05;與術(shù)后1 w比較:2)P＜0.05

組別 n TGF-β GFAP研究組 術(shù)前 70 53.89±2.08 83.95±1.04術(shù)后 1 w 70 20.76±0.761) 54.73±0.351)放化療后 70 10.07±1.041)2) 6.28±0.671)2)對(duì)照組 60 5.03±0.121) 6.03±0.551)

表2 不同預(yù)后患者TGF-β、GFAP水平比較(ng/L，)

表2 不同預(yù)后患者TGF-β、GFAP水平比較(ng/L，)

與預(yù)后不良組比較:1)P＜0.05

組別 n TGF-β GFAP預(yù)后良好組 25 38.08±2.421) 69.35±3.641)預(yù)后不良組 45 61.79±4.25 98.52±5.08

表3 不同療效等級(jí)患者血清TGF-β、GFAP比較(ng/L，)

表3 不同療效等級(jí)患者血清TGF-β、GFAP比較(ng/L，)

與CR比較:1)P＜0.05;與 PR比較:2)P＜0.05;與 SD比較:3)P＜0.05

療效等級(jí) n TGF-β GFAP CR 30 32.14±10.23 42.64±20.54 PR 15 36.57±12.15 53.14±35.67 SD 14 45.38±15.671) 67.58±50.36 PD 11 68.54±18.411)2)3) 95.63±61.431)2)F/P值 21.133/0.000 25.309/0.000

3 討論

腦惡性膠質(zhì)瘤的生長(zhǎng)生物學(xué)特征呈侵襲性，和正常的腦部組織較難區(qū)分，也無(wú)明顯的差別，尤其是某些位置比較重要的腫瘤〔8〕。手術(shù)是臨床上治療腦惡性膠質(zhì)瘤的重要方法，但是對(duì)于重要部位腫瘤較難完全切除，手術(shù)治療效果較差，尤其對(duì)于老年患者。因此，手術(shù)后多給予放化療綜合治療，以鞏固術(shù)后治療效果。且放化療后需要密切監(jiān)測(cè)患者的情況，降低腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的可能性，但是腦惡性膠質(zhì)瘤術(shù)后病理取材較復(fù)雜，需要尋求重要的血清學(xué)指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)治療效果，并觀察患者的預(yù)后〔9〕。GFAP是星形膠質(zhì)細(xì)胞的重要成分之一，主要由天冬氨酸和谷氨酸組成，于1971年首次從星形膠質(zhì)細(xì)胞中分離，并逐漸被人們認(rèn)知了解，作為星形膠質(zhì)細(xì)胞的特異性標(biāo)志物〔10，11〕。

近年來(lái)研究顯示〔12〕，腦組織缺血損傷時(shí)GFAP水平升高，與腦組織缺血損傷后星形膠質(zhì)細(xì)胞出現(xiàn)破壞有關(guān)。星形膠質(zhì)細(xì)胞破壞后GFAP會(huì)被大量釋放，導(dǎo)致腦積液中GFAP水平升高，通過(guò)血腦屏障進(jìn)入血液，導(dǎo)致血清中GFAP水平升高〔13〕。腦惡性膠質(zhì)瘤患者星型膠質(zhì)細(xì)胞水平明顯升高，GFAP水平也會(huì)明顯升高，因此GFAP對(duì)腦惡性膠質(zhì)細(xì)胞瘤具有診斷作用。TGF-β與血管生成具有較大關(guān)系，腫瘤形成和發(fā)展過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)新生血管生成，腫瘤轉(zhuǎn)移也會(huì)存在血管生成。檢測(cè)TGF-β水平或可觀察腫瘤發(fā)生和發(fā)展情況。本研究說(shuō)明腦惡性膠質(zhì)瘤患者血清中會(huì)出現(xiàn)TGF-β、GFAP水平升高，分析其原因?yàn)?腦惡性膠質(zhì)瘤患者會(huì)出現(xiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞大量增殖，而GFAP是星形膠質(zhì)細(xì)胞的標(biāo)志性物質(zhì)，因此也會(huì)隨之明顯升高，腦惡性膠質(zhì)瘤在發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)血管增殖，而TGF-β與血管增殖有關(guān)，因此腦惡性膠質(zhì)瘤患者會(huì)出現(xiàn)TGF-β水平升高〔14，15〕。同時(shí)，本研究說(shuō)明腦惡性膠質(zhì)瘤患者治療后會(huì)出現(xiàn)TGF-β、GFAP水平降低。在行手術(shù)或放化療治療后，腫瘤細(xì)胞會(huì)明顯減少，且治療效果越好，腫瘤縮小程度越大甚至可完全消失，因此GFAP作為星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志性物質(zhì)也會(huì)減少，腫瘤細(xì)胞減少血管也會(huì)隨著減少，TGF-β水平也隨之降低，且TGF-β、GFAP減少的程度與治療效果有關(guān)。本研究還說(shuō)明TGF-β、GFAP水平與腦惡性膠質(zhì)瘤患者的預(yù)后有關(guān)，分析其原因?yàn)?腦惡性膠質(zhì)瘤患者惡性程度較高，生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移速度也較快，患者預(yù)后也較差，生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移速度快患者 TGF-β、GFAP水平也會(huì)升高〔16〕，因此預(yù)后不良者TGF-β、GFAP水平明顯高于預(yù)后良好者。另外本研究說(shuō)明TGF-β、GFAP的表達(dá)與患者的近期療效有關(guān)，進(jìn)一步證明TGF-β、GFAP參與了腦惡性膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展，但其具體機(jī)制仍需進(jìn)一步研究明確。