細(xì)胞塊切片免疫組化染色在胸腔積液病理診斷中的應(yīng)用

郭仁杰 吳 寧 陳 清

（莆田市第一醫(yī)院病理科，福建 莆田 351100）

導(dǎo)致患者出現(xiàn)胸腔積液的主要原因有患者患有惡性胸膜間皮瘤、非小細(xì)胞肺癌。當(dāng)然也可能來源于乳腺癌和其他病變?？偠灾厍环e液患者的病情都相對來說較為嚴(yán)重，預(yù)后大都不良，不同的病情需要盡早采取不同的治療方法[1]。對胸腔積液患者進(jìn)行病因診斷時，傳統(tǒng)診斷方法就是選擇采用細(xì)胞涂片檢查，這種診斷方法無法較好地對胸腔積液患者的間皮性腫瘤和轉(zhuǎn)移癌等進(jìn)行鑒別，那么會對患者進(jìn)行治療產(chǎn)生一定的影響。而細(xì)胞塊免疫組化染色則能夠較為準(zhǔn)確的對于間皮性腫瘤和轉(zhuǎn)移性癌進(jìn)行甄別和判斷，具有較高的敏感性。因此本研究基于此分析細(xì)胞塊切片免疫組化染色在胸腔積液病理診斷中應(yīng)用的價值，并將結(jié)果作出如下的報道。

1 資料與方法

1.1 一般資料：本研究的所有研究對象均選自我院在2015年3月至2017年3月收治的胸腔積液患者，對于所有患者臨床資料進(jìn)行分析。本研究50例患者中，男性患者28例，女性患者22例，患者的最大年齡為75歲，最小年齡為18歲，患者的平均年齡為（56.7±14.2）歲。本研究所有患者對本研究知情，并且在知情同意書上簽字，本研究通過我院倫理委員會的認(rèn)可和批準(zhǔn)。

1.2 方法：對所有患者采集胸腔積液一般在晨起采集胸腔積液50 mL，將胸腔積液劃分為5個試管，并且分別進(jìn)行離心處理，大約處理10 min，離心處理的轉(zhuǎn)速為3000 r/min。吸出離心以后的上清液，對于部分沉渣進(jìn)行細(xì)胞涂片，并做好相關(guān)的檢查。之后加入戊二醛在剩余的沉渣當(dāng)中，劑量大約為2.5 mL，此時再一次進(jìn)行離心處理，時間大約為5 min，同樣為3000 r/min。取出上清液以后，將沉渣取出，采用濾紙進(jìn)行包裹，對沉渣進(jìn)行常規(guī)脫水處理，并且采用石蠟包埋切片，進(jìn)行HE染色。免疫組化時，選擇采用Maxvision進(jìn)行染色，采用相應(yīng)的DAB顯色試劑和試劑盒，WT-1、CK7、CEA等抗體均來源于基因公司。在進(jìn)行染色處理的時候，需要嚴(yán)格的按照相關(guān)的說明書和操作說明進(jìn)行操作。

1.3 觀察指標(biāo)：對本研究的兩種檢測方法的檢測結(jié)果進(jìn)行分析和比較，其主要涉及到的項(xiàng)目主要是CK7、Desmin、CK5/6、WT-1、Calretinin、CEA、TTF-1、BerEP4、MOC-31、CD15等指標(biāo)。需要注意，CEA、CK7在包膜或者是包漿上表現(xiàn)為棕黃色的時候，顯示為陽性；而WT-1在胞核上表現(xiàn)為棕黃色顆粒，表示陽性；Calretinin在胞核、胞膜或胞質(zhì)上表現(xiàn)為黃色為陽性；腺癌細(xì)胞或間皮細(xì)胞在10%以上為陽性[2]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析：本研究所有數(shù)據(jù)調(diào)入統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理分析，研究采用統(tǒng)計學(xué)軟件版本為IBM SPSS23.0，P＜0.05為差異明顯，具有統(tǒng)計學(xué)意義。

表1 本研究兩種診斷方法的病理結(jié)果比較（n=50）

2 結(jié) 果

本研究選擇采用細(xì)胞塊免疫組化染色檢測，陽性率要明顯優(yōu)于常規(guī)的細(xì)胞涂片檢測的陽性率，二者之間比較具有差異性，納入統(tǒng)計學(xué)軟件比較，P＜0.05，具有統(tǒng)計學(xué)意義；對兩種方法對患者胸腔積液進(jìn)行診斷，診斷的病理結(jié)果相比存在差異性，P＜0.05，具有統(tǒng)計學(xué)意義。見表1。

3 討 論

胸腔積液細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)是具有樣本采集容易的特點(diǎn)，其制備也相對來說較為簡單，所以細(xì)胞學(xué)涂片檢查對于病理檢驗(yàn)來說，應(yīng)用得較為廣泛。但是采用細(xì)胞學(xué)涂片方法檢驗(yàn)，其敏感率相對較低，僅僅只有50%，最高不超過80%[3]。而導(dǎo)致細(xì)胞涂片檢查敏感率較低的主要原因就是因?yàn)樵跈z測的過程當(dāng)中，間皮腫瘤的細(xì)胞形態(tài)和轉(zhuǎn)移性癌的細(xì)胞形態(tài)具有較高的相似處，還有可能受到細(xì)胞量少以及背景不清晰等條件干擾，所以鑒別的時候相對較為困難，這也使得在進(jìn)行HE染色的時候，對患者胸腔積液病因的判斷存在有較大的困難。因?yàn)檗D(zhuǎn)移性癌和間皮性腫瘤存在有差異性，所以強(qiáng)化對這兩種不同類型疾病進(jìn)行鑒別診斷，盡早明確胸腔積液來源，對患者治療及預(yù)后有很大的意義。

細(xì)胞塊免疫組化染色，對胸腔積液患者的明確診斷，具有較高的臨床意義，特別是對于間皮性腫瘤和轉(zhuǎn)移性腺癌這兩種疾病診斷的敏感性相對較好。細(xì)胞塊切片能使細(xì)胞更多，分布較為均勻，且可保持原有的細(xì)胞排列與組織結(jié)構(gòu)，細(xì)胞形態(tài)與組織切片效果相似，在進(jìn)行疾病的診斷和鑒別的時候，根據(jù)較為清晰的細(xì)胞形態(tài)就能夠加以觀察。與此同時，選擇細(xì)胞塊免疫組化染色方法，對胸腔積液在進(jìn)行檢查的時候，因?yàn)榧?xì)胞分布比較均勻，那么就能有效地避免出現(xiàn)假陽性的情況，有助于對于胸腔積液的細(xì)胞性質(zhì)和類型進(jìn)行判斷，這樣就能提高胸腔積液治療的診斷依據(jù)。

從本研究的研究結(jié)果可以看出，細(xì)胞塊免疫組化的染色，在胸腔積液檢測當(dāng)中應(yīng)用，陽性率明顯比常規(guī)細(xì)胞涂片檢測陽性率更高，這兩種方法對于胸腔積液患者進(jìn)行檢測病理結(jié)果相比，也存在差異性。

綜上所述，細(xì)胞塊免疫組化染色在胸腔積液的細(xì)胞塊病理檢測當(dāng)中進(jìn)行應(yīng)用具有較為典型的應(yīng)用價值，這種方法能夠提升患者的惡性間皮病變和肺腺癌的鑒別率，因此能夠當(dāng)作是胸腔積液患者治療的有效診斷方法，可以加以推廣使用。