XE-5000血細(xì)胞分析儀檢測血小板假性增多2例分析

樸桂花 李強(qiáng)

血小板計(jì)數(shù)是臨床常規(guī)的檢查項(xiàng)目，血小板數(shù)量與疾病發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后有著密切的關(guān)系，結(jié)果準(zhǔn)確與否，直接關(guān)系到臨床醫(yī)生對(duì)疾病的診斷和治療。隨著全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的廣泛運(yùn)用，也出現(xiàn)了許多新的問題[1]。檢驗(yàn)人員不能一味的完全相信儀器測定出的檢驗(yàn)結(jié)果，一定要熟悉儀器的性能，尤其是血小板直方圖的變化。本文通過對(duì)我院2例血小板假性增多病例分析，探討全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測血小板計(jì)數(shù)的影響因素，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 檢測對(duì)象

收集我院2017年6月—2018年3月門診和住院患者，發(fā)現(xiàn)XE-5000檢測首次血小板計(jì)數(shù)＞1 000×109/L的患者2例，1例男1歲，兒科支氣管肺炎住院患者；另1例女51歲，門診呼吸內(nèi)科患者。

1.2 儀器和試劑

XE-5000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及原裝配套試劑；質(zhì)控品（System公司生產(chǎn)）；OLYMPUS CX41顯微鏡；瑞氏-姬姆薩染液（珠海貝索生物技術(shù)有限公司）；1%草酸銨稀釋液。儀器嚴(yán)格按要求進(jìn)行維護(hù)和保養(yǎng)，室間質(zhì)評(píng)、室內(nèi)質(zhì)控在控，確保儀器及試劑穩(wěn)定可靠。

1.3 檢測方法

按要求采集EDTA-K2 抗凝血2 ml混勻，按照XE-5000血細(xì)胞分析儀的操作規(guī)程檢測血常規(guī)[包含血小板（PLT）、血紅蛋白（HGB）、平均紅細(xì)胞體積（MCV）等26項(xiàng)]，將2份血樣再分別用電阻抗法（PLT-I）和激光流式法（PLT-O）兩種方法檢測血小板，均測定兩次，結(jié)果取平均值；每一份樣本在儀器檢測后參照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[2]，由2位經(jīng)驗(yàn)豐富的主管檢驗(yàn)師進(jìn)行血涂片瑞氏-姬姆薩染色鏡檢，觀察破碎紅細(xì)胞、血小板大小形態(tài)及分布情況，并進(jìn)行手工鏡檢計(jì)數(shù)求平均值。查證低色素小紅細(xì)胞碎片對(duì)血小板計(jì)數(shù)的影響。

2 結(jié)果

2例樣本血小板四種方法計(jì)數(shù)結(jié)果（PLT-I法、PLT-O法、手工鏡檢法和血涂片法）及HGB、MCV結(jié)果，見表1。

2.1 確定假性增多

對(duì)2例血涂片進(jìn)行染色鏡檢，發(fā)現(xiàn)例1（男1歲）患者成熟紅細(xì)胞有中等程度以上大小不均，以小紅細(xì)胞為主，多見紅細(xì)胞碎片；例2（女51歲）患者成熟紅細(xì)胞明顯大小不一，小異形紅細(xì)胞多見，細(xì)胞碎片極多見；兩例血涂片PLT分布均勻，形態(tài)大致正常，血涂片驗(yàn)證紅細(xì)胞碎片增多，干擾儀器所致血小板假性增多。

2.2 準(zhǔn)確計(jì)數(shù)PLT

血細(xì)胞分析儀兩種方法（PLT-I和PLT-O）檢測和手工鏡檢比較發(fā)現(xiàn)，2例均為血小板假性增多，PLT-O法與手工鏡檢結(jié)果更相符，其中HGB越低、MCV越?。ǎ?0 fL），小異形紅細(xì)胞及細(xì)胞碎片數(shù)量越多（見表1數(shù)據(jù)），干擾儀器，不能被儀器正確識(shí)別，而被誤認(rèn)為是PLT所致。這與張福新[3]的報(bào)道結(jié)果相似。且儀器多會(huì)提示，在PLT直方圖的右方呈一高峰，呈拖尾狀或鋸齒狀波峰。見圖1和圖2。

圖1 例1血小板直方圖

圖2 例2血小板直方圖

3 討論

表1 2例患者HGB、MCV及4種方法血小板計(jì)數(shù)（X109/L）結(jié)果

血小板計(jì)數(shù)是血常規(guī)中重要的項(xiàng)目之一，血小板的主要功能是凝血和止血作用，修補(bǔ)破損的血管，對(duì)血栓與出血性疾病的診斷和治療有重要的參考價(jià)值[4]。因此準(zhǔn)確計(jì)數(shù)PLT具有極其重要的意義。使用血細(xì)胞分析儀檢測血小板的數(shù)量具有速度快、操作簡便、工作效率高等特點(diǎn)[5]。但由于儀器自身檢驗(yàn)原理的限制，其檢出結(jié)果會(huì)受到多種因素的影響，導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)結(jié)果偏高[6]。本文2例血小板假性增多樣本是由sysmex XE-5000檢測，XE-5000血細(xì)胞分析儀在血小板檢測通道采用鞘流電阻抗（PLT-I）、在網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測通道采用熒光染色結(jié)合激光流式法（PLT-O）兩種方法計(jì)數(shù)血小板。鞘流電阻抗法能有效避免細(xì)胞重疊、側(cè)向或反流，通過檢測部產(chǎn)生的脈沖誤差，使檢測結(jié)果更準(zhǔn)確，而由于電阻抗法不能分辨顆粒內(nèi)部結(jié)構(gòu)和形態(tài)，故儀器不能真正區(qū)分小紅細(xì)胞和血小板。它只能檢出正常體積2～20 fL范圍內(nèi)的血小板，而將25～250 fL范圍的顆粒判定為紅細(xì)胞，由于此法RBC與PLT檢測在同一通道，所以小紅細(xì)胞及細(xì)胞碎片對(duì)PLT計(jì)數(shù)影響很大，紅細(xì)胞體積偏小時(shí)，儀器會(huì)將小紅細(xì)胞誤認(rèn)為血小板，使血小板假性增多，而且MCV越小，對(duì)血小板計(jì)數(shù)影響越大，血小板假性增多就越多；而在網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測通道的激光流式法因采用了DNA/RNA核酸熒光染色，因此對(duì)一些臨床特殊樣本如出現(xiàn)較多的細(xì)胞碎片、小紅細(xì)胞、巨大血小板樣本及脂類與蛋白的聚合體、免疫復(fù)合物等有較強(qiáng)的抗干擾能力，能夠提供更為準(zhǔn)確的血小板計(jì)數(shù)結(jié)果[7-9]。2005年國際血液學(xué)組織提出了顯微鏡復(fù)檢的41條建議性標(biāo)準(zhǔn)，得到了中國血液檢驗(yàn)學(xué)界的密切關(guān)注。復(fù)檢規(guī)則要求，對(duì)于首次檢測血小板計(jì)數(shù)＞1 000×109/L 應(yīng)涂片復(fù)檢[10]，本文按規(guī)則在工作中收集2例PLT＞1 000×109/L，同時(shí)HGB減低伴隨MCV明顯減低＜70 fL以下，PLT直方圖都提示有大血小板或破碎紅細(xì)胞出現(xiàn)，PLT-O法與顯微鏡手工鏡檢計(jì)數(shù)血小板結(jié)果較為一致；當(dāng)PLT明顯增多時(shí)，PLT-O法更能準(zhǔn)確計(jì)數(shù)血小板。但在目前的臨床工作中，PLT-I是檢測血小板的常規(guī)方法，對(duì)于血液病患者和一些HGB偏低、MCV偏低＜70 fL、混有細(xì)胞碎片、大血小板、小球形紅細(xì)胞的特殊樣本，建議用XE-5000的PLT-O法進(jìn)行檢測，必要時(shí)配合顯微鏡鏡檢[11]，從而使血小板計(jì)數(shù)結(jié)果更準(zhǔn)確更可靠。

另外注意血液樣本的放置時(shí)間，以免放置時(shí)間過長而導(dǎo)致RBC破壞，影響PLT計(jì)數(shù)呈假性增多現(xiàn)象。此外，檢測室的溫度、空氣的塵埃顆粒及電磁波干擾均易對(duì)血小板計(jì)數(shù)產(chǎn)生影響，所以檢測時(shí)應(yīng)注意盡量排除此類因素的干擾[12]。

綜上所述，在保證血細(xì)胞分析儀正常運(yùn)行的同時(shí)，檢測中發(fā)現(xiàn)血紅蛋白（HGB）偏低、紅細(xì)胞平均體積（MCV）偏低（＜70 fL）、PLT異常增多的結(jié)果，在儀器提示有異常直方圖時(shí)，應(yīng)及時(shí)分析可能的影響因素，建議應(yīng)用XE-5000的PLT-O法進(jìn)行復(fù)檢，必要時(shí)配合顯微鏡手工鏡檢，以得出準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果，避免血小板假性增多造成臨床誤診誤治。