LIF和VEGF在子癇前期患者胎盤中的表達及其相關(guān)性

李夏芳 王建中 郭廣秀 徐敏娟 張春年 龐秀賢 劉傳鑫

子癇前期可導致子癇、 HELLP 綜合征、 視網(wǎng)膜剝離甚至失明、 心肝腎等功能衰竭、 腦血管意外、胎盤早剝、FGR、胎兒宮內(nèi)窘迫、甚至胎死宮內(nèi)等，是導致孕產(chǎn)婦及圍產(chǎn)兒發(fā)病和死亡的主要原因之一[1]。其發(fā)病機制目前尚未明了，有多種學說，目前較公認的學說是胎盤缺血學說，該學說認為： 滋養(yǎng)細胞浸潤能力降低、 胎盤絨毛著床淺、 胎盤血管床的生理性重鑄障礙，最終引起胎盤組織缺血缺氧，發(fā)展成子癇前期[2]。LIF能增強滋養(yǎng)細胞的浸潤能力，有利于胎盤絨毛著床及胎盤血管床重鑄。VEGF有促進血管內(nèi)皮細胞分裂增殖、 促進血管形成、 增加血管通透性等功能[3-5]。本次研究中，以對LIF和VEGF在子癇前期患者胎盤中的表達及其相關(guān)性進行分析探討為目的，對子癇前期患者以及同期健康體檢者展開了胎盤組織LIF和VEGF水平檢測，并對檢測結(jié)果進行了統(tǒng)計分析，結(jié)果匯報如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究中資料來源于我院收治的選擇性剖宮產(chǎn)的子癇前期孕婦和同期正常晚期妊娠孕婦，各選擇28例作為研究對象，分別定義為觀察組和對照組。在對照組中，孕婦年齡在23～42歲之間，平均(29.7±3.2)歲，孕周36～41周，平均(39.4±1.2)周；觀察者中，孕婦年齡在23～41歲之間，平均(29.3±4.2)歲，孕周35～41周，平均(38.7±1.5)周，包括重度子癇前期患者14例，輕度子癇前期患者14例。所有受試者年齡、孕周等指標比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，存在可比性，所有受試者均自愿接受臨床檢查，并簽署了知情同意書，符合醫(yī)院倫理委員會要求。

1.2 方法

1.2.1 研究方法 選擇2017年1月—2018年1月于我科住院選擇性剖宮產(chǎn)的子癇前期孕婦和同期正常晚期妊娠孕婦(無產(chǎn)科并發(fā)癥及內(nèi)外科并發(fā)癥)為研究對象，分別定義為觀察組和對照組，在胎盤娩出后，取胎盤組織進行組織中LIF和VEGF表達水平進行檢測，并對檢測結(jié)果展開對比分析。

1.2.2 檢查方法 在胎盤娩出后，立即切取一塊臍帶附著處胎盤母體面 (避開梗死、鈣化區(qū))的胎盤組織，大小約1 cm×1 cm×1 cm，用無菌生理鹽水充分漂洗后置入 10%甲醛溶液中固定，石蠟包埋，4 mm連續(xù)切片。

采用免疫組織化學染色 SP 法，對兩組研究對象胎盤組織中的 LIF 和 VEGF 水平進行檢測，常規(guī)切片、烤片、脫蠟、水化，檸檬酸微波修復抗原；3%過氧化氫：阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性，PBS 沖洗 3 min×3 次；除去PBS 液，滴加一抗(COX-2、 PTEN 工作液)，4℃過夜，PBS 沖洗 3 min×3 次；滴加生物素標記二抗，室溫孵育15 min，PBS 沖洗 3 min×3 次，滴加 DAB 液，進行 DAB 顯色，自來水沖洗，蘇木精復染，中性樹膠封片，顯微鏡下觀察結(jié)果。由試劑公司提供陽性對照片，以 PBS代替一抗作陰性對照。

1.3 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果

子癇前期患者胎盤組織中LIF和VEGF水平較對照組發(fā)生顯著降低(P<0.05)；重度子癇前期患者胎盤組織中LIF和VEGF水平低于輕度子癇前期患者(P<0.05)。見表1。

表1 兩組受試者胎盤組織中LIF和VEGF水平檢測結(jié)果比較

注：與重度子癇前期比較，1)差異存在統(tǒng)計學意義(P<0.05)

3 討論

關(guān)于子癇前期的發(fā)病機制，目前有以下幾種學說： 胎盤缺血學說、 遺傳易感學說、 氧化應激學說、免疫適應不良學說。其中胎盤缺血學說是目前較公認的學說之一，該學說認為： 在女性整個妊娠過程中，滋養(yǎng)細胞入侵子宮蛻膜分兩個階段：第一階段是孕早期受精卵種植子宮蛻膜的過程。第二階段是孕14～16周期間合體滋養(yǎng)細胞入侵子宮螺旋動脈，使它失去正常的肌層結(jié)構(gòu)，并且取代它的內(nèi)皮細胞，這就是生理性血管重鑄，螺旋動脈重鑄后血管直徑增加，血管橫截面積將增加4～6 倍，導致胎盤血流阻力降低，血流量明顯增加，有利于妊娠的維持[5-7]。

LIF是1984年被發(fā)現(xiàn)的一種分泌型糖蛋白，它是一種分布廣泛且生物學功能較多的細胞因子，之所以稱之為白血病抑制因子，是因為研究發(fā)現(xiàn)它可以促進小鼠 M1 型白血病細胞分化，同時還可抑制其增殖[8]。 LIF 在子宮內(nèi)膜功能的調(diào)節(jié)方面發(fā)揮著重要作用，可能在人類的生殖活動中起著關(guān)鍵作用,這種作用甚至貫穿于整個妊娠過程,從而有利于正常妊娠的維持[9]。

VEGF具有以下功能:①促進凋亡抑制基因Bcl-2的表達,從而抑制血管內(nèi)皮細胞的凋亡,使內(nèi)皮細胞分裂增殖； 促進血管臨時基質(zhì)的形成,通過促進內(nèi)皮細胞的生成及血管臨時基質(zhì)的形成而促進新生血管的生成[10-11]。 ②誘導血管內(nèi)皮細胞產(chǎn)生尿激酶型纖溶酶原激活物,降解基底膜和細胞外基質(zhì)，從而使血管的通透性增高。 VEGF 被認為是促進新生血管形成及維持內(nèi)皮細胞功能穩(wěn)定的重要細胞因子[12]。

采用免疫組化 SP 法檢測 LIF 和 VEGF 在子癇前期和正常妊娠孕婦胎盤組織中的表達情況,并分析兩因子表達的相關(guān)性,若證實二者在子癇前期孕婦的胎盤組織中低表達且表達具有相關(guān)性,則有助于揭示子癇前期發(fā)病機制,并可用于子癇前期的早期診斷，同時為子癇前期的治療提供新思路。

本次研究中，以對LIF和VEGF在子癇前期患者胎盤中的表達及其相關(guān)性進行分析探討為目的，對子癇前期患者以及同期健康體檢者展開了胎盤組織LIF和VEGF水平檢測，并對檢測結(jié)果進行了統(tǒng)計分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，子癇前期患者胎盤組織中LIF和VEGF水平較對照組發(fā)生顯著降低；重度子癇前期患者胎盤組織中LIF和VEGF水平低于輕度子癇前期患者。這一結(jié)果與相關(guān)文獻[13]報道結(jié)果相似，由此證實,LIF和VEGF水平在子癇發(fā)生以及病情演變中，產(chǎn)生了重要影響，在臨床診療工作中，應對其給予足夠的重視。