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    西蘭花提取液對小鼠肝臟的影響

    2018-09-25 01:16:14鄭雨,魏琳,鄧薇,李雪,宮汝淳,苗婷婷
    吉林農(nóng)業(yè) 2018年18期
    關(guān)鍵詞:肝損傷二甲基甲酰胺

    鄭雨,魏琳,鄧薇,李雪,宮汝淳,苗婷婷

    摘要:探討西蘭花提取液對二甲基甲酰胺(DMF)誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷模型的保護作用。方法:60只小鼠隨機分為空白對照組、模型組、高、中、低濃度組及陽性藥物組。通過DMF致小鼠肝損傷,測定小鼠血清中GPT、GOT及GSH的含量。結(jié)果顯示:西蘭花提取液能顯著抑制DMF所致急性肝損傷小鼠血清中的GPT、GOT含量的升高,還可以促進GSH含量的升高,且有明顯促進肝功能恢復(fù)的作用。光鏡下可見西蘭花提取液明顯改善肝組織損傷程度。結(jié)論:西蘭花提取液對DMF引起的小鼠肝損傷具有保護作用。

    關(guān)鍵詞:西蘭花提取液;二甲基甲酰胺;肝損傷

    基金項目:吉林省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃(編號: 2017093039)

    中圖分類號: R730 文獻標(biāo)識碼: A DOI編號: 10.14025/j.cnki.jlny.2018.18.023

    西蘭花又名綠菜花、意大利芥蘭等,是一年生或越年生草本植物[1]。西蘭花含有豐富的營養(yǎng)成分,如植物性優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)、脂肪、礦物質(zhì)、維生素、胡蘿卜素、類黃酮、硒等,最突出的有效成分是芥子油苷和黃酮類化合物[2]。據(jù)報道,西蘭花對保護血液有益,能解毒肝臟、預(yù)防高血壓、清化血管、增強機體免疫力[3]。近年來西蘭花防癌抗癌的作用被重點研究,但是還有很多值得被研究的藥理作用。本實驗通過DMF致小鼠肝損傷,測定小鼠血中GPT、GOT及GSH的含量,探討了西蘭花提取液對小鼠急性肝損傷的保護作用,為進一步研究西蘭花的藥用價值提供理論依據(jù)。

    1 實驗材料

    1.1實驗動物及藥品

    健康CD小鼠60只,雄性,體重(18±2)g。

    二甲基甲酰胺,護肝片,微量還原型谷胱甘肽測試盒,谷丙轉(zhuǎn)氨酶測試盒,谷草轉(zhuǎn)氨酶。

    1.2 實驗儀器

    徠卡冰凍切片機;生物顯微鏡;半自動生化分析儀;離心機等。

    2實驗方法

    2.1西蘭花提取液制備

    將西蘭花90g,加水910ml,置于文火煮30min,過濾,反復(fù)3次,合并3次濾液得到高濃度西蘭花提取液,分別稀釋,得到中、低濃度西蘭花提取液。

    2.2動物分組及給藥

    將小鼠隨機分為6組,模型組和高、中、低濃度組用DMF進行造模,濃度為2.5g/kg,早、晚各一次;空白組灌胃等體積蒸餾水,共7d。造模完成灌胃西蘭花提取液,高、中、低濃度組分別灌胃濃度為9%的西蘭花提取液,陽性藥物組灌胃濃度為0.0175g/mL的護肝片。15d后取各組小鼠進行斷頭取血,制備血清用于谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)和還原型谷胱甘肽(GSH)的檢測,然后對肝組織切片進行觀察。

    2.3冰凍切片的制作

    小鼠斷頭取血后,剖腹分離出肝臟組織,置于10%戊二醛中,然后用包埋劑包埋,冰凍切片機切5um厚切片,利用結(jié)晶紫染色。

    2.4生化指標(biāo)的測定

    藥物入血15d,斷頭取小鼠血0.5ml離心1min,12000r/min,取上清液用半自動生化分析儀測血清中GPT、GOT、GSH含量的變化。

    2.5數(shù)據(jù)處理

    采取SPSS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),進行t檢驗,結(jié)果以(x±s)表示。

    3 結(jié)果與分析

    3.1西蘭花提取液對小鼠血清中GPT、GOT、GSH含量的影響

    GPT、GOT、GSH的絕對OD值(x±s)

    從上表可以看出:西蘭花提取液高濃度組、陽性藥物組的GPT、GOT、GSH的OD值與模型組和空白組比較有極顯著差異(P<0.01),中濃度組與模型組和空白對照組比較有顯著差異(P<0.05),而低濃度組沒有差異。

    3.2 西蘭花提取液對小鼠肝組織形態(tài)學(xué)的影響

    將染色后的切片在(10×10)倍顯微鏡下進行觀察,結(jié)果見圖1。

    觀察空白組和陽性藥物組小鼠肝臟,可見肝臟呈紅褐色,表面光滑,肝細胞體積較大,排列緊密,顯微鏡下肝細胞較飽滿,無破裂的細胞或壞死的細胞;模型組小鼠肝臟表面硬度較大,輕度水腫,有略微黑色,顯微鏡下可見大面積的細胞壞死,還可見皺縮的肝細胞、破裂的細胞核以及細胞碎片;高、中、低濃度組小鼠肝臟可見肝臟表面呈紅褐色,表面尚光滑,肝臟均有略微黑色,部分腫脹,在顯微鏡下可見少數(shù)破裂的細胞和壞死的細胞。

    4 討論與結(jié)論

    肝臟是以代謝為主的器官,在身體里扮演著去毒素,儲存糖原,分泌性蛋白質(zhì)合成等角色,谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高是肝臟功能出現(xiàn)問題的一個重要指標(biāo),在常見的因素里,各類肝炎都可以引起谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高,這是由于肝臟受到破壞造成的。谷草轉(zhuǎn)氨酶是肝功能檢查中的一項重要指標(biāo),在肝細胞與心肌細胞內(nèi)均存在,心肌細胞中含量高于肝細胞,但肝臟損害時谷草轉(zhuǎn)氨酶血清濃度也可升高。還原型谷胱甘肽是人類細胞質(zhì)中自然合成的一種肽,由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組成,含有巰基(-SH),廣泛分布于機體各器官內(nèi),對維持細胞生物功能有重要作用。在本實驗中西蘭花提取液可以抑制小鼠血清中GOT、GPT含量的升高,還可以促進GSH含量的升高,對各項指標(biāo)均有不同程度的改善。

    西蘭花提取液對二甲基甲酰胺致小鼠肝損傷有一定的保護作用,可以用西蘭花制成護肝藥物,為進一步分析西蘭花提取液對小鼠肝損傷的影響提供理論依據(jù)。

    參考文獻

    [1]李向果.西蘭花葉中硫代葡萄糖苷和原花青素的生物學(xué)效價評定[D].甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué),2013:23-3.

    [2]洪姣,王佳蕊,黃春琦,等.西蘭花預(yù)防和治療腫瘤研究的新進展[J].腫瘤藥學(xué),2014(06):405-409.

    [3]錢麗麗,劉江麗,李揚,等.西蘭花中硫代葡萄糖苷的提取及抑菌實驗初報[J].中國農(nóng)學(xué)通報,2008(02):335-338.

    作者簡介:鄭雨,在讀本科生,研究方向:動物生理及藥理。

    通訊作者:苗婷婷,碩士研究生,實驗師,研究方向:動物生理及藥理。

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