20%噻蟲嗪·螺蟲乙酯懸浮劑的高效液相色譜法

藍(lán)宏彥，何玉清，吳燕飛，金曼麗，邱 理

(柳州市惠農(nóng)化工有限公司，廣西 柳州 545616 )

螺蟲乙酯是季酮酸類化合物，是迄今唯一具有雙向內(nèi)吸傳導(dǎo)性能的現(xiàn)代殺蟲劑；該化合物可以在整個植物體內(nèi)向上向下移動，抵達(dá)葉面和樹皮，從而防治如生菜和白菜內(nèi)葉上，及果樹皮上的害蟲。這種獨特的內(nèi)吸性能可以保護(hù)新生莖、葉和根部，防止害蟲的卵和幼蟲生長[1-2]。20%噻蟲嗪·螺蟲乙酯懸浮劑是由柳州市惠農(nóng)化工有限公司提供的產(chǎn)品，噻蟲螓與螺蟲乙酯復(fù)配是一個很好的既殺蟲又殺螨的劑型。目前，噻蟲·螺蟲乙酯復(fù)配的劑型分析方法未見報道。特此建立高效液相色譜法同柱分離測定20%噻蟲嗪·螺蟲乙酯懸浮劑含量的方法。該方法具有操作快速、準(zhǔn)確、簡便、分離效果好的優(yōu)點，可為企業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量控制和檢驗機(jī)構(gòu)質(zhì)量檢測提供參考。

1 實驗部分

1.1 試劑與溶液

甲醇：色譜純；水：蒸二次新蒸餾水； 噻蟲嗪標(biāo)樣：質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥ 99.0%；螺蟲乙酯標(biāo)樣:質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.0%；噻蟲·螺蟲乙酯20% 懸浮劑試樣(柳州市惠農(nóng)化工有限公司提供)；二次蒸餾水(實驗室自制)。

1.2 儀器

高效液相色譜儀：日本島津進(jìn)口LC-2030C 3D，二極管陣列檢測器；島津原裝工作站；色譜柱：250 mm×4.6 mm(id)不銹鋼柱，內(nèi)裝ODS-3 c185μm填充物。

1.3 操作條件

流動相：甲醇+乙腈+水=7+1+2 (V/V)；流量:1.0 mL/min，檢測波長210 nm；進(jìn)樣體積：20 μL；出峰時間：噻蟲嗪約為2.971min，螺蟲乙酯約為6.163min；這樣可使噻蟲嗪和螺蟲乙酯在C18柱上獲得較好的分離效果和較高的靈敏度；紫外光譜圖如圖1與圖2。

上述液相色譜操作條件，是典型的操作參數(shù)，可根據(jù)不同儀器特點和當(dāng)時溫度條件，對給定的操作參數(shù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整，以期獲得最佳效果。典型的標(biāo)樣和試樣的高效液相色譜圖如圖3與圖4。

圖1 噻蟲嗪的紫外光譜圖

圖2 螺蟲乙酯的紫外光譜圖

圖3 噻蟲·螺蟲乙酯標(biāo)樣圖譜

圖4 20%噻蟲·螺蟲乙酯試樣圖譜

1.4 測定步驟

1.4.1 標(biāo)樣溶液的配制

分別稱取噻蟲嗪標(biāo)品0.0505 g(精確至0.0002 g)和螺蟲乙酯標(biāo)品0.0344 g(精確至0.0002 g)置于50.0 mL容量瓶中，加入甲醇超聲溶解，冷卻至室溫，用甲醇定容至刻度，用移液管準(zhǔn)確吸取該溶液 2.0 mL 于 25.0 mL 容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻作為標(biāo)樣用。

1.4.2 試樣溶液的配制

稱取試樣 0.420 g (精確到0.0002 g)于50.0 mL容量瓶中，加入甲醇超聲溶解，冷卻至室溫，用甲醇定容至刻度，用移液管準(zhǔn)確吸取該溶液 2.0 mL 于 25.0 mL 容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻作為樣品測定。

1.4.3 測定

待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰兩針標(biāo)樣溶液面積相對變化<1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液順序進(jìn)行測定。

1.5 計算

將測得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中噻蟲嗪和螺蟲乙酯的峰面積分別進(jìn)行平均，試樣中噻蟲嗪或螺蟲乙酯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)按下列公式計算：

式中： A1—標(biāo)樣溶液中噻蟲嗪或螺蟲乙酯峰面積的平均值；

A2—試樣溶液中噻蟲嗪或螺蟲乙酯峰面積的平均值；

m1—噻蟲嗪或螺蟲乙酯標(biāo)樣的質(zhì)量(g)；

m2—試樣的質(zhì)量(g)；

p—噻蟲嗪或螺蟲乙酯標(biāo)樣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

檢測波長的確定：待儀器基線穩(wěn)定后，將標(biāo)樣溶液用高效液相色譜儀自動進(jìn)樣(20μL)，10min后在光譜條件下，可觀察到螺蟲乙酯在209 nm、噻蟲嗪在202和252 nm波長條件下有較大的吸收波長，但是在252 nm波長下對螺蟲乙酯的響應(yīng)值就會偏小，在210 nm波長下兩個成分都有較大的吸收且溶劑峰相對干擾較小，因此選用210 nm作為檢測波長。選擇流動相：從噻蟲嗪和螺蟲乙酯的特點上看，噻蟲嗪對使用的甲醇和水的比例50∶50，但是，在這樣的條件下，螺蟲乙酯出峰時間就比較長、峰型難看。經(jīng)過多次試驗篩選，最后為甲醇體積分?jǐn)?shù)70%，水體積分?jǐn)?shù)20%，乙腈積分?jǐn)?shù)10%，流量為1.0 mL/min時有效成分與雜質(zhì)能很好的分離，峰形對稱佳，基線平穩(wěn)，而且分析時間又短，可以提高工作效率。

2.2 線性相關(guān)性實驗

按照本方法的確定要求，分別準(zhǔn)確稱取噻蟲嗪99.0%標(biāo)樣約 0.0505 g和螺蟲乙酯98.0%標(biāo)樣約 0.0344 g(精確至0.0002 g)，置于50.0 mL 容量瓶中用，用甲醇稀釋并定容至刻度，搖勻后作為母液備用。準(zhǔn)確吸母液取2.0 mL置于25 mL 容量瓶中用甲醇定容至刻度，搖勻作為檢測樣品的標(biāo)準(zhǔn)溶液。按上述色譜條件進(jìn)行分析，進(jìn)樣量分別為5、 10、15、20、25、30、35 μL，得出質(zhì)量與峰面積的對應(yīng)關(guān)系(表1、圖5和圖6)。噻蟲嗪的線性相關(guān)曲線為：Y=89654.2X-1999194.3，R2=0.9999；螺蟲乙酯的線性相關(guān)曲線為：Y=55221X-79365，R2=0.9998，結(jié)果表明，噻蟲嗪和螺蟲乙酯的液相色譜分析法線性關(guān)系良好，可滿足定量分析的要求。

表1 分析方法的線性相關(guān)性試驗結(jié)果

圖5 噻蟲嗪的線性關(guān)系圖

圖6 螺蟲乙酯的線性關(guān)系圖

2.3 精確度的驗證

在同一樣品中準(zhǔn)確稱取5個試樣，在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析測定，實驗結(jié)果為噻蟲嗪的平均值12.32%，標(biāo)準(zhǔn)偏差0.015，變異系數(shù)0.12%；螺蟲乙酯的平均值8.29%，標(biāo)準(zhǔn)偏差0.031，變異系數(shù)0.37%(表2)。

表2 分析方法的精密度試驗結(jié)果

2.4 準(zhǔn)確度的驗證

在已知準(zhǔn)確質(zhì)量分?jǐn)?shù)的樣品中，分別加入2 mL 1.4.1中配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在上述方法和操作條件進(jìn)行定量分析，分析結(jié)果見(表3)；測得噻蟲嗪和螺蟲乙酯的平均回收率分別為100.07%和 99.99%。

表3 分析方法的準(zhǔn)確度試驗結(jié)果

3 結(jié)論

綜上所述，該方法具有操作簡便、快速、準(zhǔn)確、分離效果好的優(yōu)點，準(zhǔn)確度和精確度均能達(dá)到定量分析標(biāo)準(zhǔn)要求，可以作為企業(yè)生產(chǎn)過程質(zhì)量控制和質(zhì)檢機(jī)構(gòu)質(zhì)量檢測的參考方法。