4種常用水產藥物對大鱗鲃的急性毒性試驗

于振海，朱永安，孟慶磊，朱樹人，王錫榮

( 山東省淡水漁業(yè)研究院，山東省淡水水產遺傳育種重點實驗室，山東 濟南 250013 )

大鱗鲃(Barbuscapito)屬鯉科、鲃亞科、鲃屬，體質量可達5～10 kg，具有耐鹽堿、食性廣、生長速度快、肉質鮮美、抗逆性強等優(yōu)良特性[1-5]。大鱗鲃主要分布于西亞的里海和咸海水域，是當?shù)孛F的大型經濟魚類之一，為促進鹽堿水域的開發(fā)和利用，2003年引入我國，旨在增加內陸鹽堿地水域的養(yǎng)殖種類。

大鱗鲃為引進種，在我國養(yǎng)殖的時間較短，關于大鱗鲃疾病的報道極少，僅有2016年天津天祥水產有限公司出現(xiàn)的不明原因極度貧血而大量死亡的個例[6]。大鱗鲃雖未出現(xiàn)大規(guī)模疾病爆發(fā)，但對于疾病應防重于治。隨著大鱗鲃人工繁育技術成熟，養(yǎng)殖規(guī)模逐漸擴大，苗種的抗病力低于成魚，更易染病。藥物防治病害是有效且經濟的方法[7]。針對魚類常見的錨頭鳋(Lernaea)、中華鳋(Sinergasilus)、車輪蟲、指環(huán)蟲、線蟲幼體等寄生蟲性疾病和弧菌(Vibrio)、嗜水氣單胞菌(Aeromonashydrophila)、愛德華氏菌(Edwardsiella)等細菌引起出血、爛鰓、癤瘡、腐皮等細菌性疾病，筆者選用阿維菌素、敵百蟲作為抗寄生蟲藥物，選用聚維酮碘、三氯異氰尿酸作為殺菌藥物[8]，通過急性毒性試驗確定藥物的安全用量和毒性等級，為大鱗鲃養(yǎng)殖中合理用藥、安全用藥提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗用魚體長(17.9±1.6) cm、體質量(63.4±19.3) g，試驗前在試驗條件下暫養(yǎng)3 d，日投喂1次。試驗開始前24 h停食，選游泳活潑，無病、無傷、無畸形的魚進行試驗。試驗用藥分別為阿維菌素、聚維酮碘、三氯異氰尿酸和敵百蟲，藥品規(guī)格及生產廠家等見表1。

表1 4種試驗藥物的規(guī)格與成分

1.2 方法

2017年6月，采用靜態(tài)試驗法[9]，在80 cm×60 cm×45 cm、容水100 L的白色塑料箱內放魚10尾，進行試驗。每個周期4 d。試驗用水為池塘養(yǎng)殖用水，水質符合漁業(yè)水質標準(GB 11607—89)，水溫(24.1±1.5) ℃、pH 8.41±0.12、溶解氧(6.1±0.9) mg/L。每日測1次水溫、pH、溶解氧含量。試驗期間不投餌。

先采用靜態(tài)方式進行預試驗，每個預試驗質量濃度組放入5尾魚，不設平行組，持續(xù)48～96 h。每日至少記錄2次各容器內的死亡魚數(shù)，并及時取出死亡個體。

根據預試驗結果，參照《水和廢水監(jiān)測分析方法》[10]，每種藥物設5個梯度組(表2)和一個空白對照組，每個梯度組設2個平行。溶液調節(jié)至相應質量濃度后，從馴養(yǎng)魚群中隨機取出試驗魚迅速放入各試驗容器中。試驗魚在20 min內分組完畢。

24、48、72、96 h后檢查試驗魚狀況，以試驗對象失去活力、對外界刺激無反應為死亡標準[11]。試驗開始后8 h連續(xù)觀察各處理組魚的狀況，記錄24、48、72 h和96 h的死亡數(shù)，記錄異常行為，及時清除死魚。

1.3 數(shù)據處理

半致死質量濃度(LC50，mg/L)、安全質量濃度(SC，mg/L)[12]按下式計算:

logLC50=xm-d(∑ωB-0.5)

SC=ρ1×0.3/(ρ2/ρ1)2

式中，xm為死亡組最大劑量的對數(shù)，d為相鄰質量濃度的對數(shù)差，ωB為各組的死亡率(%)，∑ωB為各組死亡率之和(%)；ρ1為48 h半致死質量濃度(mg/L)；ρ2為24 h半致死質量濃度(mg/L)。

2 結 果

整個試驗過程中，對照組大鱗鲃無死亡。阿維菌素、聚維酮碘、三氯異氰尿酸和敵百蟲藥物組大鱗鲃的毒性結果見表2。

2.1 阿維菌素試驗結果

阿維菌素急性中毒的大鱗鲃，少動，對外界刺激反應遲鈍，游動時身體會失去平衡。阿維菌素質量濃度為1.496～5.000 mg/L的試驗組，隨著質量濃度的增加，大鱗鲃的死亡率也逐漸增大。對照組和質量濃度為1.000 mg/L試驗組未見非正?，F(xiàn)象，二者96 h死亡率均為0；當質量濃度為5.000 mg/L時，約6 h出現(xiàn)死亡，24 h死亡率為100%。阿維菌素對大鱗鲃的24、48 h和96 h的半致死質量濃度分別為3.340、2.840 mg/L和2.621 mg/L，安全質量濃度為0.616 mg/L(表3)。

表2 4種藥物對大鱗鲃的致死率

2.2 聚維酮碘

在聚維酮碘質量濃度為17.800～100.000 mg/L組中大鱗鲃反應遲鈍，游泳能力和呼吸能力減弱，最后死亡，而且隨聚維酮碘質量濃度的升高，死亡率也逐漸升高，而對照組和質量濃度為10.000 mg/L試驗組未出現(xiàn)不正?，F(xiàn)象。100.000 mg/L試驗組的24 h死亡率為100%。聚維酮碘對大鱗鲃的24、48 h和96 h半致死質量濃度分別為74.967、63.077 mg/L和50.106 mg/L，安全質量濃度為13.397 mg/L(表3)。

2.3 三氯異氰尿酸試驗結果

在三氯異氰尿酸質量濃度為10 mg/L組中，約10 min大鱗鲃浮在上層，吞食空氣，類似浮頭現(xiàn)象，游泳動作緩慢，約20 min失去平衡，腹部朝上，對外界刺激反應遲鈍，約30 min開始死亡。質量濃度5.623 mg/L組大鱗鲃24 h死亡率達到90%，48 h和96 h的死亡率均為100%。三氯異氰尿酸對大鱗鲃的24、48 h和96 h的半致死質量濃度分別為4.466、3.758 mg/L和3.548 mg/L，安全質量濃度為0.798 mg/L(表3)。

2.4 敵百蟲試驗結果

在敵百蟲質量濃度為0.356～2.000 mg/L試驗組中，大鱗鲃不安地亂竄，時而箱底時而浮上水面，后期扭曲翻滾，抖動，最后死亡。試驗組的藥品質量濃度與大鱗鲃的死亡率呈正相關，對照組和質量濃度為0.200 mg/L組未出現(xiàn)非正?，F(xiàn)象，96 h死亡率為0，質量濃度2.000 mg/L試驗組24 h死亡率為100%。敵百蟲對大鱗鲃的24、48 h和96 h的半致死質量濃度分別為1.191、1.061 mg/L和0.709 mg/L，安全質量濃度為0.253 mg/L(表3)。

表3 4種藥物的的半致死質量濃度及安全質量濃度

3 討 論

3.1 4種藥物毒性評價

半致死質量濃度是衡量藥物對試驗對象毒性的指標，其值越小，藥物毒性越大；其值越大，毒性越低[13-14]。以96 h半致死質量濃度為魚類急性毒性分級標準，分為極高毒(<1 mg/L)、高毒(1～10 mg/L)、中毒(10～100 mg/L)和低毒(>100 mg/L)4個等級[10]。本試驗中4種藥物對大鱗鲃的96 h半致死質量濃度為聚維酮碘>三氯異氰尿酸>阿維菌素>敵百蟲，按照藥物對其毒性依次為敵百蟲>阿維菌素>三氯異氰尿酸>聚維酮碘。本試驗結果表明，敵百蟲對大鱗鲃是極高毒藥物，三氯異氰尿酸和阿維菌素是高毒藥物，聚維酮碘是中毒藥物。4種藥物對大鱗鲃的半致死質量濃度呈24 h半致死質量濃度>48 h半致死質量濃度>96 h半致死質量濃度(表3)，說明隨時間的延長，4種藥物對試驗魚的毒性效應相應增加。

3.2 4種藥物用藥安全性

阿維菌素對錨頭鳋、中華鳋、纖毛蟲、指環(huán)蟲和線蟲等寄生蟲均有極強的驅殺作用，廣泛應用于水產動物體內外寄生蟲病的防治[15]。周帥等[16]評價了阿維菌素水乳劑對鰱魚(Hypophthalmichthysmolitrix)、異育銀鯽(Carassiusauratusgibelio)、草魚(Ctenopharyngodonidellu)的安全性和藥效，表明該制劑可有效防治錨頭鳋、中華鳋等寄生蟲病。阿維菌素常用量為0.037～0.045 mg/L，本試驗中阿維菌素的安全質量濃度為0.616 mg/L，高于常用量，說明阿維菌素能夠用于大鱗鲃寄生蟲疾病的防治。

聚維酮碘又名聚乙烯吡咯烷酮碘，對魚體無刺激性，體表存留時間較長，可保持長久的抑菌殺菌能力，促進魚類皮膚機械損傷愈合，為廣譜、高效消毒殺菌劑，防治水產動物爛鰓、癤瘡、腐皮等細菌性疾病的效果很好，是水產養(yǎng)殖中廣泛使用的消毒殺菌劑[17]。聚維酮碘常用量為0.03～0.04 mg/L，本試驗中聚維酮碘的安全質量濃度為13.394 mg/L，高于同為鲃亞科的光倒刺鲃(Spinibarbushollandi)的10.3 mg/L[18]，也遠高于常用量，在大鱗鲃養(yǎng)殖過程中可作為消毒殺菌劑使用，也可作為浸泡藥物治療細菌性疾病。

三氯異氰尿酸水解生成次氯酸,具有穩(wěn)定殺菌作用，是生產上用以防治細菌性疾病的常用藥物，常用量為0.4～0.5 mg/L[19]。孫翰昌等[19]研究發(fā)現(xiàn)，三氯異氰尿酸對中華倒刺鲃(S.sinensis)的安全質量濃度為0.53 mg/L，雖易刺激魚體，但可用于魚病防治。本試驗中，三氯異氰尿酸的安全質量濃度為0.798 mg/L，藥品的有效成分為50%(有效氯計)，因此三氯異氰尿酸的安全質量濃度為0.399 mg/L，略低于常用量，高于光倒刺鲃的0.05 mg/L[18]。大鱗鲃和光倒刺鲃異氰尿酸反應強烈，建議生產中謹慎使用三氯異氰尿酸。

敵百蟲為膽堿酯酶抑制劑，能將膽堿酯酶的活性點磷酸化而抑制其活性。敵百蟲在魚體內殘留量少、殘留時間短而被廣泛用于防治體外寄生甲殼類、單殖吸蟲及部分腸內寄生蠕蟲，常用量為0.2～0.5 mg/L[20]。敵百蟲對光倒刺鲃的安全質量濃度為1.1 mg/L[18]，對中華倒刺鲃安全質量濃度為0.164 mg/L[20]，對黑脊倒刺鲃(S.caldwelli)安全質量濃度為50 mg/L[21]。試驗中敵百蟲的安全質量濃度為0.253 mg/L，介于常用量之間，因此敵百蟲可以作為大鱗鲃的疾病防治藥物。水產藥物對魚類的急性毒性因魚的種類、規(guī)格而異，對藥物的安全質量濃度也不同[22]。

生產中，藥物的毒性往往受水溫、水質、pH、各種水生生物和有機物等諸多因子影響。例如，敵百蟲是極高毒農藥，在堿性條件下可水解成毒性增加10余倍的敵敵畏[23]。除了從藥物的半致死質量濃度和安全質量濃度上考慮，在生產中選用藥物還需結合藥物的常用量、用藥時間及用藥環(huán)境綜合考慮，同時密切觀察魚的活動情況，防止魚類中毒。