雄激素受體在多囊卵巢綜合征卵巢中表達(dá)特征的分析

林少梅

（廣東省佛山市順德區(qū)婦幼保健院 佛山 525300）

現(xiàn)階段，臨床尚未完全明確多囊卵巢綜合征（PCOS）的發(fā)病機(jī)制，通常認(rèn)為是由于神經(jīng)內(nèi)分泌異常，導(dǎo)致黃體生成素的分泌幅度與頻率增加；腎上腺生成或者卵巢合成雄激素的酶活性發(fā)生變化，進(jìn)而引發(fā)高雄激素血癥；還有部分學(xué)者認(rèn)為，該病和長期慢性感染具有密切相關(guān)性[1]。PCOS患者大多存在高激素血癥、高雄胰島素及瘦素水平升高等一系列內(nèi)分泌改變。黃體生成素與卵泡刺激素比值增高、高黃體生成素血癥以及睪酮升高均屬于典型的高雄激素血癥，在無排卵性不孕癥發(fā)病率中約占50%～70%[2～3]。高雄激素血癥可促使PCOS患者出現(xiàn)多種不良后果與臨床表現(xiàn)，只有充分結(jié)合雄激素與雌激素受體才能發(fā)揮良好作用，但臨床尚未完全明確PCOS和雄激素受體之間的相關(guān)性[4]。本研究旨在探討雄激素受體（AR）在PCOS卵巢中的表達(dá)特征?，F(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年1月～2017年6月我院因PCOS行卵巢楔形切除術(shù)切除的卵巢病理組織30例為觀察組；取同期因子宮肌瘤、宮頸癌于卵泡期行手術(shù)，并經(jīng)病理學(xué)確診為正常的卵巢組織皮質(zhì)標(biāo)本26例為對(duì)照組。觀察組患者年齡20～35歲，平均年齡（28.95±5.69）歲；對(duì)照組患者年齡21～36歲，平均年齡（28.85±5.75）歲。兩組患者年齡等一般資料比較無顯著性差異，P＞0.05，具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 在排除其他引起高雄激素血癥的疾病后符合以下2項(xiàng)即可診斷為PCOS：（1）超聲檢查發(fā)現(xiàn)多囊卵巢樣改變；（2）出現(xiàn)高雄激素血癥的臨床表現(xiàn)；（3）無排卵或稀發(fā)排卵。

1.3 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) （1）納入標(biāo)準(zhǔn)：接受手術(shù)治療之前的3個(gè)月內(nèi)，未采用促排卵與性激素藥物治療；患者自愿簽署知情同意書。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：應(yīng)用外源性雄激素治療者；雄激素分泌性腫瘤者；庫欣綜合征者；先天性腎上腺皮質(zhì)增生者。本研究在獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)的情況下開展。

1.4 檢驗(yàn)方法 將兩組卵巢標(biāo)本制備為4 μm切片，進(jìn)行HE染色，封片后由2名具有豐富經(jīng)驗(yàn)的病理科醫(yī)生于光鏡下觀察病理結(jié)構(gòu)，選10個(gè)隨機(jī)視野，對(duì)各級(jí)亂跑數(shù)量進(jìn)行計(jì)數(shù)。隨后進(jìn)行免疫組織化學(xué)檢測(cè)，染色后采用雙盲法在光鏡下觀察其病理結(jié)構(gòu)，每張切片取10個(gè)高倍鏡視野觀察，根據(jù)陽性細(xì)胞比例及著色情況記分：陽性細(xì)胞＞50%，染色呈深棕色，記3分；陽性細(xì)胞26%～50%，染色呈棕褐色，記2分；陽性細(xì)胞1%～25%，染色呈淺棕色，記1分；無陽性細(xì)胞，無著色細(xì)胞，記0分。3分為（+），2分為（±），0～1分為（－）[5]。

1.5 觀察指標(biāo) （1）比較兩組卵泡數(shù)量；（2）分析兩組免疫組化染色結(jié)果。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 以SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用百分比表示，采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組卵泡數(shù)量比較 觀察組竇卵泡、次級(jí)卵泡、初級(jí)卵泡數(shù)量明顯高于對(duì)照組（P＜0.05）；兩組閉鎖卵泡、卵巢始基卵泡數(shù)量比較無顯著性差異（P＞0.05）。見表 1。

表1 兩組卵泡數(shù)量比較（個(gè)，±s）

表1 兩組卵泡數(shù)量比較（個(gè)，±s）

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2.2 兩組免疫組化染色結(jié)果分析 觀察組AR陽性率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。AR在閉鎖卵泡、竇卵泡、次級(jí)卵泡、初級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞、卵泡膜細(xì)胞、卵母細(xì)胞和始基卵泡的卵母細(xì)胞中均有表達(dá)，其中在竇卵泡中表達(dá)最為明顯。兩組組內(nèi)5級(jí)卵泡間AR陽性率比較具有顯著性差異（P＜0.05）；兩組組間始基卵泡、閉鎖卵泡的AR陽性率比較存在顯著性差異（P＜0.05）；兩組組間竇卵泡、初級(jí)卵泡、次級(jí)卵泡的AR陽性率比較無顯著性差異（P＞0.05）。見表2。

表2 兩組免疫組化染色結(jié)果分析（例）

3 討論

PCOS屬于臨床上常見生殖功能障礙性疾病，是由月經(jīng)調(diào)節(jié)機(jī)制失常而引發(fā)的綜合征。研究顯示[6]，卵巢局部高雄激素為引發(fā)PCOS的關(guān)鍵因素。因此，對(duì)高雄激素形成加強(qiáng)研究是闡明PCOS病因的一種重要方式。本研究結(jié)果顯示，觀察組竇卵泡、次級(jí)卵泡、初級(jí)卵泡數(shù)量明顯高于對(duì)照組（P＜0.05）；兩組閉鎖卵泡、卵巢始基卵泡數(shù)量比較無顯著性差異（P＞0.05）。觀察組AR陽性率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；AR在閉鎖卵泡、竇卵泡、次級(jí)卵泡、初級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞、卵泡膜細(xì)胞、卵母細(xì)胞和始基卵泡的卵母細(xì)胞中均有表達(dá)，其中在竇卵泡中表達(dá)最為明顯。兩組組內(nèi)5級(jí)卵泡間AR陽性率比較具有顯著性差異（P＜0.05）；兩組組間始基卵泡、閉鎖卵泡的AR陽性率比較存在顯著性差異（P＜0.05）；兩組組間竇卵泡、初級(jí)卵泡、次級(jí)卵泡的AR陽性率比較無顯著性差異（P＞0.05）。這和Lee SO等[7]學(xué)者的研究具有高度相似性，他們發(fā)現(xiàn)，AR在各級(jí)卵泡的卵泡膜細(xì)胞上均有表達(dá)，但在竇前卵泡及始基卵泡的AR陽性率低于在竇前卵泡上的表達(dá)，在竇前卵泡、竇狀卵泡的顆粒細(xì)胞中均明顯表達(dá)。有研究顯示，卵泡過多的主要原因在于卵巢內(nèi)存在高雄激素，雄激素對(duì)AR進(jìn)行作用之后，會(huì)顯著增多竇前卵泡的小竇狀卵泡數(shù)量[8]。還有研究選取動(dòng)物模型，并未給予其雄激素，結(jié)果顯示與排卵前卵泡顆粒細(xì)胞相比，不成熟卵泡顆粒細(xì)胞的AR水平要高出正常4.2倍左右，提示在顆粒細(xì)胞中的作用，雄激素會(huì)隨著卵泡細(xì)胞生長從刺激向抑制進(jìn)行轉(zhuǎn)變[9～10]。綜上所述，PCOS患者卵巢局部組織中的AR表達(dá)和PCOS發(fā)生存在一定相關(guān)性。