室溫下注射用頭孢西丁穩(wěn)定性研究*

王洪銳，徐玉紅，何 英

（1.廣東省深圳市寶安區(qū)福永人民醫(yī)院，廣東 深圳 518103； 2.中山大學附屬第八醫(yī)院，廣東 深圳 518033）

藥品效期是指藥品在規(guī)定貯藏條件下，能維持其質量標準的最大期限。每種藥品都標示有經(jīng)藥品監(jiān)管部門批準的貯藏條件及有效期，嚴格遵守藥品規(guī)定的貯藏條件，并在效期內使用，是保證藥品安全性和有效性的重要前提。而實際情況是，市場上流通使用的藥品，說明書【貯藏】項標示為冷處及陰涼處貯藏的藥物越來越多，而在藥品供應、使用的終端環(huán)節(jié)，如急救車、醫(yī)院藥房備藥環(huán)節(jié)，患者出院帶藥環(huán)節(jié)及臨床配液給藥環(huán)節(jié)，很難保證藥品在貯存、使用全過程中完全符合貯藏條件[1－5]。頭孢西丁為半合成的第2代頭孢菌素類抗菌藥物，對革蘭陽性菌、革蘭陰性菌及厭氧菌均有殺滅作用，且具有高度抗β－內酰胺酶性質，臨床應用廣泛。注射用頭孢西丁需遮光、密閉、在陰涼干燥處保存（不超過20℃），但醫(yī)院藥房、配液室等終端貯存、使用環(huán)節(jié)多不能滿足此貯存條件，常需要26℃空調室溫環(huán)境下短暫貯存藥品。本研究中采用藥物穩(wěn)定性長期及加速試驗方法，觀察室溫貯藏條件下注射用頭孢西丁的穩(wěn)定性，為在溫度變異條件下藥品的短期貯存管理提供依據(jù)。現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 1100型高效液相色譜儀，包括G1311A四元泵、G1322A真空脫氣機、G1315B－DAD檢測器、D1316A柱溫箱，rheodyne－7725i手動進樣器、Chem-Station工作站（美國安捷倫公司）；UV－2201型紫外分光光度計（日本島津公司）；AG285型電子天平（梅特勒托利多儀器有限公司）；pHS－3C數(shù)字pH計（上海精科雷磁儀器廠）；DGX－90703B－1型電熱鼓風干燥箱（10～250℃，溫度波動范圍為±1℃，上海?，攲嶒炘O備有限公司）。

1.2 試藥

頭孢西丁對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號為130572－201102，質量分數(shù)為95.3%，供含量測定用）；注射用頭孢西丁（海南某制藥有限公司，批號分別為 140301，140602，141001，規(guī)格為每支 2.0 g）；甲醇、乙腈均為色譜純（德國Merck公司）；其他試劑均為分析純，水為高純水。所有試劑及緩沖液使用前均經(jīng)0.45μm微孔濾膜濾過。

2 方法與結果

2.1 含量及有關物質測定[6]

色譜柱：ZorbaxEclipseXDB－C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：水 －乙腈 －冰醋酸（81∶19 ∶1）；檢測波長：270nm；流速：1.0mL ／min；柱溫：25℃；進樣量：10μL。系統(tǒng)適用性試驗符合藥典要求。有關雜質含量測定采用梯度洗脫法進行。

2.2 長期穩(wěn)定性試驗

取足夠數(shù)量3個批號的注射用頭孢西?。ㄔ囼為_始日期距離標示生產(chǎn)日期不超過6個月），以市售原包裝形式分別貯存在18，26，30℃3個溫度條件下放置6個月，首次測定分析后每隔1個月取樣測定分析。比較含量、雜質、酸度、澄清度和顏色變化情況，以評估注射用頭孢西丁在規(guī)定貯藏條件下和非規(guī)定貯藏條件下的質量穩(wěn)定性。結果顯示，在18℃和26℃貯存6個月后，其質量可維持穩(wěn)定；在30℃貯存6個月后，批號為141001的藥品標示含量不達標，顏色及雜質總量接近高限。結果見表1至表3。

2.3 殺菌效力試驗

選取質控菌株金黃色葡萄球菌ATCC29213、大腸埃希菌ATCC25922及1株臨床分離經(jīng)生化鑒定為肺炎克雷伯菌且對頭孢西丁敏感的菌株為試驗對象，采用常量肉湯稀釋法比較不同溫度條件下貯存0，3，6個月后3批注射用頭孢西丁最小抑菌／殺菌濃度（MIC／MBC）的變化情況。

結果各批號注射用頭孢西丁在18℃和26℃貯存6個月后，對金黃色葡萄球菌ATCC29213、大腸埃希菌ATCC25922及臨床分離的肺炎克雷伯菌的 MIC／MBC未發(fā)生變化；30℃貯存6個月后，批號為140602及141001的藥品在3個月或6個月時對上述菌株 MIC發(fā)生變化，但按美國臨床和實驗室標準化協(xié)會（clinicaland laboratory standard institute，CLSI）標準規(guī)定[7]，仍在規(guī)定范圍內。

表1 注射用頭孢西丁18℃長期穩(wěn)定性試驗結果

2.4 等溫加速試驗

采用經(jīng)典恒溫法對注射用頭孢西丁在25℃的有效期進行推算。分別將若干支注射用頭孢西丁置40，50，60，70℃ 4個溫度條件下，分別在設定試驗時間（t）取樣進行含量測定，并計算其標示量（A）。結果見表4。得到的數(shù)據(jù)分別按0級、1級和2級化學反應動力學方程進行擬合，以獲得其最佳熱降解動力學方程。結果表明，在設定溫度范圍內，注射用頭孢西丁熱降解可用一級反應動力學方程ln C＝ln C0－Kt描述。不同溫度時間條件下的線性回歸方程及相關系數(shù)見表5，各方程斜率相反數(shù)即對應各溫度下的速率常數(shù)。根據(jù)阿侖尼烏斯（Arrhenius）公式，以速率常數(shù)（K）的自然對數(shù)（ln K）對熱力學溫度（T）的倒數(shù)作圖并進行線性回歸，得方程lnK＝ －9 269.6／T＋19.444（R2＝0.980 7）。將溫度 20℃和25℃分別代入方程，即可推算出注射用頭孢西丁在20℃及 25℃的速率常數(shù)分別為 K20＝5.07×10－6／h，K25＝8.62×10－6／h，按濃度下降至初始濃度的 10%為有效期計算，20℃有效期為29個月，與藥品說明書標識效期接近；25℃有效期為17個月，縮短約40%。假定初始標示含量為100.00%，在25℃貯存約6個月后，經(jīng)推算，其標示含量約為初始標示含量的96.00%。

表2 注射用頭孢西丁26℃長期穩(wěn)定性試驗結果

表3 注射用頭孢西丁30℃長期穩(wěn)定性試驗結果

3 討論

目前，藥品穩(wěn)定性研究文獻中，國內報道基本集中在藥品研發(fā)、臨床配液使用或與其他藥品相互配伍穩(wěn)定性方面，關于市售完整包裝藥品在溫度波動情況下的穩(wěn)定性研究基本沒有[8－10]。本研究中對需在陰涼處貯存的注射用頭孢西丁在非規(guī)定貯存溫度下的穩(wěn)定性進行了初步研究。6個月長期穩(wěn)定性試驗結果表明，注射用頭孢西丁在26℃和30℃ 2個非規(guī)定貯存溫度條件下分別貯存6個月和3個月后，其含量、有關物質、酸度及檢查項（溶液澄清度與顏色）仍符合法定質量標準要求，殺菌效力也未發(fā)生明顯變化，表明在此模擬貯存條件下和時限內，頭孢西丁質量仍相對穩(wěn)定可靠。

表4 注射用頭孢西丁不同溫度、不同時間含量測定結果（標示含量）

表5 不同溫度時間條件下ln A－t回歸方程及相關系數(shù)

藥物有效期預測方法的理論基礎是化學動力學，為預測注射用頭孢西丁在常溫條件下的穩(wěn)定性及有效期，本研究中采用經(jīng)典恒溫法對其降解規(guī)律及有效期進行了研究和預測。結果表明，在試驗溫度范圍內，注射用頭孢西丁熱降解動力學模式最符合一級動力學反應特征。隨著溫度逐漸升高，注射用頭孢西丁的熱降解速率常數(shù)逐漸增大，符合溫度每升高10℃，反應速率常數(shù)增加2～4倍規(guī)律特征。研究結果證實，溫度對于注射用頭孢西丁的穩(wěn)定性有較大影響，在20℃貯存，預測效期為29個月，與說明書標識有效期接近；25℃貯存時，預測效期為17個月，相比20℃縮短約40%。據(jù)此推測，假定標示含量為100.00%的注射用頭孢西丁從貯存溫度條件符合規(guī)定的醫(yī)院藥庫領出后，在25℃貯存6個月，藥品標示含量約為原始標示量的96.00%，含量項仍符合法定質量標準要求，與長期留樣試驗結果相符。如果按其藥品質量標準標示含量為90.00%～110.00%計算，藥品可在25℃貯存6個月的前提是初始標示量不得低于94.00%，且初始標示含量越低，25℃對應的貯存時間越短。在30℃溫度條件下，其推算有效期只有10個月。結果表明，溫度變化越劇烈，相應的使用效期縮短越明顯。

本研究為注射用頭孢西丁在醫(yī)院藥房、配液室等終端短暫超規(guī)定溫度存放提供了一定的參考依據(jù)，但也存在一定的局限。如研究只對某一廠家生產(chǎn)的注射用頭孢西丁在高于規(guī)定貯存溫度條件下的穩(wěn)定性進行了研究，鑒于不同生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的同一種藥品，工藝質量上可能存在差異，故研究結果不能武斷推及其他生產(chǎn)廠家的注射用頭孢西??；即使同一廠家也可能存在工藝質量穩(wěn)定性差異。對于易致過敏性的藥物，溫度變異下雜質變化對其致敏性的影響也需要重視。雖然本研究為注射用頭孢西丁可能發(fā)生的非規(guī)定溫度條件下的貯存提供了依據(jù)，但從監(jiān)管、法律角度而言，尚無實際意義，在實際藥品貯存中應盡可能遵守藥品說明書。

藥品的穩(wěn)定性取決于溫度、濕度等多種因素，對于完整包裝的市售藥品，溫度因素最關鍵，溫度升高常導致藥品降解加速、臨床療效下降，甚至毒性增加。鑒于在藥品流通運輸、貯存及使用過程中，特別是對于需陰涼處保存的藥品，不可避免地會出現(xiàn)超出溫度上限的情況，非規(guī)定貯存溫度條件下短期貯存藥品在世界范圍內均不可避免[1－5]。因此，對非規(guī)定貯存溫度條件下藥品質量維持程度，如藥品的最高耐受溫度、在某一溫度范圍內其可耐受的時間極限等進行研究有現(xiàn)實意義[11]。