廣西現(xiàn)行家蠶品種兩廣二號(hào)原種隨時(shí)孵化技術(shù)

李燕飛 李乙 蔣玉蓮 韋紅群 何珊珊 莫云霞

摘要：【目的】明確保護(hù)時(shí)間、冷藏時(shí)間和浸酸時(shí)間3個(gè)因素對(duì)兩廣二號(hào)原種短期冷藏浸酸及延期冷藏浸酸實(shí)用孵化率的影響，為調(diào)節(jié)蠶種供應(yīng)期及廣西家蠶原種短期冷藏浸酸處理過程中制定不同冷藏時(shí)間的蠶種入庫和鹽酸刺激量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)，也為改進(jìn)當(dāng)前的短期冷藏浸酸技術(shù)提供指導(dǎo)。【方法】以兩廣二號(hào)原種4個(gè)親本（芙蓉×932、932×芙蓉、湘暉×7532和7532×湘暉）為試驗(yàn)材料，按入庫前保護(hù)時(shí)間、冷藏時(shí)間及浸酸時(shí)間3個(gè)因素3水平設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，調(diào)查4個(gè)親本各因素不同水平的實(shí)用孵化率，篩選提高實(shí)用孵化率的最佳組合，并在此基礎(chǔ)上選取孵化效果較好的親本探討延期冷藏適期?！窘Y(jié)果】通過正交試驗(yàn)分析，4個(gè)親本在不同冷藏天數(shù)中均可找到各因素條件較好的最高實(shí)用孵化率處理組合，其中，芙蓉×932為48 h-30 d-6 min，932×芙蓉為48 h-30 d-5 min，湘暉×7532為48 h-30 d-7 min，7532×湘暉為64 h-40 d-6 min。短期冷藏孵化效果較好的兩個(gè)親本（芙蓉×932和湘暉×7532）延期冷藏試驗(yàn)區(qū)與對(duì)照區(qū)的實(shí)用孵化差異不顯著（F關(guān)鍵詞： 家蠶；兩廣二號(hào)；短期冷藏；浸酸；實(shí)用孵化率

中圖分類號(hào)： S882.35 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：2095-1191（2018）04-0787-07

Instantaneous hatching technique for silkworm variety Liangguang 2 stock in Guangxi

LI Yan-fei， LI Yi， JIANG Yu-lian， WEI Hong-qun， HE Shan-shan， MO Yun-xia*

（Guangxi Academy of Sericulture Science， Nanning 530007， China）

Abstract：【Objective】The effects of three factors including protection time， refrigeration time and acid soaking time on the practical hatching rate of short-term refrigeration and acid treatment， and deferred short-term refrigeration and acid treatment for Liangguang 2 stock were studied to provide references for the adjustment of silkworm egg supply period， the standard formulation on the storage of silkworm eggs and acid stimulus dose in the process of short-term refrigeration and acid treatment of silkworm stock in Guangxi，as well as the improvement of existing short-term refrigeration and acid soaking treatment technology. 【Method】Four parents of Liangguang 2 stock（Furong×932， 932×Furong， Xianghui×7532， 7532×Xianghui） were used as the test materials. Orthogonal test with three levels of three factors including protection time， refrigeration time and acid soaking time was designed to investigate the practical hatching rate of four parents at different levels of factors. The purpose was to find the best combination for increasing hatching rate， and on this basis， parents with fine hatching results were selected to study suitable period of deferred refrigeration. 【Result】Through the analysis of orthogonal test， treatment combination of the highest practical incubation rate with desirable factors can be found in diffe-rent refrigerated days for the four parents. In which， Furong×932， 932×Furong，Xianghui×7532 and 7532×Xianghui were 48 h-30 d-6 min， 48 h-30 d-5 min， 48 h-30 d-7 min and 64 h-40 d-6 min respectively. There was not significant difference in practical hatchability between experimental plot and control plot for deferred refrigeration of two parents（Furong×932 and Xianghui×7532） which had sound hatching effects in short-term refrigiration（F

Key words： silkworm； Liangguang 2； short-term refrigeration； acid soaking； practical hatching rate

0 引言

【研究意義】廣西家蠶原種秋用種主要為春制秋用種，一般采用短期冷藏浸酸法解除滯育，生產(chǎn)上需在5 ℃下冷藏60 d以上出庫浸酸才能保證孵化整齊（余愛群等，1997；余武昌等，2012）。隨著我國“東桑西移”政策的實(shí)施，廣西蠶業(yè)迅速發(fā)展，原種需求量大幅增長，需提早出庫浸酸以滿足各蠶種場(chǎng)的用種需求，進(jìn)而產(chǎn)生蠶種用種提前與蠶種冷藏時(shí)間不足的矛盾。此外，生產(chǎn)上常受天氣、市場(chǎng)等因素影響導(dǎo)致用種期延后的情況時(shí)有發(fā)生，而需要不間斷供應(yīng)蠶種。為適應(yīng)養(yǎng)蠶生產(chǎn)及品種變化的需要，蠶業(yè)科技工作者不斷改進(jìn)蠶種解除滯育的方法，摸索出短期冷藏保護(hù)及浸酸后再冷藏等系列技術(shù)體系，但在蠶種冷藏期限上仍存在缺陷，無法滿足完全開放蠶種市場(chǎng)隨時(shí)供應(yīng)蠶種的需求（胡木林和黃自然，1999；陳義安等，2016），因此，有必要進(jìn)一步探索保護(hù)時(shí)間、冷藏時(shí)間、浸酸時(shí)間等因素對(duì)蠶種實(shí)用孵化率及蟻蠶絕食生命力的影響，為廣西家蠶原種短期冷藏浸酸處理過程中制定不同冷藏時(shí)間的蠶種入庫和鹽酸刺激量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)，進(jìn)而拓寬蠶種使用期限以滿足廣西全年多批次、循環(huán)式養(yǎng)蠶的生產(chǎn)需求?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】近年來，為適應(yīng)蠶業(yè)發(fā)展需求，蠶業(yè)科技工作者一直致力于提高短期冷藏蠶種孵化率及隨時(shí)解除蠶種滯育性方法的研究。楊明觀等（1996）采用電暈放電刺激法對(duì)冷藏25～30 d的短期冷藏蠶種進(jìn)行人工孵化處理，結(jié)果獲得與浸酸相當(dāng)或略優(yōu)的人工孵化效果。余愛群等（1997）對(duì)卵齡為42～72 h的蠶種進(jìn)行冷藏0～25 d后隨時(shí)孵化研究，結(jié)果獲得91%～99%的實(shí)用孵化率，且在生產(chǎn)上應(yīng)用效果良好。徐世清等（2000）研究表明，在一定的鹽酸刺激量范圍內(nèi)，蠶卵活化和發(fā)育速度隨鹽酸刺激量的增大而加快，但刺激量超過一定范圍后蠶卵的點(diǎn)青時(shí)間隨刺激量的增大而延遲。邵金麗等（2004）研究證實(shí)，蠶卵產(chǎn)下后在25 ℃保護(hù)1～7 d的未完全滯育卵，用1.075 kg/L鹽酸（液溫46 ℃）浸漬5～70 min，其實(shí)用孵化率可達(dá)90%左右；當(dāng)蠶卵產(chǎn)下后在25 ℃保護(hù)10～20 d時(shí)，用高溫沖擊加浸酸的方法可解除其滯育性。賈玉霞等（2005）利用高溫沖擊法對(duì)蠶種冷藏35～40 d的短期冷藏方法進(jìn)行研究，并應(yīng)用于生產(chǎn)，其蠶種孵化率高，農(nóng)戶反應(yīng)良好。章豪等（2010）發(fā)現(xiàn)932×芙蓉或芙蓉×932雜交原種在24～25 ℃的條件下保護(hù)72 h（卵色轉(zhuǎn)至赤豆色），再將其置于5 ℃的冷庫中冷藏，15 d后進(jìn)行人工浸酸孵化，浸酸7～9 min，其實(shí)用孵化率在96%以上。蔣龍?jiān)?014）設(shè)置不同鹽酸比重、鹽酸液溫、浸酸時(shí)間研究分析家蠶冷藏浸酸種對(duì)鹽酸刺激量的承受能力。莫云霞等（2016）采用不同的浸酸時(shí)間和鹽酸刺激量進(jìn)行處理，調(diào)查桂蠶N2原種催青蠶卵發(fā)育情況及蠶種孵化成績，旨在找出該品種冷藏浸酸種的最適浸酸范圍。徐杰等（2016）對(duì)比研究了不同冷藏時(shí)間條件下，常溫浸酸對(duì)浙江省現(xiàn)行生產(chǎn)使用家蠶品種孵化率的影響。【本研究切入點(diǎn)】目前，國內(nèi)雖然已有大量研究探討了影響短期冷藏浸酸蠶種的因素及提高其實(shí)用孵化率的途徑和措施，但全國各蠶區(qū)的家蠶品種、冷藏標(biāo)準(zhǔn)和冷藏浸酸方式并未統(tǒng)一，即使是同一家蠶品種，也會(huì)隨品種逐年繁育及推廣地區(qū)氣候條件和原種繁育技術(shù)的差異，導(dǎo)致品種發(fā)生遺傳變異（陳濤等，2012），因此有必要結(jié)合當(dāng)?shù)氐纳ＰQ生產(chǎn)習(xí)慣，制定出適宜的蠶種入庫和鹽酸刺激量標(biāo)準(zhǔn)體系?！緮M解決的關(guān)鍵問題】根據(jù)廣西蠶業(yè)生產(chǎn)出現(xiàn)原種生產(chǎn)供應(yīng)與冷藏不足的問題進(jìn)行設(shè)計(jì)，于2012～2016年在廣西現(xiàn)行家蠶品種兩廣二號(hào)原種短期冷藏浸酸的基礎(chǔ)上，探討保護(hù)時(shí)間、冷藏時(shí)間和浸酸時(shí)間3個(gè)因素對(duì)實(shí)用孵化率及延期冷藏實(shí)用孵化率和蟻蠶絕食生命力的影響，為調(diào)節(jié)蠶種供應(yīng)期及廣西家蠶原種短期冷藏浸酸處理過程中制定不同冷藏時(shí)間的蠶種入庫和鹽酸刺激量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)，也為改進(jìn)當(dāng)前的短期冷藏浸酸技術(shù)提供指導(dǎo)。

1 材料與方法

1. 1 試驗(yàn)材料

供試材料為廣西現(xiàn)行家蠶品種兩廣二號(hào)原種4個(gè)親本，分別為芙蓉×932、932×芙蓉、湘暉×7532和7532×湘暉，由廣西蠶業(yè)科學(xué)研究院原種場(chǎng)2014年下半年生產(chǎn)提供。

1. 2 試驗(yàn)方法

1. 2. 1 超短期冷藏原種最佳條件正交試驗(yàn) 根據(jù)庫前保護(hù)時(shí)間、冷藏時(shí)間及浸酸時(shí)間3個(gè)因素3水平進(jìn)行正交設(shè)計(jì)，每個(gè)品種均設(shè)9個(gè)試驗(yàn)小區(qū)，即采取L9（34）正交試驗(yàn)，每個(gè)試驗(yàn)區(qū)設(shè)10個(gè)蛾圈重復(fù)。每個(gè)試驗(yàn)親本選取同期羽化、形體適中、健康、成熟的母蛾產(chǎn)卵，產(chǎn)卵時(shí)間控制在6 h內(nèi)，產(chǎn)卵后將蠶卵置于25 ℃、濕度75%～85%的環(huán)境中保護(hù)。為減少母蛾區(qū)間差異，利用肉眼鑒別與卵齡相結(jié)合的方法，選擇卵色一致且死卵少的卵圈，一蛾圈四分，隨機(jī)搭配。經(jīng)48、56和64 h的保護(hù)后，入庫冷藏（經(jīng)中間溫度10～12 ℃冷藏6 h后入5 ℃內(nèi)庫冷藏），分別于冷藏20、30和40 d時(shí)將蠶種出庫浸酸。鹽酸刺激量與鹽酸液溫、鹽酸濃度及浸漬時(shí)間三者呈正相關(guān)，為了操作方便，固定鹽酸液溫（48 ℃）和濃度（比重1.093），以不同浸漬時(shí)間代表鹽酸刺激量的變化（余武昌等，2011）。中系品種（芙蓉×932和932×芙蓉）浸酸時(shí)間以目前生產(chǎn)上的浸酸標(biāo)準(zhǔn)時(shí)間（5 min）為中心，設(shè)4、5和6 min 3個(gè)浸酸水平；日系品種（湘暉×7532和7532×湘暉）浸酸時(shí)間以目前原種生產(chǎn)上的浸酸標(biāo)準(zhǔn)時(shí)間（6 min）為中心，設(shè)5、6和7 min 3個(gè)浸酸水平。浸酸后蠶卵在25 ℃、濕度75%～85%的環(huán)境中恒溫催青，分別調(diào)查各處理區(qū)的蠶卵孵化數(shù)和未孵化數(shù)，統(tǒng)計(jì)實(shí)用孵化率。

1. 2. 2 超短期冷藏原種延期冷藏試驗(yàn) 每個(gè)試驗(yàn)親本選取同期羽化、形體適中、健康、成熟的母蛾產(chǎn)卵，產(chǎn)卵時(shí)間控制在6 h內(nèi)，產(chǎn)卵后將蠶卵置于25 ℃、濕度75%～85%的環(huán)境中保護(hù)。每個(gè)品種的試驗(yàn)區(qū)（入庫保護(hù)48 h）和對(duì)照區(qū)（入庫保護(hù)72 h）分別設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)以8個(gè)卵圈（隨機(jī)選32個(gè)1/4卵圈）為一個(gè)試驗(yàn)區(qū)，每個(gè)親本設(shè)6個(gè)試驗(yàn)區(qū)。按設(shè)計(jì)隨機(jī)搭配好后入庫冷藏（經(jīng)中間溫度10～12 ℃冷藏6 h后入5 ℃內(nèi)庫冷藏），于冷藏60 d時(shí)將蠶種出庫浸酸。按生產(chǎn)浸酸標(biāo)準(zhǔn)（液溫48 ℃、比重1.093、浸酸時(shí)間為中系品種5 min、日系品種6 min）浸酸，浸酸后蠶卵在25 ℃、濕度75%～85%的環(huán)境中恒溫催青，蠶種出現(xiàn)苗蟻后逐日于上午9：00時(shí)調(diào)查實(shí)用孵化率。蟻蠶絕食生命力調(diào)查是每個(gè)試驗(yàn)區(qū)取同天孵化的蟻蠶300頭左右（黃揚(yáng)玉等，2011），分別用白紙包好，置于25～26 ℃、濕度75%～80%的條件下進(jìn)行絕食處理，待蟻蠶自然死亡時(shí)逐日于上午9：00時(shí)調(diào)查蟻蠶死亡頭數(shù)，直至全部死亡。以蟻蠶死亡率達(dá)50%時(shí)的經(jīng)過時(shí)間為絕食經(jīng)過時(shí)數(shù)。

1. 3 統(tǒng)計(jì)分析

以Excel 2007對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理和制圖，并采用SPSS 20.0進(jìn)行方差分析和差異顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2. 1 原種超短期冷藏條件下各因素的孵化效應(yīng)

從表1可知，芙蓉×932、932×芙蓉和湘暉×7532冷藏20～40 d，均能找到實(shí)用孵化率在92.00%以上的處理組合，其中，芙蓉×932有5個(gè)，932×芙蓉有6個(gè)，湘暉×7532有8個(gè)。但在20 d的冷藏時(shí)間中，7532×湘暉未找到實(shí)用孵化率達(dá)92.00%以上的處理組合。

從表2可看出，4個(gè)親本實(shí)用孵化率最高的處理組合分別是：芙蓉×932為48 h-30 d-6 min，932×芙蓉為48 h-30 d-5 min，湘暉×7532為48 h-30 d-7 min，7532×湘暉為64 h-40 d-6 min。除7532×湘暉外，其他親本均以保護(hù)48 h的實(shí)用孵化率最高，且隨保護(hù)時(shí)間的增加實(shí)用孵化率呈降低趨勢(shì)，故推測(cè)這些品種含多化性血統(tǒng)較多，發(fā)育快。

由表3可知，在本研究設(shè)計(jì)的因素水平中，3個(gè)因素對(duì)各親本的作用程度各不相同，其中，浸酸時(shí)間對(duì)芙蓉×932所起作用顯著[F=19.49>F0.05]，但對(duì)其他親本所起作用不顯著（FF0.05]，對(duì)其他親本所起作用不顯著；保護(hù)時(shí)間對(duì)4個(gè)親本所起作用均不顯著。

2. 2 4個(gè)親本特點(diǎn)分析

2. 2. 1 芙蓉×932 從保護(hù)時(shí)間來看，以保護(hù)48 h的實(shí)用孵化率最高，故推測(cè)芙蓉×932在經(jīng)過56 h保護(hù)后部分蠶卵滯育程度較深，解除滯育難。從冷藏時(shí)間來看，實(shí)用孵化率隨冷藏時(shí)間的增加而降低，說明此時(shí)該親本在40 d的冷藏期限內(nèi)仍然緩慢越年化。方差分析結(jié)果（表3）表明，浸酸時(shí)間對(duì)其實(shí)用孵化率影響顯著，說明鹽酸對(duì)芙蓉×932的刺激效果顯著，能有效提高其孵化率。從表4可看出，浸酸6 min的實(shí)用孵化率極顯著高于浸酸4和5 min（P<0.01，下同），說明該品種耐酸力較強(qiáng)。在短期冷藏浸酸條件下，適當(dāng)加大鹽酸刺激量，能有效提高蠶種的實(shí)用孵化率和孵化整齊度。

2. 2. 2 932×芙蓉 從極差分析結(jié)果（表2）可知，各因素最優(yōu)水平及主次排序?yàn)楸Ｗo(hù)時(shí)間48 h>冷藏時(shí)間30 d>浸酸時(shí)間5 min。方差分析發(fā)現(xiàn)，3個(gè)因素在設(shè)置的3個(gè)水平上對(duì)實(shí)用孵化率無顯著差異，但由于每個(gè)因素不同水平處理的平均實(shí)用孵化率均有低于92.00%的組合出現(xiàn)（保護(hù)56 h的平均實(shí)用孵化率為90.42%，冷藏20 d的平均實(shí)用孵化率為90.51%，浸酸6 min的平均實(shí)用孵化率為90.97%），說明冷藏時(shí)間過短或浸酸時(shí)間過長均會(huì)影響孵化效果，優(yōu)化3個(gè)因素的組合對(duì)于提高孵化率仍存在一定難度。

2. 2. 3 湘暉×7532 湘暉×7532的實(shí)用孵化率隨保護(hù)時(shí)間的增加而降低，故推測(cè)該品種較快進(jìn)入滯育，但3個(gè)冷藏時(shí)間水平間的實(shí)用孵化率差異不明顯。從浸酸時(shí)間來看，其實(shí)用孵化率隨浸酸時(shí)間的增加而升高，可適當(dāng)加大鹽酸刺激量以提高孵化率。從方差分析結(jié)果來看，保護(hù)時(shí)間、浸酸時(shí)間、冷藏時(shí)間3個(gè)因素對(duì)其實(shí)用孵化率的影響不顯著，且不同因素不同水平的組合均能獲得符合生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)的孵化率，說明湘暉×7532對(duì)3個(gè)因素的適應(yīng)范圍較寬，在短期冷藏入庫時(shí)可優(yōu)先考慮該品種進(jìn)行短期冷藏浸酸處理。

2. 2. 4 7532×湘暉 綜合極差分析和方差分析結(jié)果可知，保護(hù)時(shí)間和浸酸時(shí)間在3個(gè)水平上的實(shí)用孵化率差異不明顯，但實(shí)用孵化率隨冷藏時(shí)間的延長而升高，說明隨著冷藏時(shí)間的延長，蠶種的孵化機(jī)能和耐酸力均呈上升趨勢(shì)。從表4可看出，冷藏30和40 d的平均實(shí)用孵化率極顯著高于冷藏20 d，說明該品種不宜提早出庫，冷藏時(shí)間不少于30 d的孵化率才有保障。冷藏20 d的實(shí)用孵化率顯著下降的原因是浸酸死卵和催青死卵較多，說明該品種在經(jīng)20 d冷藏后耐酸力較低，極易產(chǎn)生浸酸死卵，因此在短期冷藏中應(yīng)盡量避免安排該品種進(jìn)行短期出庫處理。此外，該品種實(shí)用孵化率最高的浸酸時(shí)間為6 min，浸酸5和7 min的實(shí)用孵化率稍低，主要是5 min的浸酸刺激不夠，部分未孵化的蠶卵影響實(shí)用孵化率，而7 min的浸酸刺激稍過，部分浸酸死卵和催青死卵影響實(shí)用孵化率，說明該品種不耐酸，且浸酸安全范圍窄。

2. 3 短期冷藏蠶種延期冷藏的孵化率調(diào)查結(jié)果

由表5可看出，兩個(gè)親本試驗(yàn)區(qū)和對(duì)照區(qū)的平均孵化率均超過92.00%，符合生產(chǎn)要求。其中，芙蓉×932試驗(yàn)區(qū)的平均實(shí)用孵化率為94.09%，略高于其對(duì)照區(qū)（93.10%）；湘暉×7532試驗(yàn)區(qū)的平均實(shí)用孵化率為93.31%，略低于其對(duì)照區(qū)（94.26%）。蠶種實(shí)用孵化率經(jīng)反正弦角轉(zhuǎn)換后進(jìn)行方差分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩個(gè)親本的試驗(yàn)區(qū)和對(duì)照區(qū)差異均不顯著（P>0.05），說明芙蓉×932和湘暉×7532的短期冷藏種延期冷藏后對(duì)實(shí)用孵化率影響不明顯。

2. 4 短期冷藏蠶種延期冷藏的蟻蠶生命力調(diào)查結(jié)果

由表6可看出，芙蓉×932試驗(yàn)區(qū)蟻蠶的自然死亡時(shí)間從饑餓48 h開始，對(duì)照區(qū)則是從饑餓72 h開始；試驗(yàn)區(qū)中有1個(gè)處理的少量蟻蠶存活到192 h，而對(duì)照區(qū)有2個(gè)處理的少量蟻蠶存活到192 h；試驗(yàn)區(qū)和對(duì)照區(qū)蟻蠶饑餓至120 h的累計(jì)死亡率均超過50.00%，即芙蓉×932試驗(yàn)區(qū)和對(duì)照區(qū)絕食經(jīng)過時(shí)數(shù)為120 h。湘暉×7532試驗(yàn)區(qū)和對(duì)照區(qū)蟻蠶的自然死亡時(shí)間均從饑餓48 h開始，試驗(yàn)區(qū)蟻蠶只存活到168 h，而對(duì)照區(qū)有2個(gè)處理的少量蟻蠶存活到192 h；試驗(yàn)區(qū)和對(duì)照區(qū)蟻蠶饑餓至120 h的累計(jì)死亡率均超過50.00%，即湘暉×7532試驗(yàn)區(qū)和對(duì)照區(qū)絕食經(jīng)過時(shí)數(shù)也為120 h。方差分析結(jié)果表明，同時(shí)間內(nèi)芙蓉×932和湘暉×7532兩個(gè)親本試驗(yàn)區(qū)與對(duì)照區(qū)的蟻蠶死亡率差異不顯著，說明這兩個(gè)親本經(jīng)短期冷藏后再延期冷藏對(duì)蟻蠶的強(qiáng)健性無不良影響。

3 討論

生產(chǎn)上，不同家蠶品種對(duì)滯育的解除條件會(huì)有其特定要求，只有最適的解除條件才能獲得最佳的孵化效果。胡木林和黃自然（1999）研究表明，品種及不同批次均會(huì)影響蠶卵滯育解除的難易程度。邵金麗等（2004）研究表明，不同家蠶品種滯育卵對(duì)高溫沖擊浸酸法解除滯育的敏感性也不同。在本研究中，芙蓉×932、932×芙蓉和湘暉×7532均以在48 h入庫保護(hù)的平均實(shí)用孵化率最高，7532×湘暉則以在64 h入庫的平均實(shí)用孵化率最高；7532×湘暉對(duì)冷藏時(shí)間最敏感，冷藏20 d與冷藏30 d的實(shí)用孵化率存在極顯著差異；日系品種中湘暉×7532比7532×湘暉耐酸，中系品種中芙蓉×932比932×芙蓉耐酸，其中芙蓉×932和湘暉×7532通過加大鹽酸刺激量可有效提高其實(shí)用孵化率，尤其是芙蓉×932，鹽酸刺激量對(duì)提高孵化率有極顯著作用，而932×芙蓉和7532×湘暉在短期冷藏中的浸酸安全范圍很窄。因此，實(shí)際生產(chǎn)中蠶種提早出庫首先要選擇耐酸力強(qiáng)的品種。

家蠶品種、入庫前保護(hù)時(shí)間、冷藏時(shí)間、浸酸時(shí)間同時(shí)影響短期冷藏浸酸種對(duì)浸酸的敏感性（余武昌等，2012）。本研究通過正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，發(fā)現(xiàn)芙蓉×932、932×芙蓉和湘暉×7532冷藏20～40 d均能找到實(shí)用孵化率在92.00%以上的處理組合，其中，芙蓉×932有5個(gè)，932×芙蓉有6個(gè)，湘暉×7532有8個(gè)；但在20 d的冷藏中，7532×湘暉并未找到實(shí)用孵化率達(dá)92.00%以上的處理組合。4個(gè)親本實(shí)用孵化率最高的處理組合分別為：芙蓉×932為48 h-30 d-6 min，932×芙蓉為48 h-30 d-5 min，湘暉×7532為48 h-30 d-7 min，7532×湘暉為64 h-40 d-6 min。其中，超短期冷藏浸酸孵化效果較好的親本是芙蓉×932和湘暉×7532，二者試驗(yàn)區(qū)與對(duì)照區(qū)的實(shí)用孵化率差異均不顯著；兩個(gè)親本試驗(yàn)區(qū)和對(duì)照區(qū)蟻蠶的絕食經(jīng)過時(shí)數(shù)同為120 h，且同一時(shí)間內(nèi)試驗(yàn)區(qū)和對(duì)照區(qū)的蟻蠶死亡率差異也不顯著，說明短期冷藏種經(jīng)延期冷藏后對(duì)蠶種的實(shí)用孵化率和蠶種蟻蠶強(qiáng)健性無不良影響，故確定這兩個(gè)親本的短期冷藏種延期冷藏到60 d時(shí)最安全可行，可實(shí)現(xiàn)全年不間斷供應(yīng)蠶種及隨時(shí)孵化的需求，適應(yīng)廣西新時(shí)期蠶種市場(chǎng)完全開放的特點(diǎn)。

蔣龍?jiān)?014）認(rèn)為，在國內(nèi)幾乎所有蠶區(qū)在蠶種的冷藏浸酸處理方法中，均針對(duì)不同冷藏時(shí)間規(guī)定了嚴(yán)格的蠶種入庫和鹽酸刺激量標(biāo)準(zhǔn)。這些嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)雖然對(duì)于規(guī)范蠶種浸酸孵化處理有很好的作用，但對(duì)實(shí)際生產(chǎn)出現(xiàn)的延遲入庫，或冷藏時(shí)間變化及蠶品種不同等情況的適應(yīng)性，仍存在需要改進(jìn)完善的地方。本研究結(jié)果也表明，鹽酸刺激強(qiáng)度需根據(jù)入庫時(shí)的卵齡即滯育程度而定，綜合考慮入庫冷藏后的蠶卵是否繼續(xù)滯育還是開始活化，并根據(jù)實(shí)際情況適當(dāng)調(diào)整冷藏浸酸標(biāo)準(zhǔn)，方可獲得穩(wěn)定理想的實(shí)用孵化率。

4 結(jié)論

保護(hù)時(shí)間、冷藏時(shí)間和浸酸時(shí)間3個(gè)因素均對(duì)蠶種實(shí)用孵化率有一定影響，在實(shí)際生產(chǎn)中，蠶種提早出庫首先要選擇耐酸力強(qiáng)的品種，其次要根據(jù)入庫時(shí)的卵齡即滯育程度確定鹽酸刺激強(qiáng)度，最后在入庫冷藏時(shí)間到期后分批取出蠶卵解剖，了解蠶種的滯育進(jìn)程。同時(shí)根據(jù)生產(chǎn)成本、勞動(dòng)條件等實(shí)際情況，適當(dāng)調(diào)整冷藏浸酸標(biāo)準(zhǔn)，即可獲得最符合實(shí)際生產(chǎn)的理想實(shí)用孵化率。

參考文獻(xiàn)：

陳濤，李龍，李桂芳，候啟瑞，吳大洋. 2012. 夏秋用家蠶品種 9·芙×7·湘和洞·庭×碧·波在推廣繁育中的主要經(jīng)濟(jì)性狀變化[J]. 蠶業(yè)科學(xué)，38（3）：489-494. [Chen T，Li L，Li G F，Hou Q R，Wu D Y. 2012. Main economic character variations in extension and reproduction of silkworm varieties 9·Fu×7·Xiang and Dong·Ting×Bi·Bo for summer and autumn rearing[J]. Science of Sericulture，38（3）：489-494.]

陳義安，王曉芬，劉俊鳳，劉彬斌，張友洪. 2016. 我國現(xiàn)代蠶種業(yè)的發(fā)展現(xiàn)狀及對(duì)策[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，44（12）：106-110. [Chen Y A，Wang X F，Liu J F，Liu B B，Zhang Y H. 2016. Current development situation and countermeasures of modern silkworm seed industry in China[J]. Guizhou Agricultural Sciences，44（12）：106-110.]

胡木林，黃自然. 1999. 家蠶滯育卵隨時(shí)孵化技術(shù)研究[J]. 湛江師范學(xué)院學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），20（1）：65-68. [Hu M L，Huang Z R. 1999. Technique of the instantaneous hatching of the diapausing eggs of silkworm（Bombyx mori）[J]. Journal of Zhanjiang Normal College（Natural Science），20（1）：65-68.]

黃揚(yáng)玉，虞崇江，陸俁伽. 2011. 3種轉(zhuǎn)青卵面消毒處理對(duì)蠶種孵化率和蟻蠶生命率的影響試驗(yàn)[J]. 廣西蠶業(yè)，48（3）：1-3. [Huang Y Y，Yu C J，Lu Y J. 2011. The effect on hatching rate of silkworm and viability of newly-hatched larva under three methods of disinfection of egg surface [J]. Guangxi Sericulture，48（3）：1-3.]

賈玉霞，劉愛梅，房德文. 2005. 蠶種冷藏浸酸非常規(guī)處理技術(shù)的研究[J]. 山東蠶業(yè)，（4）：2-3. [Jia Y X，Liu A M，F(xiàn)ang D W. 2005. Study on unconventional treatment technology of hydrochlorizing after refrigeration of silkworm eggs[J]. Shandong Sericulture，（4）：2-3.]

蔣龍?jiān)? 2014. 家蠶冷藏浸酸蠶種的鹽酸刺激量承受力試驗(yàn)[J]. 中國蠶業(yè)，35（2）：30-34. [Jiang L Y. 2014. The capability of acid stimulus dose of silkworm（Bombyx mori） eggs by acid treatment after refrigeration[J]. China Sericulture，35（2）：30-34.]

莫云霞，蔣玉蓮，李燕飛，陳枝. 2016. 桂蠶N2原種冷藏浸酸種適宜浸酸范圍分析[J]. 廣西蠶業(yè)，53（3）：21-23. [Mo Y X，Jiang Y L，Li Y F，Chen Z. 2016. Analysis on sui-table acid treatment range of silkworm eggs by acid treatment after refrigeration of Guican N2[J]. Guangxi Sericulture，53（3）：21-23.]

邵金麗，林健榮，廖富蘋，倪惠波，霍永康. 2004. 不冷藏或短期冷藏家蠶滯育卵的隨時(shí)孵化技術(shù)研究[J]. 蠶業(yè)科學(xué)，30（3）：308-310. [Shao J L，Lin J R，Liao F P，Ni H B，Huo Y K. 2004. Study on the technique for terminating the diapause of Silkworm，Bombyx mori，eggs immediately[J]. Science of Sericulture，30（3）：308-310.]

徐杰，孟正樂，何恩潔，朱炳榮. 2016. 蠶種常溫浸酸技術(shù)研究初報(bào)[J]. 桑蠶通報(bào)，47（3）：26-28. [Xu J，Meng Z L，He E J，Zhu B R. 2016. One preliminary study on acid treatment of silkworm egg at room temperature[J]. Bulletin of Sericulture，47（3）：26-28.]

徐世清，陳息林，司馬楊虎，鄭必平，虞曉華，甲斐英則，徐俊良. 2000. 鹽酸刺激量對(duì)家蠶卵酯酶A4活性的影響及其與蠶卵活化的關(guān)系[J]. 蠶業(yè)科學(xué)，26（1）：20-26. [Xu S Q，Chen X L，Sima Y H，Zheng B P，Yu X H，Hidenori K，Xu J L. 2000. Effect of acid stimulus-dose on esterase A4 activity and its relationship with activation of acid-treated eggs of silkworm，Bombyx mori[J]. Science of Sericulture，26（1）：20-26.]

楊明觀，徐曉忠，吳春泉，張國平，陳家森，葉士璟，葉永青. 1996. 桑蠶卵電暈人工孵化技術(shù)研究——IV短期冷藏蠶種的電暈人工孵化效果[J]. 蠶桑通報(bào)，27（2）：12-14. [Yang M G，Xu X Z，Wu C Q，Zhang G P，Chen J S，Ye S J，Ye Y Q. 1996. Study on hatching silkworm eggs by activation of corona—IV Hatching effects of short-term refrigirated silkworms by activation of corona[J]. Bulletin of Sericulture，27（2）：12-14.]

余愛群，陳錦漢，余炳球，張學(xué)武，白碧璋. 1997. 中短期冷藏浸酸種隨時(shí)孵化法的研究[J]. 廣東蠶業(yè)，31（3）：50-55. [Yu A Q，Chen J H，Yu B Q，Zhang X W，Bai B Z. 1997. Study on the technique of artificial hatching of domant eggs for short-period rifrigirated silkworm eggs [J]. Guangdong Sericulture，31（3）：50-55.]

余武昌，蔣滿貴，李國棟，陽誠，何珊珊，莫云霞，李燕飛. 2011. 不同庫外保護(hù)時(shí)間和冷藏時(shí)間對(duì)冷藏浸酸種孵化率的影響[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，42（2）：201-204. [Yu W C，Jiang M G，Li G D，Yang C，He S S，Mo Y X，Li Y F. 2011. Effect of protection and refrigeration time alteration on hatching rate of acid-treated silkworm（Bombyx mori） eggs[J]. Journal of Southern Agriculture，42（2）：201-204.]

余武昌，黎書明，蔣滿貴，李國棟. 2012. 不同庫外保護(hù)時(shí)間和冷藏時(shí)間對(duì)滯育卵冷藏浸酸種孵化率的影響[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，43（7）：1054-1057. [Yu W C，Li S M，Jiang M G，Li G D. 2012. Effect of protection and refrigeration time outside storeroom on hatching rate of acid-treated diapause silkworm（Bombyx mori） eggs[J]. Journal of Southern Agriculture，43（7）：1054-1057.]

章豪，嚴(yán)會(huì)超，鐘楊生，林健榮，吳福泉. 2010. 9·芙赤豆色卵的入庫冷藏期限與浸酸孵化效果的關(guān)聯(lián)分析[J]. 廣東蠶業(yè)，44（2）：21-24. [Zhang H，Yan H C，Zhong Y S，Lin J R，Wu F Q. 2010. Correlation analysis between cold storage period and incubation effect of red bean color eggs of the silkworm variety 9·Fu[J]. Guangdong Sericulture，44（2）：21-24.]

（責(zé)任編輯 蘭宗寶）