腸道EV71病毒檢測在臨床中的運(yùn)用

鄒國吉

作者單位：泉州市泉港區(qū)醫(yī)院兒科，福建 泉州 362800

手足口?。╤and-foot-and-mouth disease，HFMD）是一種常見傳染?。ǘ嘁娪趦嚎疲?，該病的臨床表現(xiàn)為兒童的口腔、手腳等部位發(fā)生皰疹。該病主要由腸道病毒引起，在12歲以下兒童多發(fā)，病發(fā)嚴(yán)重時(shí)則會(huì)引起呼吸系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)病變，有潛在死亡風(fēng)險(xiǎn)。引起手足口病的病毒很多，目前已發(fā)現(xiàn)十余種病毒類型，其中最常見兩種分別是CA16和EV71，本文重點(diǎn)探討EV71。EV71能導(dǎo)致兒童感染手足口病，它產(chǎn)生于腸道病毒71型急性感染期。據(jù)資料分析[1]，人體的腸道病毒71型Ig-M也產(chǎn)生于急性感染期。膠體金卡片法應(yīng)用捕獲法的原理檢測人的血清中的EV71-IgM，是病毒急性感染的主要輔助檢測手段。針對(duì)于手足口病，EV71病毒的快速檢測是重要的輔助診療方法[2]，有利于該病的前期發(fā)現(xiàn)和治療的及時(shí)性。本次研究的100例研究樣本，采用膠體金免疫層析法進(jìn)行檢測，目的在于通過血清腸道EV71病毒抗體的快速檢測，探討腸道EV71病毒檢測在手足口病患兒臨床中的運(yùn)用，具體報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 基本資料

選取我院2016年6月—2017年6月收治的手足口病患兒100例。男患兒60例，女患兒40例，年齡6個(gè)月～11歲，平均年齡在（4.3±2.5）歲，病程3～4天，臨床表現(xiàn)為發(fā)熱，伴有不同程度的潰瘍（口腔、手足部位）。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

流行季節(jié)發(fā)病，多為4歲前的兒童；多數(shù)病例有發(fā)熱，少數(shù)病例無發(fā)熱。在口腔和手足部出現(xiàn)皮疹，腸道病毒EV71檢出陽性。

1.3 檢測方法

1.3.1 儀器 采用膠體金免疫層析法進(jìn)行檢測，于萬泰生物藥業(yè)股份有限公司采購EV71-IgM試劑盒。

1.3.2 采集標(biāo)本 采集所有樣本患兒的靜脈血2.5 ml并置于促凝生化管，離心分離血清備用。

1.3.3 取血清20 μl，稀釋后嚴(yán)格按照試劑盒操作說明書進(jìn)行，35 min后獲得檢測結(jié)果。

1.4 觀察指標(biāo)

記錄所有患兒的EV71-IgM檢測陽性結(jié)果。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 29.0分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用（%）表示，組間比較進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05判定為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患兒不同性別檢測

女性患兒的EV71-IgM陽性率檢出率為35.6%，男性患兒為43.2%，兩組間陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具體見表1。

2.2 患兒不同年齡段檢測

5歲以上及小于1歲患兒的陽性率最低，分別為23.4%和24.6%。3～4歲和4～5歲年齡段患兒EV71-IgM陽性檢出率較高，分別為54.9%和42.5%，其次為2～3歲年齡段患兒，陽性率為34.5%。

3 討論

EV71病毒感染者主要臨床癥狀是發(fā)熱，口腔和手足皮疹等，臨床病例病情緊急，需要迅速檢測確診，病情時(shí)常伴有發(fā)熱癥狀。重癥患者時(shí)常累及自身神經(jīng)系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)使之病變并伴隨嚴(yán)重危害兒童健康的無菌性腦炎、神經(jīng)源性腦水腫[3]。不同手段的操作方法、所需時(shí)間以及對(duì)設(shè)備要求不一樣，EV71特異性IgM抗體檢測手段如酶聯(lián)免疫吸附法則需要較長的分析時(shí)間[4]。雖然酶聯(lián)免疫吸附法和熒光定量法兩種方法的特異性檢出率均較高，但不便于推廣到臨床中應(yīng)用，熒光定量法設(shè)備比較昂貴。一些基層醫(yī)院受硬件條件限制，采用膠體金免疫層析法就可以對(duì)患兒進(jìn)行EV71-IgM篩查診斷，操作簡單快速且有效，便于對(duì)患兒采取積極的治療措施。對(duì)挽救重癥患兒生命有重要的意義，而且不耽誤病情，對(duì)手足口病患兒的臨床治療有重要作用。

經(jīng)過對(duì)本次結(jié)果的分析討論，隨著年齡的增長，兒童的機(jī)體免疫力日漸增強(qiáng)，這在一定程度上降低了感染病毒的概率，而年齡不足1歲的幼兒體內(nèi)尚存在一些母體免疫物質(zhì)，該年齡段的幼兒其陽性率相對(duì)處于較低水平。本次結(jié)果還顯示，3～5歲是最易患上幼兒手足口病的年齡段?？赡苁且?yàn)?～5歲的年齡段期間，幼兒的淋巴結(jié)尚未發(fā)育成熟，因此本次研究認(rèn)為，血清中的補(bǔ)體含量少，導(dǎo)致屏障作用不夠強(qiáng)，使兒童更容易遭受病毒侵襲，并且病毒容易在兒童體內(nèi)感染后擴(kuò)散[5]。

通過數(shù)據(jù)分析得出，該實(shí)驗(yàn)共檢出了抗體陽性40例，其中年齡9個(gè)月～5歲，平均年齡（3.2±1.7）歲。患兒不同年齡范圍檢測EV71-IgM的結(jié)果顯示，確診手足口病最高的兩個(gè)年齡范圍為0～1歲和1～2歲，分析原因，可能是患兒機(jī)體內(nèi)的母體所給予的抗體還沒有完全消失，故確診率很高。5歲以上的患兒，機(jī)體已經(jīng)相應(yīng)增強(qiáng)[6]了自身免疫力。5歲以上及小于1歲患兒的陽性率則最低，分別為23.4%和24.6%。3～4歲和4～5歲年齡段患兒EV71-IgM陽性檢出率較高，分別為54.9%和42.5%，其次為2～3歲年齡段患兒，陽性率為34.5%。這是因?yàn)?～4歲年齡段的患兒，屬于低齡幼兒，其機(jī)體淋巴結(jié)功能尚不完全成熟，機(jī)體抵抗能力較弱，且血清補(bǔ)體水平低，易發(fā)生感染，并且感染后易擴(kuò)散。

由以上分析得知，兒童易感手足口病的年齡階段為3～5歲。

在手足口病患兒中，由文獻(xiàn)報(bào)道，男童感染率略高于女童[7-8]，且患兒男女的比例為1.8∶ 1。本次研究所收集的100例EV71-IgM陽性患兒中，男童女童分別由26例和14例，比值為1.85∶ 1，數(shù)值與上述文獻(xiàn)報(bào)道相近。

手足口病是由多種腸道病毒引起的一種全球性的疾病，會(huì)嚴(yán)重危及兒童健康，患病后病情發(fā)展十分迅速，并且容易傳染。我國近年來也呈現(xiàn)出高發(fā)的趨勢，特別容易在兒童中迅速傳播，常見的以人類為主要宿主的腸道病毒的有CA16和EV71[9-10]。但EV71病毒感染比CA16更加危險(xiǎn)，EV71易累及呼吸系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)，甚至?xí)l(fā)生肺功能衰竭而導(dǎo)致死亡。

針對(duì)此傳染性疾病，實(shí)驗(yàn)室可以開展的檢測手段有ELASAH、膠體金卡片、PCR，這三種手段都能檢測EV71病毒。病毒核酸和酶聯(lián)檢測法[8]特異性強(qiáng)，檢出率高，因此醫(yī)院多采用此種方法，同時(shí)該檢測還需一定時(shí)間，但對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)備要求高且完整[11]。應(yīng)結(jié)合醫(yī)院實(shí)際情況選擇合適的檢測手段，膠體金卡片法適合流動(dòng)人口數(shù)量較大時(shí)的檢測，該檢測法操作簡單且快速，能及時(shí)進(jìn)行篩查診斷，對(duì)臨床治療意義重大。

該病的臨床病例多是急癥的患兒，患兒的臨床表現(xiàn)為發(fā)熱，因此選擇合適的檢測手段快速的檢測確診對(duì)及時(shí)挽救重癥兒童的生命十分重要。手足口病嚴(yán)重危害幼兒健康，其病情發(fā)展迅速，復(fù)雜多變，且并發(fā)癥較為難治。設(shè)備不完善的基層醫(yī)院，應(yīng)結(jié)合實(shí)際情況，應(yīng)該采用有效快捷的篩查方法及時(shí)診斷、隔離、治療手足口病[12]。同時(shí)，膠體金卡片法能夠快速檢測該病。

表1 不同性別患兒的EV71-IgM檢測結(jié)果比較

因此，對(duì)于設(shè)備尚不完善的基層醫(yī)院，要基于實(shí)際情況，要積極采取有效快速的檢測手段，才能給予患兒及時(shí)的治療。

綜合上述，找到一種能夠快速檢測腸道血清EV71病毒抗體的方法對(duì)手足口病的診斷和治療有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。