消退素D1改善2型糖尿病小鼠胰島素抵抗

朱玉娟， 王瑞英，姚 敏，曹星華，李彩格

(1.河北醫(yī)科大學(xué)，河北 石家莊 050000；2.河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院 內(nèi)分泌科，河北 石家莊 050000)

胰島素抵抗和慢性炎性反應(yīng)密切相關(guān)?？刂蒲仔苑磻?yīng)的發(fā)生與發(fā)展有助于改善胰島素抵抗。近期發(fā)現(xiàn)ω- 3多不飽和脂肪酸的衍生物消退素D1(resolvin D1，RVD1)是一類(lèi)新型的抗炎介質(zhì)。其對(duì)胰島素抵抗是否有改善作用仍不清楚，本研究探討RVD1對(duì)2型糖尿病(T2DM)小鼠胰島素抵抗的作用及其機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料:SPF級(jí)6周齡C57BL/6雄性小鼠30只[北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，合格證號(hào)：SCXK(京)2012- 0001]。胰島素試劑盒(中國(guó)原子能研究所)；TNF-α及IL- 6 ELISA試劑盒(上海森雄科技實(shí)業(yè)有限公司)；兔抗鼠p-p38 MAPK抗體(Abcam公司)；兔抗鼠p38 MAPK抗體(BioWord Technology公司)；RVD1(Cayman公司)

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 小鼠分組及處理：將小鼠隨機(jī)分為：對(duì)照組(n=10)和模型組(n=20)。模型組通過(guò)高脂飼料聯(lián)合小劑量鏈唑霉素(streptozocin,STZ)(100 ng/mL)制備T2DM模型，將T2DM小鼠隨機(jī)分為T(mén)2DM組和RVD1組，每組n=10，RVD1組每日固定時(shí)間腹腔注射RVD1(100 ng/只)，對(duì)照組及T2DM組應(yīng)用等同劑量的PBS緩沖液，共干預(yù)21 d。

1.2.2 血糖及血脂的測(cè)定：用雅培血糖儀及Cardiochek血脂儀Sn3016348分別測(cè)定血糖和血脂。

1.2.3 胰島素抵抗指數(shù)的測(cè)定：用免疫放射定量法測(cè)定胰島素水平，計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)。

1.2.4 肝臟組織TNF-α、IL- 6及p38 MAPK活化水平的測(cè)定：制備肝臟組織勻漿液，ELISA檢測(cè)TNF-α和IL- 6水平，Western blot檢測(cè)p38 MAPK活化水平。

2 結(jié)果

2.1 小鼠體質(zhì)量及血糖的變化:與對(duì)照組相比，T2DM組小鼠體質(zhì)量及血糖明顯增加(P<0.05)。

2.2 小鼠TG、CHOL、HOMA-IR、IL- 6、TNF-α及p38 MAPK的活化水平的變化:與對(duì)照組相比較，T2DM組小鼠TG、CHOL、HOMA-IR、IL- 6、TNF-α及p38 MAPK活化水平均升高(P<0.05)。與T2DM相比，RVD1組小鼠TG、CHOL、HOMA-IR、IL- 6、TNF-α及p38 MAPK活化水平均回降(P<0.05)(表1，圖1)。

3 討論

近期發(fā)現(xiàn)ω- 3多不飽和脂肪酸的衍生物RVD1是一類(lèi)新型的抗炎介質(zhì)。其在多種炎癥性疾病中均有良好的抗炎效果[1]。本研究用RVD1 干預(yù)小鼠2周后對(duì)血糖和體質(zhì)量影響不明顯，延長(zhǎng)干預(yù)至4周和劑量加倍可能對(duì)體質(zhì)量和血糖產(chǎn)生更好的效果。RVD1組小鼠的三酰甘油(TG)、總膽固醇(CHOL)和胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)均較T2DM組明顯下降。提示RVD1可以改善2型糖尿病小鼠的胰島素抵抗。

胰島素抵抗和慢性炎性反應(yīng)密切相關(guān)，TNF-α、IL- 6是最具代表的兩個(gè)炎性反應(yīng)因子，本實(shí)驗(yàn)T2DM組小鼠肝臟中TNF-α和IL- 6較對(duì)照組高，RVD1組IL- 6和TNF-α水平較T2DM組下降。RVD1可以減少炎性反應(yīng)因子水平改善胰島素抵抗。

表1 各組小鼠的血脂、胰島素抵抗指數(shù)和炎性因子水平Table 3 Blood lipids, insulin resistance index and inflammatory factors of each group in

*P<0.05 compared with control group;#P<0.05 compared with T2DM group.

*P<0.05 compared with control group; #P<0.05 compared with T2DM group圖1 小鼠肝臟中p38MAPK蛋白活化水平Fig 1 Activation level of p38MAPK protein in liver of each group in

RVD1的抗炎機(jī)制仍未明確。在骨關(guān)節(jié)炎模型中，RVD1可以阻斷IL- 1β誘導(dǎo)的p38 MAPK磷酸化，減輕炎性反應(yīng)的進(jìn)展[2]。RVD1的同源衍生物RVD2在支氣管炎性中，也能降低p38 MAPK的磷酸化水平，減少引起氣道高反應(yīng)的炎性因子水平[3]。本研究中T2DM組p38 MAPK活化水平較對(duì)照組高，與T2DM組比較，RVD1組p38 MAPK活化水平有所下降。表明2型糖尿病小鼠肝臟中p38 MAPK信號(hào)通路活躍，RVD1 干預(yù)后p38MAPK信號(hào)通路被抑制。

綜上表明RVD1可以改善2型糖尿病小鼠肝臟胰島素抵抗，其機(jī)制可能與抑制p38 MAPK炎性信號(hào)通路減少炎性因子有關(guān)。