臨床實(shí)驗(yàn)室多臺(tái)生化分析儀極差法比對中分析質(zhì)量要求研究

謝文閣， 李 穩(wěn)， 黃 寧， 李金星

（山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，山東 濟(jì)南250011）

目前，臨床實(shí)驗(yàn)室擁有多套檢測系統(tǒng)已經(jīng)相當(dāng)普遍。多系統(tǒng)間的比對，傳統(tǒng)方法復(fù)雜、昂貴且費(fèi)時(shí)。WS/T 407—2012《醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)定量檢驗(yàn)結(jié)果的可比性驗(yàn)證指南》[1]中的極差法比對，方法簡單，經(jīng)濟(jì)實(shí)用。分析質(zhì)量要求在該法中很關(guān)鍵，決定了檢測的重復(fù)次數(shù)和檢測結(jié)果的判斷。有關(guān)臨床實(shí)驗(yàn)室多系統(tǒng)極差法比對的文獻(xiàn)較常見[2-3]，但研究分析質(zhì)量要求的文獻(xiàn)不多。本研究將分析19個(gè)常規(guī)生化項(xiàng)目在3臺(tái)生化儀上的比對數(shù)據(jù)，對生物學(xué)變異、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)長期不精密度及允許變異系數(shù)（coefficient of variation，CV）在極差法比對中的應(yīng)用進(jìn)行探討。

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑

AU5800全自動(dòng)生化分析儀、AU680全自動(dòng)生化分析儀、AU5400全自動(dòng)生化分析儀（分別簡稱AU5800、AU680、AU5400，美國貝克曼-庫爾特公司）。試劑：肌酐采用上海德賽公司生產(chǎn)的試劑和校準(zhǔn)品，美國貝克曼公司原裝質(zhì)控品；鈣采用四川邁克公司生產(chǎn)的試劑和校準(zhǔn)品，美國貝克曼公司原裝質(zhì)控品；其他項(xiàng)目均采用美國貝克曼公司原裝試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。

1.2 比對項(xiàng)目

19項(xiàng)常規(guī)生化項(xiàng)目。3臺(tái)儀器比對8項(xiàng)，2臺(tái)儀器比對11項(xiàng)。見表1、表2。

1.3 標(biāo)本及數(shù)據(jù)來源

山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院臨床患者新鮮血清標(biāo)本，高、低2個(gè)水平（與室內(nèi)質(zhì)控水平相近）。 山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科2015年12月—2016年5月的室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)。

1.4 方法

1.4.1 確定檢測系統(tǒng)不精密度 用本實(shí)驗(yàn)室長期（6個(gè)月）室內(nèi)質(zhì)控高、低2個(gè)水平CV，在同一質(zhì)控水平間進(jìn)行比較。若最大CV與最小CV的比值＜2，則按公式CV合并=[（CV12+CV22+…CVn2）/n]1/2計(jì)算合成CV，式中n表示參與比對的檢測系統(tǒng)數(shù)。此合成CV代表了檢測系統(tǒng)的室內(nèi)不精密度，用于查表確定比對項(xiàng)目重復(fù)測定次數(shù)及確定室內(nèi)不精密度臨界極差。

1.4.2 確定樣本濃度范圍 計(jì)算每個(gè)質(zhì)控品2個(gè)水平在所有比對儀器上的總均值，以總均值±20%為比對項(xiàng)目濃度范圍。

1.4.3 確定比對結(jié)果可接受標(biāo)準(zhǔn) 以WS/T 403—2012《臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量指標(biāo)》[4]中的允許CV為接受標(biāo)準(zhǔn) 。

1.4.4 確定重復(fù)測定次數(shù) 根據(jù)各項(xiàng)目的合成CV和可接受標(biāo)準(zhǔn)，查閱極差檢驗(yàn)臨界值表（WS/T 407—2012附錄A）[1]確定樣本重復(fù)檢測次數(shù)。

1.4.5 計(jì)算比對偏差 R=[（最大均值-最小均值）/總均值]×100%，式中R為比對偏差。

1.4.6 確定中間精密度臨界極差[5-6]2臺(tái)儀器比較：CR0.95=2.8×合成CV/n ×100%；3臺(tái)儀器比較：CR0.95=3.3×合成CV/n ×100%；式中CR0.95為臨界極差，n為重復(fù)測定次數(shù)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用 Excel 2010軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

2 結(jié)果

2.1 3臺(tái)生化儀19個(gè)常規(guī)生化項(xiàng)目的長期不精密度及合成CV

同一質(zhì)控水平的每個(gè)項(xiàng)目的長期不精密度及合成CV都＜允許CV；50%的合成CV＞1/3個(gè)體內(nèi)生物變異。見表1、表2。

表1 3臺(tái)生化分析儀8個(gè)常規(guī)生化項(xiàng)目的長期不精密度及合成CV （%）

表2 2臺(tái)生化分析儀11個(gè)常規(guī)生化項(xiàng)目的長期不精密度及合成CV （%）

2.2 用3種分析質(zhì)量要求作為標(biāo)準(zhǔn)的19項(xiàng)常規(guī)生化項(xiàng)目極差法比對結(jié)果

每個(gè)項(xiàng)目的比對偏差都＜允許CV；50%的比對偏差＞1/3個(gè)體內(nèi)生物變異，20%的比對偏差＞臨界極差。見表3。

表3 用3種分析質(zhì)量要求作標(biāo)準(zhǔn)的19項(xiàng)常規(guī)生化項(xiàng)目極差法比對結(jié)果 （%）

續(xù)表3 （%）

3 討論

WS/T 407—2012[1]根據(jù)來源列出了7項(xiàng)分析質(zhì)量要求（按優(yōu)先順序）：臨床研究結(jié)果，醫(yī)生臨床經(jīng)驗(yàn)，生物學(xué)變異（＜1/3個(gè)體內(nèi)生物變異），室間質(zhì)評(píng)數(shù)據(jù)，認(rèn)可機(jī)構(gòu)規(guī)定，室內(nèi)長期不精密度，國家或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（允許CV）。本研究比較了3個(gè)。

如果用1個(gè)分析質(zhì)量要求作判斷標(biāo)準(zhǔn)，則實(shí)驗(yàn)室長期室內(nèi)質(zhì)控CV首先應(yīng)滿足該標(biāo)準(zhǔn)的要求。本研究中3臺(tái)儀器的室內(nèi)長期質(zhì)控的合成CV都＜允許CV，說明允許CV適合用作判斷標(biāo)準(zhǔn)。而合成CV中的50%都＞1/3個(gè)體內(nèi)生物變異，說明1/3個(gè)體內(nèi)生物變異太嚴(yán)格，不適合作為判斷標(biāo)準(zhǔn)。

在檢測系統(tǒng)性能良好的前提下，如果用1個(gè)分析質(zhì)量要求作判斷標(biāo)準(zhǔn)，大部分結(jié)果都無法通過比對，則說明該分析質(zhì)量要求太嚴(yán)格，不適合用作判斷標(biāo)準(zhǔn)。用允許CV作判斷標(biāo)準(zhǔn)，19項(xiàng)常規(guī)生化檢測項(xiàng)目的可比性驗(yàn)證都能通過，說明允許CV適合作為判斷標(biāo)準(zhǔn)；用1/3個(gè)體內(nèi)生物變異作判斷標(biāo)準(zhǔn)，有50%的結(jié)果比對不通過，說明1/3個(gè)體內(nèi)生物變異不適合作為判斷標(biāo)準(zhǔn)。

從統(tǒng)計(jì)學(xué)的角度來看，允許CV是相對標(biāo)準(zhǔn)差，比對偏差是相對極差，兩者相比不是同類相比，所以用作極差法比對的判斷標(biāo)準(zhǔn)，允許CV有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的缺陷。

比對的3臺(tái)生化儀同屬美國貝克曼-庫爾特公司的AU系列，試劑、質(zhì)控品和校準(zhǔn)品來源相同，比對在同一天進(jìn)行，但操作人員不一樣，試劑批號(hào)未必相同。所以可將比對試驗(yàn)的不精密度視為中間不精密度。中間不精密度是計(jì)量學(xué)術(shù)語，臨床實(shí)驗(yàn)室稱為室內(nèi)不精密度，來自室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)[4]。

實(shí)驗(yàn)室在中間不精密度條件下，判斷2組或多組數(shù)據(jù)均值的極差大小，不是直接用中間不精密度做標(biāo)準(zhǔn)，而是用計(jì)算出的臨界極差[5-6]作標(biāo)準(zhǔn)。臨界極差是一個(gè)極差值，幾個(gè)測試結(jié)果的極差有95%的概率不超過此值。

以中間不精密度臨界極差作為標(biāo)準(zhǔn)，有2個(gè)優(yōu)點(diǎn)：一是同類相比（極差和極差比）；二是用實(shí)驗(yàn)室長期室內(nèi)質(zhì)控CV作為總中間不精密度，更能反映實(shí)驗(yàn)室實(shí)際工作中的不精密度。但也有2個(gè)缺點(diǎn)：一是臨界極差需要計(jì)算，不如允許CV方便；二是和允許CV比，又顯嚴(yán)格。本研究中有20%的項(xiàng)目用此法比對不通過。這些沒通過的項(xiàng)目，可以用允許CV作為判斷標(biāo)準(zhǔn)。

綜上所述，在目前的技術(shù)水平下，將允許CV作為判斷標(biāo)準(zhǔn)，合理且方便，但其屬于異類相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的缺陷；中間不精密度臨界極差屬于同類相比，但稍嚴(yán)格，可與允許CV聯(lián)合使用；1/3個(gè)體內(nèi)生物變異為異類相比且太嚴(yán)格，不適合作為判斷標(biāo)準(zhǔn)。

目前，尚未見用多臺(tái)生化分析儀進(jìn)行極差法比對的分析質(zhì)量要求研究的報(bào)道。室內(nèi)長期不精密度在極差法比對中的應(yīng)用，在以往文獻(xiàn)中也未見報(bào)道。本研究為以后研究極差法比對提供了新的思路。