9～10周齡CB6F1與B6CF1小鼠血生化、主要臟器質量及臟器系數(shù)測定*

劉 科 施赫赫 楊 林 夏冠玲 劉盛來 王 剛

(廣東省醫(yī)學實驗動物中心，佛山 528248)

CB6F1小鼠和B6CF1小鼠分別為近交系雌性BALB/c和近交系雄性C57BL/6，及近交系雌性C57BL/6和近交系雄性BALB/c的雜交F1代。目前，雜交F1代小鼠在干細胞、移植免疫、細胞動力學、單克隆抗體等研究中已經(jīng)廣泛應用[1]。CB6F1小鼠和B6CF1小鼠作為常用F1品系，主要研究有：紅白血病模型[2-3]、異基因NK細胞減輕移植物抗宿主病的研究[4-5]、移植物抗實體瘤的研究[6-7]、制備遺傳修飾小鼠模型和短期致癌性研究[8-9]等。本實驗通過BALB/c和C57BL/6相互雜交，分別獲得CB6F1小鼠和B6CF1小鼠，對9～10周齡成年CB6F1小鼠和B6CF1小鼠的血生化指標、主要臟器質量和臟器系數(shù)進行測定和分析，為相關科研實驗提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

SPF級BALB/c和C57BL/6由廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供，合格證[SCXK(粵)2013-0002]，雜交繁育獲得CB6F1小鼠和B6CF1小鼠。9～10周齡，每個品系40只，雌雄各半，共80只。飼養(yǎng)在屏障系統(tǒng)中，空氣潔凈度7級，室溫20～25 ℃，濕度40%～70%，每日光照10 h，動物自由采食和飲水。飼料成分：粗蛋白21.3%，粗纖維3.5%，粗灰分7.2%，粗脂肪4.8%，鈣1.3%，磷0.9%，鈉0.24%。飼料經(jīng)60Co輻照滅菌、墊料經(jīng)高壓消毒處理，飲用水是凈化水系統(tǒng)制備的純凈水(RO水)，添加鹽酸酸化處理，至pH=2～3。

1.2 主要儀器

德國賽多利斯電子分析天平(BS223S)，上海安亭科學儀器廠生產(chǎn)的低速大容量離心機(TDL-5-A)，意大利愛康公司生產(chǎn)的全自動血液生化分析儀(ECHO)，用激光計數(shù)法檢驗。

1.3 測定方法

隨機選取9～10周齡SPF級CB6F1與B6CF1小鼠各40只，雌雄各半?？崭?2 h，分別稱體質量，麻醉后摘眼球采血，運用全自動生化分析儀測定血生化指標，頸椎脫臼處死，迅速解剖取出主要臟器(心、肝、脾、肺、胃、左腎、右腎、腎上腺、膀胱、睪丸、附睪、子宮、卵巢)，剔除脂肪和筋膜，用濾紙吸干表面的液體，心臟需剪開，用濾紙吸干血液，稱其質量并計算臟器系數(shù)。臟器系數(shù)(%)=臟器質量(g)/體質量(g)×100。

1.4 統(tǒng)計方法

2 結果

2.1 血生化指標

血生化指標測定結果見表1，CB6F1小鼠雌性AST、ALP、ALB、A/G、BUN、CREA 顯著高于雄性，GLOB、TBIL、GLU、CHOL、TG顯著低于雄性(P<0.05)，其余無顯著性差異(P>0.05)。B6CF1小鼠雌性GLOB、TBIL、BUN、CREA、CHOL 顯著高于雄性，ALP、ALB、A/G、TG顯著低于雄性(P<0.05)，其余無顯著性差異(P>0.05)。

注：同品系雄性與雌性比較*P<0.05，B6CF1與CB6F1同性別比較△P<0.05

Note: Female compared with male in same strain*P<0.05，CB6F1 compared with B6CF1 in same gender△P<0.05

同性別不同品系之間，雌性CB6F1小鼠ALP、ALB、A/G、TBIL、CHOL、TG顯著高于B6CF1小鼠，GLOB、GLU、BUN、CREA顯著低于B6CF1小鼠(P<0.05)，其余無顯著性差異(P>0.05)。雄性CB6F1小鼠TP、GLOB、TBIL、GLU、CHOL顯著高于B6CF1小鼠，AST、ALP、A/G、BUN、CREA、TG顯著低于B6CF1小鼠(P<0.05)，其余無顯著性差異(P>0.05)。

2.2 主要臟器質量及臟器系數(shù)

從表2可知，雌性CB6F1小鼠體質量、心臟、肝臟、肺臟、左腎、右腎、膀胱顯著小于雄性(P<0.05)。雌性B6CF1小鼠體質量、左腎、右腎顯著小于雄性，脾臟、胃顯著大于雄性(P<0.05)，其余無顯著性差異(P>0.05)。

同性別不同品系臟器相比，雌性B6CF1小鼠脾臟、肺臟、右腎顯著小于CB6F1小鼠，卵巢顯著大于CB6F1小鼠(P<0.05)，其余臟器沒有顯著性差異(P>0.05)。雄性B6CF1小鼠體質量、心臟、肝臟、脾臟、肺臟、胃、左腎、右腎、睪丸均顯著小于CB6F1小鼠(P<0.05)，其余臟器沒有顯著性差異(P>0.05)。

從表3可知，雌性CB6F1小鼠心臟、脾臟、肺臟、胃、腎上腺臟器系數(shù)顯著大于雄性，左腎、右腎、膀胱顯著小于雄性(P<0.05)。雌性B6CF1小鼠肝臟、脾臟、肺臟、胃、腎上腺臟器系數(shù)顯著大于雄性，右腎顯著小于雄性(P<0.05)，其余無顯著性差異(P>0.05)。

同性別不同品系臟器系數(shù)相比，雌性B6CF1小鼠脾臟、肺臟、右腎顯著小于CB6F1小鼠，卵巢顯著大于CB6F1小鼠(P<0.05)，其余沒有顯著性差異(P>0.05)。雄性B6CF1小鼠肝臟、脾臟、肺臟、左腎、右腎均顯著小于CB6F1小鼠、睪丸顯著大于CB6F1小鼠(P<0.05)，其余沒有顯著性差異(P>0.05)。

表2 9～10周齡CB6F1小鼠與B6CF1小鼠主要臟器質量Table 2 The main organ weight of CB6F1 mice andB6CF1 mice in 9th to 10th week

注：同品系雄性與雌性比較*P<0.05，B6CF1與CB6 F1同性別比較△P<0.05

Note: Female compared with male in same strain*P<0.05，CB6F1 compared with B6CF1 in same gender△P<0.05

表3 9～10 周齡CB6F1小鼠與B6CF1小鼠主要臟器系數(shù)Table 3 The main organ coefficient of CB6F1 mice andB6CF1 mice in 9th to 10th week

注：同品系雄性與雌性比較*P<0.05，B6CF1與CB6F1同性別比較△P<0.05

Note: Female compared with male in same strain*P<0.05，CB6F1 compared with B6CF1 in same gender△P<0.05

3 討論

目前，CB6F1與B6CF1小鼠作為常用F1品系，有關其血生化、主要臟器質量、臟器系數(shù)等生物特性數(shù)據(jù)指標未見報道。而這些指標是實驗動物重要的生物特性，是實驗所需的基礎數(shù)據(jù)及科學研究與應用的重要依據(jù)[10-11]，其中血液生理生化指標與代謝、營養(yǎng)及健康狀況有著密切的聯(lián)系，能反映動物機體生理機能，健康狀況[12]。內臟器官質量和臟器系數(shù)是鑒定動物遺傳品質的重要依據(jù)，在生物醫(yī)學研究中，還可用來衡量和反映動物的功能狀態(tài)[13]。因此，本實驗對不同性別的CB6F1和B6CF1的血生化、主要臟器系數(shù)指標進行測定及比較分析，為生物醫(yī)學研究提供基礎數(shù)據(jù)。

從14項血生化指標的檢測結果看，同品系雌雄之間多數(shù)指標有顯著性差異，CB6F1小鼠有11項，B6CF1小鼠有9項。雌雄之間差異較大，這與CB6F1小鼠與B6CF1都是由兩個品系雜交獲得，品系雌性和雄性遺傳背景來源于2個品系，雌雄獲得2個品系的遺傳幾率有所差異有關。CB6F1小鼠和B6CF1小鼠同性別比較有顯著性差異的指標，雌性有10項；雄性有11項，與2個品系遺傳背景、生理狀況有關。以上結果說明，同樣2個近交品系，選取不同父本和母本雜交，其產(chǎn)生的F1小鼠血生化指標品系間存在較大差異，而且雌雄之間也存在差異。

臟器質量方面，同品系雌雄之間比較，CB6F1小鼠9項指標中有7項有顯著性差異；B6CF1小鼠有5項。2個F1代品系比較，雌性11項指標中的4項，雄性9項有顯著性差異；雄性差異指標多于雌性。臟器系數(shù)方面比較，同品系雌雄之間比較，CB6F1小鼠9項指標中有7項有顯著性差異；B6CF1小鼠有6項。2個F1代品系比較，雄性11項指標中有4項有顯著性差異；雌性有5項。在體質量方面，性別、品系也有顯著的不同。結果說明，以不同品系作為父母代進行雜交，其產(chǎn)生的子代CB6F1和B6CF1小鼠臟器質量和臟器系數(shù)指標存在一定差異，而且雌雄之間也存在差異。F1代小鼠血生化指標和主要臟器質量和臟器系數(shù)的部分差異，驗證了F1代動物因母體環(huán)境不同或性染色體不同而出現(xiàn)的差異[1]。

本實驗測定CB6F1與B6CF1小鼠的血生化、主要臟器質量和臟器系數(shù)，并進行了統(tǒng)計分析。說明了品系、性別對CB6F1與B6CF1小鼠血生化、臟器質量、臟器系數(shù)有一定的影響。今將實驗實測數(shù)據(jù)及差異比較結果提供給廣大科技工作者參閱、參考。但動物血液生理生化值、臟器質量、臟器系數(shù)除受性別、品系的影響，還受年齡、營養(yǎng)、環(huán)境、生理狀況等影響[14]，這些影響因素有待進一步研究。