李思思 朱曉彤 黎育穎 尹 杰 方 俊 李鐵軍,4*
(1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,長沙 410128;2.中國科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)所,亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)過程重點實驗室,湖南省畜禽健康養(yǎng)殖工程技術(shù)研究中心,農(nóng)業(yè)部中南動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)觀測實驗站,長沙 410125;3.廣西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,桂林 541004;4.湖南畜禽安全生產(chǎn)協(xié)同創(chuàng)新中心,長沙 410128)
在日益發(fā)展的動物生產(chǎn)中,飼糧中粗蛋白質(zhì)(CP)水平是解決飼養(yǎng)高成本和氮高排放量的關(guān)鍵。有研究表明,添加適當(dāng)?shù)暮铣杀匦璋被?,降低飼糧中CP水平不會影響動物生長性能,并能減少氮排放[1]。同時,隨著飼料業(yè)對谷物原料需求的增大,玉米作為最普遍的能量飼料原料來源,其供應(yīng)日益緊缺,價格也隨之增長,開發(fā)性價比高的能量飼料原料替代品變得非常重要。高粱作為五谷之一,是非常好的能量飼料原料來源。因此,降低飼糧中CP水平和用高粱作為動物飼料原料已引起人們的關(guān)注。有研究表明,畜禽以高粱為能量飼料原料的飼糧飼用價值和玉米相近,并且高粱中營養(yǎng)總量較高,有利于畜禽育肥[2],但不同高粱水平對生長豬會產(chǎn)生不同的影響。故本試驗以生長豬為研究對象,降低飼糧中CP水平,用高粱代替不同水平的玉米和豆粕,探討其對生長豬生長性能、肉品質(zhì)和血清氨基酸濃度的影響,為低CP水平飼糧中添加高粱在生長豬上的應(yīng)用提供依據(jù)。
按照單因子設(shè)計,選取36頭初始體重(30±7) kg的健康二元雜交(杜洛克×長白)生長豬,隨機(jī)分為6個組,每組6個重復(fù),每個重復(fù)1只豬。各組飼喂高粱和CP水平分別為0和18%(A組)、0和15%(B組)、20%和15%(C組)、50%和15%(D組)、80%和15%(E組)、50%和18%(F組)的試驗飼糧。試驗設(shè)計見表1。
表1 試驗設(shè)計Table 1 Experimental design %
飼糧參照NRC(2012)生長豬營養(yǎng)需要配制,試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平見表2。飼養(yǎng)試驗于湖南新五豐股份有限公司永安分公司的中國科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所動物試驗基地進(jìn)行。預(yù)試期6 d,正試期35 d。
表2 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 2 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) %
1)預(yù)混料為每千克飼糧提供 The premix provided the following per kg of diets:Cu 150 mg,F(xiàn)e 170 mg,Co 1.9 mg,Mn 80 mg,Zn 77 mg,I 0.3 mg,Se 0.12 mg,VA 24 375 IU,VD37 500 IU,VE 60 mg,VK37.5 mg,VB17.5 mg,VB218.75 μg,VB69 mg,VB1275 mg,煙酸 nicotinic 75 mg,D-泛酸D-pantothenic acid 37.5 mg,葉酸 3.75 mg,D-生物素D-biotin 450 μg。
2)營養(yǎng)水平均為計算值。Nutrient levels were all calculated values.
試驗前,將豬舍進(jìn)行徹底消毒。試驗開始后,對試驗豬空腹稱重、編號和分組,單欄飼養(yǎng)。試驗豬日飼喂4次(08:00、10:00、14:00和18:00),添料量以料槽內(nèi)有少量剩料為準(zhǔn)。整個試驗期間豬進(jìn)行自由采食、自由飲水,常規(guī)免疫、驅(qū)蟲、消毒。
1.3.1 生長性能
于試驗第1天開始時,早晨對每頭豬進(jìn)行空腹稱重,為初始體重;試驗結(jié)束后(第35天)再次稱重,記錄終末體重,并計算每組豬的平均日增重(ADG);記錄每頭豬每天的給料量和剩料量,計算每組豬的平均日采食量(ADFI)以及料重比(F/G)。計算公式如下:
平均日增重(kg/d)=(終末體重-初始體重)/試驗天數(shù);平均日采食量(kg/d)=總采食量/試驗天數(shù);料重比=平均日采食量/平均日增重。
1.3.2 肉品質(zhì)指標(biāo)測定
對試驗豬注射麻藥(舒泰TM50)進(jìn)行屠宰。背最長肌肉色[亮度(L*)、紅度(a*)、黃度(b*)值]、pH(pH45 min、pH24 h)、剪切力測定參照《豬肌肉品質(zhì)測定技術(shù)規(guī)范》(NY/T 821—2004)進(jìn)行。
1.3.3 血樣的采集與指標(biāo)測定
對試驗豬進(jìn)行前腔靜脈、腸系膜靜脈和門靜脈采血,每頭豬每種血樣采集10 mL,4 000 r/min離心10 min,將分離出的血清編號,放置冰盒,帶回實驗室-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>
吸取0.5 mL樣品于1.5 mL離心管中,3 000 r/min離心5 min,準(zhǔn)確吸取上清液于另一1.5 mL離心管中,加入等體積的10%磺基水楊酸,振蕩混勻,4 ℃靜置1 h;10 000 r/min離心15 min;取上清液,過0.22 μm膜后調(diào)整至合適濃度,用L-8900型高效氨基酸自動分析儀(日立公司,日本)測定。
試驗數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2007初步整理后,用統(tǒng)計軟件SPSS 19.0中的ANOVA程序作方差分析,對方差進(jìn)行Duncan氏法多重比較,數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean±SE)表示。P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著。
從表3可以看出,18%CP(A組)和15%CP(B組)之間相比較,以及50%高粱水平條件下的18%CP(F組)和15%CP(D組)之間相比較,生長豬飼糧CP水平降低3%,平均日采食量、平均日增重和料重比沒有顯著差異(P>0.05)。
在飼糧CP水平為18%的條件下(A和F組),與A組相比,50%高粱水平的F組生長豬平均日采食量提高了28.90%,差異極顯著(P<0.01);平均日增重提升了15.07%,差異顯著(P<0.05);但料重比差異不顯著(P>0.05)。
在飼糧CP水平為15%的條件下(B、C、D和E組),與B組相比,20%高粱水平的C組生長豬平均日采食量降低了6.31%,差異不顯著(P>0.05);而50%和80%高粱水平的D和E組平均日采食量分別提高了11.05%和20.00%,差異極顯著(P<0.01)。與B組相比,20%和50%高粱水平的C和D組生長豬平均日增重分別提高了2.67%和8.00%,但差異不顯著(P>0.05);而80%高粱水平的E組平均日增重提高了18.67%,差異顯著(P<0.05)。盡管料重比在4組之間沒有顯著性差異(P>0.05),但與B組相比,C、D和E組生長豬料重比分別增加了2.82%、2.01%和2.01%。
不同水平高粱組(C、D和E組)之間,生長豬平均日采食量和平均日增重隨高粱水平升高而增大,飼糧80%高粱水平對平均日采食量、平均日增重和料重比的影響反而要優(yōu)于20%和50%高粱水平。
從表4可以看出,18%CP(A組)和15%CP(B組)之間相比較,以及50%高粱水平條件下的18%CP(F組)和15%CP(D組)之間相比較,生長豬飼糧CP水平降低3%,生長豬肌肉pH45 min、pH24 h、肉色(L*、a*、b*值)、剪切力差異不顯著(P>0.05)。
在飼糧CP水平為18%的條件下(A、F組),與A組相比,50%高粱水平的F組生長豬肌肉pH45 min、pH24 h、肉色(L*、a*、b*值)、剪切力差異不顯著(P>0.05)。
在飼糧CP水平為15%的條件下(B、C、D和E組),B、C、D和E組之間生長豬肌肉pH45 min、pH24 h、肉色(L*、a*、b*值)、剪切力差異不顯著(P>0.05);但與B組相比,20%高粱水平的C組肌肉剪切力增加了4.76%,而80%高粱水平的E組肌肉剪切力降低了14.57%。
不同水平高粱組(C、D和E組)之間,隨著飼糧高粱水平的增加,生長豬肌肉剪切力有下降的趨勢。
表3 不同高粱水平低CP飼糧對生長豬生長性能的影響Table 3 Effects of low CP diets with different sorghum levels on growth performance of growing pigs (n=6)
同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05),不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01),相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。
In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.
表4 不同高粱水平低CP飼糧對生長豬肉品質(zhì)的影響Table 4 Effects of low CP diets with different sorghum levels on meat quality of growing pigs (n=6)
2.3.1 不同高粱水平低CP飼糧對前腔靜脈血清氨基酸濃度的影響
從表5可以看出,在飼糧CP水平為18%的條件下(A和F組),與A組相比,50%高粱水平的F組前腔靜脈血清氨基酸濃度沒有顯著差異(P>0.05)。
18%CP(A組)和15%CP(B組)之間相比較,生長豬飼糧CP水平降低3%,前腔靜脈血清氨基酸濃度沒有顯著差異(P>0.05);而50%高粱條件下的18%CP(F組)和15%CP(D組)相比較,生長豬飼糧CP水平降低3%,必需氨基酸組氨酸(His)濃度降低了40.55%,差異極顯著(P<0.01);非必需氨基酸脯氨酸(Pro)、絲氨酸(Ser)、丙氨酸(Ala)和天冬氨酸(Asp)濃度分別升高了17.69%、35.10%、33.87%和30.00%,差異顯著(P<0.05)。
在飼糧CP水平為15%的條件下(B、C、D和E組),與B組相比,20%、50%和80%高粱水平的C、D、E組必需氨基酸His濃度分別降低了19.01%、28.93%和43.72%,差異極顯著(P<0.01),賴氨酸(Lys)濃度分別升高了18.72%(P>0.05)、30.59%(P<0.05)和38.96%(P<0.05);非必需氨基酸Ser濃度分別升高了16.77%(P>0.05)、52.70%(P<0.05)和31.39%(P<0.05),Pro濃度分別升高了10.55(P>0.05)、19.69%(P<0.05)和26.53%(P<0.05),甘氨酸(Gly)濃度分別升高了10.68%(P>0.05)、11.64%(P>0.05)和51.90%(P<0.05),Ala濃度分別升高了7.79%(P>0.05)、25.53%(P>0.05)和27.19%(P>0.05),而Asp濃度分別降低了38.33%(P<0.05)、3.70%(P>0.05)和2.69%(P>0.05)。
不同水平高粱組(C、D和E組)之間,隨著高粱水平的增加,必需氨基酸His濃度隨之降低,而Lys濃度隨之升高;非必需氨基酸Pro、Gly、Ala和Asp濃度隨之升高,Ser濃度在50%高粱水平的條件下最高。
表5 不同高粱水平低CP飼糧對生長豬前腔靜脈血清氨基酸濃度的影響Table 5 Effects of low CP diets with different sorghum levels on anterior vena cava serum amino acid concentrations of growing pigs (n=6)
2.3.2 不同高粱水平低CP飼糧對腸系膜靜脈血清氨基酸濃度的影響
從表6可以看出,在飼糧CP水平為18%的條件下(A和F組),與A組相比,50%高粱水平的F組腸系膜靜脈血清氨基酸濃度差異不顯著(P>0.05)。
18%CP(A組)和15%CP(B組)之間相比較,腸系膜靜脈血清氨基酸濃度差異不顯著(P>0.05)。而50%高粱水平條件下的18%CP(F組)和15%CP(D組)之間相比較,生長豬飼糧CP水平降低3%,必需氨基酸His濃度降低了28.59%,差異極顯著(P<0.01);非必需氨基酸Pro、Ala和谷氨酸(Glu)濃度分別升高了22.91%、50.62%和55.87%,差異極顯著(P<0.01)。
在飼糧CP水平為15%的條件下(B、C、D和E組),與B組相比,20%、50%和80%高粱水平的C、D、E組必需氨基酸His濃度分別降低了19.05%(P>0.05)、33.00%(P<0.05)和53.28%(P<0.01);非必需氨基酸Pro濃度分別升高了10.51%(P>0.05)、17.45%(P<0.01)和12.61%(P<0.01),Ala濃度分別升高了20.64%(P>0.05)、46.60%(P<0.01)和23.15%(P<0.01)。
不同水平高粱組(C、D和E組)之間,隨著高粱水平的增加,必需氨基酸His濃度隨之降低。
表6 不同高粱水平低CP飼糧對生長豬腸系膜靜脈血清氨基酸濃度的影響Table 6 Effects of low CP diets with different sorghum levels on mesenteric vein serum amino acid concentrations of growing pigs (n=6)
2.3.3 不同高粱水平低CP飼糧對門靜脈血清氨基酸濃度的影響
從表7可以看出,在飼糧CP水平為18%的條件下(A和F組),與A組相比,50%高粱水平的F組門靜脈血清非必需氨基酸Pro和Ala濃度分別升高了19.35%和32.39%,差異極顯著(P<0.01)。
18%CP(A組)和15%CP(B組)之間相比較,門靜脈血清氨基酸濃度沒有顯著差異(P>0.05);而50%高粱條件下的18%CP(F組)和15%CP(D組)之間相比較,生長豬飼糧CP水平降低3%,必需氨基酸His濃度降低了38.49%,差異極顯著(P<0.01);非必需氨基酸Ala、Glu和Pro濃度升高了22.39%(P<0.01)、49.54%(P<0.05)和9.83%(P<0.01)。
在飼糧CP水平為15%的條件下(B、C、D和E組),與B組相比,20%、50%和80%高粱水平的C、D、E組必需氨基酸His濃度分別降低了21.40%(P>0.05)、30.20%(P>0.05)和49.10%(P<0.01);非必需氨基酸Pro濃度分別升高了7.63%(P>0.05)、29.71%(P<0.01)和32.94%(P<0.01),Ala濃度分別升高了7.76%(P>0.05)、30.96%(P<0.01)和36.45%(P<0.01),Glu濃度分別降低了7.09%(P>0.05)、23.86%(P>0.05)和43.07%(P<0.05)。
不同水平高粱組(C、D和E組)之間,隨著高粱水平的增加,必需氨基酸His濃度隨之降低;而非必需氨基酸Pro、Glu和Ala濃度隨之升高。
國內(nèi)外研究表明,低CP飼糧有利于動物和環(huán)境等,而飼糧CP水平下降2%~3%對豬的生長性能影響不大[3-7]。本研究結(jié)果表明,生長豬飼糧CP水平降低3%,對生長豬生長性能影響不顯著,和國內(nèi)外許多研究結(jié)果一致。被譽為“鐵桿莊稼”的高粱,比玉米、小麥等原料價格更經(jīng)濟(jì),并且它適應(yīng)更廣的生長環(huán)境條件,因此用高粱替代玉米等原料可降低飼料成本,提高產(chǎn)品經(jīng)濟(jì)效益[8]。高粱代替玉米應(yīng)用于家禽和豬的試糧,在美國已較為廣泛[9]。但是高粱中含有多種抗?fàn)I養(yǎng)因子,影響動物對氨基酸等的利用率,研究表明,高粱替代30%和全部比例的玉米均對生長豬的生長性能有不利影響[10]。但是Nyannor等[11]研究表明,以生長豬為研究對象,飼喂高粱飼糧,與玉米-豆粕型飼糧組相比較,豬對高粱中干物質(zhì)、能量、磷、鈣、氮的回腸和全腸道消化利用率沒有顯著差異,高粱可以替代生長豬飼糧中的玉米。在本研究中,飼糧高粱水平為50%、80%時,提高了平均日增重;飼糧高粱水平為20%、50%、80%時,均提高了平均日采食量,對料重比影響不顯著,并且隨著高粱水平增加,平均日采食量和平均日增重逐漸提高;這與Benz等[12]研究高粱-豆粕型飼糧的平均日增重比玉米-豆粕型飼糧高的結(jié)論一致。因此,低CP高粱飼糧對生長豬生長性能無不利影響,可作為生長豬常規(guī)飼糧使用。
表7 不同高粱水平低CP飼糧對生長豬門靜脈血清氨基酸濃度的影響Table 7 Effects of low CP diets with different sorghum levels on portal vein serum amino acid concentrations of growing pigs (n=6)
豬肉肉品質(zhì)評定重要指標(biāo)有pH、嫩度、肉色等。pH可以反映機(jī)體宰殺后肌糖原酵解速度;肉色用L*、a*、b*值表示,一般根據(jù)L*值越小、a*值越大、b*值越小,其肉色越好;而剪切力反映肉的嫩度。霍永久等[13]研究發(fā)現(xiàn),飼糧CP水平對豬肌肉pH、肉色等無顯著影響,本試驗也獲得了類似結(jié)果。不同高粱水平低CP飼糧對背最長肌pH45 min、pH24 h、L*值、a*值、b*值和剪切力的影響均不顯著。而所有組的pH在6.5~6.7,pH明顯偏高,可能是屠宰過程中機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)消耗過多肌糖。與B組相比,肌肉剪切力會隨高粱水平的不同而變化,20%高粱水平剪切力增大,50%高粱水平剪切力差異不大,而80%高粱水平剪切力反而減??;顯然,隨高粱水平增多,其剪切力減小,肌肉變嫩。
氨基酸是蛋白質(zhì)的基本單位,在動物體生長發(fā)育和機(jī)體代謝中起著至關(guān)重要的作用。早已有研究確定動物氨基酸需要量和血液中游離氨基酸濃度有關(guān)[14]。還有試驗表明,動物進(jìn)食后,血液中游離氨基酸迅速累積[15]。血清中氨基酸濃度是研究氨基酸平衡模式的重要依據(jù)。本試驗結(jié)果表明,不同高粱水平低CP飼糧對血清氨基酸濃度影響程度不同。前腔靜脈血清中Asp濃度降低,20%高粱水平其降低最明顯,但是Ser和Gly濃度隨高粱水平的增多而增高;腸系膜靜脈和門靜脈血清中His濃度隨高粱水平的增多而減少;但是門靜脈血清中Ala和Pro濃度隨高粱水平的增多而增高,腸系膜靜脈血清中Ala和Pro濃度均提高了,而都在50%高粱水平條件下其氨基酸濃度增加的最多,而Glu濃度的升高僅在50%和80%高粱水平條件下。研究表明,His可緩解機(jī)體氧化應(yīng)激損傷,并增強(qiáng)其抗氧化力[16]。Asp通過脂多糖影響豬日增重及腸道黏膜損傷[17-18]。但是從本研究結(jié)果看,血清中His和Asp濃度降低,并未對生長豬生長性能產(chǎn)生不利影響。Gly可影響動物免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng),從而降低傳染病的產(chǎn)生。Ser影響一碳代謝,還有D-Ser影響機(jī)體大腦中的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體[19]。Wu[20]發(fā)現(xiàn)Pro影響機(jī)體免疫,Pro對豬的生長發(fā)育起著重要的作用。Ala直接影響機(jī)體轉(zhuǎn)氨作用、器官間碳/氮的代謝和運輸。飼糧中90%的Glu在小腸內(nèi)被大量代謝,較少部分Glu進(jìn)入豬門靜脈,是小腸的主要供能物質(zhì)[21-23]。這幾種氨基酸的提升都有利于動物的生長發(fā)育。因此,從試驗結(jié)果可以得出,血清中游離氨基酸濃度降低,有可能提高了氨基酸利用率,其具體原因還需進(jìn)一步試驗研究。
① 不同高粱水平低CP飼糧對生長豬生長性能無不利影響,但50%高粱水平降低前腔靜脈、腸系膜靜脈和門靜脈血清中必需氨基酸His濃度,影響了前腔靜脈中非必需氨基酸Pro、Ser、Ala和Asp濃度,以及腸系膜靜脈和門靜脈血清中非必需氨基酸Pro、Ala和Glu濃度。
② 在飼糧CP水平為15%的條件下,20%、50%和80%高粱水平對生長豬生長性能未產(chǎn)生不利影響。因此,生長豬飼糧CP水平降低3%,且20%~80%高粱水平可以在養(yǎng)豬生產(chǎn)實踐中加以應(yīng)用。