有氧運(yùn)動與復(fù)合多糖干預(yù)對高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠腸道菌群的影響

沙繼斌 張靜 隋波 張成崗

1山東體育學(xué)院運(yùn)動與健康學(xué)院（濟(jì)南 250102）2軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所（北京 100850）3蘇州大學(xué)體育學(xué)院（蘇州 215021）

近些年來肥胖與腸道菌群之間的關(guān)系逐漸得到證實(shí)。有研究表明，腸道菌群可有效調(diào)控宿主的代謝尤其是脂代謝，腸道菌群的平衡/失衡與宿主肥胖表型改變直接相關(guān)[1-4]。Cani等認(rèn)為腸道菌群失衡所致內(nèi)毒素（lipopolysaccharide，LPS）分泌增多是導(dǎo)致肥胖發(fā)生的重要誘因[5，6]。趙立平等則認(rèn)為腸道菌群與肥胖之間的關(guān)系不僅密切相關(guān)，還可能存在因果關(guān)系[7-9]，腸道菌群尤其是特定菌種的改變可能是誘發(fā)動物及人體肥胖表型改變的直接誘因。Clarke等研究表明，運(yùn)動可以顯著提高腸道菌群的多樣性，降低運(yùn)動員體內(nèi)的炎癥反應(yīng)[10]。已知有氧運(yùn)動可有效促進(jìn)脂肪的消耗，由此提示有氧運(yùn)動同樣可能通過增加菌群多樣性，下調(diào)腸內(nèi)炎性因子水平等來實(shí)現(xiàn)減脂控體重。目前有氧運(yùn)動對肥胖個體腸道菌群影響的研究報道較少，其機(jī)制尚不清楚。

多種人體不能消化吸收的復(fù)合多糖在進(jìn)入大腸后，可有效促進(jìn)腸道內(nèi)益生菌增殖，產(chǎn)生具有顯著抗炎效應(yīng)的短鏈脂肪酸[11]。由此推測復(fù)合多糖可能通過增加有益菌數(shù)量、抑制有害菌數(shù)量來調(diào)節(jié)失衡的腸道菌群，進(jìn)而降低體內(nèi)炎癥反應(yīng)，從而實(shí)現(xiàn)減脂控體重。前期研究發(fā)現(xiàn)高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠體重、Lee's指數(shù)及脂肪系數(shù)均有明顯上升，有氧運(yùn)動、復(fù)合多糖灌胃及二者的聯(lián)合干預(yù)均可減重、減脂；高脂膳食誘導(dǎo)大鼠肥胖過程中同步伴有血脂代謝紊亂，炎癥反應(yīng)顯著加?。欢醒踹\(yùn)動、復(fù)合多糖灌胃及二者的聯(lián)合干預(yù)均可使血脂代謝改善，炎性因子水平顯著降低；提示上述不同干預(yù)措施均能通過有效抗炎及改善血脂代謝以改變動物身體成分[12]。本研究在上述已知動物表型改變的基礎(chǔ)上，同步分析上述干預(yù)措施對高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠腸道菌群的影響，為進(jìn)一步確證腸道菌群失衡可誘導(dǎo)肥胖發(fā)生的作用機(jī)理，尋求有效的減脂控體重措施提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 高脂膳食誘導(dǎo)肥胖動物模型建立及動物分組

健康雄性SD大鼠70只，體重117±15.4 g，購自軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心，動物許可證號：SCXK（軍）2007-004。隨機(jī)選取10只作為對照組，飼喂普通飼料；剩余60只飼以高脂飼料D12492，許可證號：SCXK（京）2014-0008，4周后參照劉利民、王從容等的研究結(jié)果[13，14]，選擇體重大于對照組平均體重20%的大鼠作為肥胖大鼠，造模成功率約為70%。

選取造模成功的40只大鼠，將其隨機(jī)分為肥胖對照組、有氧運(yùn)動組、復(fù)合多糖干預(yù)組、有氧運(yùn)動及復(fù)合多糖聯(lián)合干預(yù)組，每組10只。

1.2 實(shí)驗(yàn)動物干預(yù)方案

1.2.1 有氧運(yùn)動方案：依據(jù)陳文鶴等[15]研究結(jié)果選擇中等強(qiáng)度跑臺訓(xùn)練，跑臺坡度0，初始速度自10 m/min開始，依次按照2.5 m/min速度遞增，每級持續(xù)5 min，以此模式遞增至15 m/min并維持此運(yùn)動負(fù)荷，60 min/day，每周訓(xùn)練6天，共訓(xùn)練6周。每日定時按設(shè)定運(yùn)動負(fù)荷對大鼠進(jìn)行跑臺訓(xùn)練。

1.2.2 復(fù)合多糖灌胃方案：以0.9%生理鹽水將復(fù)合多糖（編號：ss0627）配制為濃度10%的溶液，以動物體重的0.5%作為灌胃劑量，于每日下午定時對大鼠進(jìn)行灌胃干預(yù)，共持續(xù)6周。其余各組代以等量生理鹽水。

1.3 腸道菌群樣本取材

用10%水合氯醛（10 ml/kg劑量）腹腔注射麻醉大鼠，于結(jié)腸末端留取糞便2顆，置于-80℃超低溫冰箱凍存，用于腸道菌群16S rDNA測序。

1.4 腸道菌群樣本DNADNA的提取及1616S rDNA rDNA測序

1.4.1 腸道菌群樣本DNADNA提取

使用糞便基因組DNA提取試劑盒（離心柱型DP328）進(jìn)行提取，使用紫外分光光度計(jì)測定所提取DNA的OD260/OD280比值，將質(zhì)量檢測合格的DNA置于-80℃冰箱凍存待測。

1.4.2 1616S rDNA rDNA的擴(kuò)增

對腸道菌群16S rDNA的V4區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，上游引物序列：5'-GTGCCAGCMGCCGCGGTAA-3'；下游引物序列：5'-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3'；PCR擴(kuò)增結(jié)束后，從每個樣品中吸取100 ng（體積約5～10 μl）的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，將每20個樣品作為一個批次進(jìn)行混樣，充分混勻后濃縮體積至30 μl，2%濃度的瓊脂糖凝膠電泳對PCR產(chǎn)物進(jìn)行純化。

1.4.3 建庫、上機(jī)測序及質(zhì)控

利用美國Illumina公司的TruSeq PE Cluster Kit v3-cBot-HS試劑盒完成建庫[16]。使用熒光分光光度計(jì)對文庫定量并通過Agilent高敏度核酸定量儀對PCR富集片段行質(zhì)量監(jiān)控并驗(yàn)證DNA文庫；在Illumina MiSeq高通量測序平臺上采用雙末端測序法上機(jī)測序。

使用QIIME軟件（V1.6.0，http：//qiime.org/index.html）對下機(jī)數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，包括：①數(shù)據(jù)拆分；②Tags拼接；③Tags截取；④Tags長度過濾；⑤Tags去嵌合體序列。最終得到高質(zhì)量的有效數(shù)據(jù)。所測得的每個OTUs的最長16S rDNA序列片段根據(jù)已有Greenbank數(shù)據(jù)庫進(jìn)行相似性比對（網(wǎng)址：http：//greengenes.lbl.gov/cgi-bin/nph-index.cgi）。

1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

1.5.1 生物信息學(xué)分析

1.5.1.1ReadsReads數(shù)篩選及質(zhì)控

對測序產(chǎn)生的序列采用FLASH軟件數(shù)據(jù)包行paired-end reads拼接，依據(jù)引物條形碼序列barcode定位于相應(yīng)樣本，對于測序質(zhì)量較低的數(shù)據(jù)予以去除[17]。采用QIIME軟件數(shù)據(jù)包行reads質(zhì)控來挑選符合要求的高質(zhì)量 reads，并去除低質(zhì)量reads[18，19]。

1.5.1.2OTUsOTUs分析

采用QIIME質(zhì)控器的操作命令將相似度大于97%的序列挑選出來并聚類為一個操作分類單位（operational taxonomic unit，OTU），同時生成OTUs矩陣[20]。

1.5.1.3物種注釋

采用Ribosomal Database Project（RDP）軟件數(shù)據(jù)包對OTUs的最長16S rDNA序列片行相似同源性比對和種屬分類學(xué)鑒定[21]，數(shù)據(jù)庫參照Greenbank（網(wǎng)址：http：//greengenes.lbl.gov/cgi-bin/nph-index.cgi）。統(tǒng)計(jì)各個樣品在細(xì)菌科（family）、屬（genus）、種（species）分類水平上的組成。

1.5.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，數(shù)據(jù)結(jié)果以x±s表示，菌群分類數(shù)據(jù)組間差異采用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行比較，顯著性水平設(shè)為P＜0.05。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 各組別動物菌科分類水平上的腸道菌群豐度分布改變結(jié)果

如圖1所示，與對照組相比，肥胖對照組大鼠腸道內(nèi)瘤胃球菌科（Ruminococcaceae）顯著增加（P＜0.05）；梭菌科（Clostridiaceae）、蘇黎世桿菌科（Turicibacteraceae）顯著降低（P＜0.05）。

干預(yù)后，與肥胖對照組相比，有氧運(yùn)動組大鼠腸道內(nèi)產(chǎn)堿桿菌科（Alcaligenaceae）、雙歧桿菌科（Bifidobacteriaceae）、丹毒絲菌科（Erysipelotrichaceae）、疣微菌科（Verrucomicrobiaceae）顯著增加（P＜0.05）；螺桿菌科（Helicobacteraceae）、瘤胃球菌科（Ruminococcaceae）顯著降低（P＜0.05）。與肥胖對照組相比，復(fù)合多糖干預(yù)組大鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌科（Bifidobacteriaceae）、梭菌科（Clostridiaceae）、丹毒絲菌科（Erysipelotrichaceae）、韋榮氏球菌科（Veillonellaceae）、蘇黎世桿菌科（Turicibacteraceae）顯著增加（P＜0.05）；脫硫弧菌科（Desulforibrionaceae）、螺桿菌科（Helicobacteraceae）、乳桿菌科（Lactobacillaceae）、瘤胃球菌科（Ruminococcaceae）顯著降低（P＜0.05）。與肥胖對照組相比，有氧運(yùn)動及復(fù)合多糖聯(lián)合干預(yù)組大鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌科（Bifidobacteriaceae）、梭菌科（Clostridiaceae）、丹毒絲菌科（Erysipelotrichaceae）顯著增加（P＜0.05）。

2.2 各組別動物菌屬分類水平上的腸道菌群豐度分布改變結(jié)果

如圖2所示，與對照組相比，肥胖對照組大鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌屬（Bifidobacterium）顯著下降（P＜0.05），蘇黎世桿菌屬（Turicibacter）數(shù)量顯著下降（P＜0.01）。

干預(yù)后，與肥胖對照組相比，有氧運(yùn)動組大鼠腸道內(nèi)阿克曼氏菌屬（Akkemansia）、別樣棒菌屬（Allobaculum）、雙歧桿菌屬（Bifidobacterium）、布勞特氏菌屬（Blautia）均顯著增加（P＜0.01）；羅斯拜瑞氏菌屬（Roseburia）、薩特氏菌屬（Sutterella）、蘇黎世桿菌屬（Turicibacter）數(shù)量也有顯著上升（P＜0.05），普雷沃氏菌（Prevetella）數(shù)量有增加，無顯著性差異。與肥胖對照組相比，復(fù)合多糖干預(yù)組大鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌屬（Bifidobac-terium）數(shù)量顯著增加（P＜0.01），別樣棒菌屬（Allobacul um）、蘇黎世桿菌屬（Turicibacter）數(shù)量也有顯著上升（P＜0.05）。與肥胖對照組相比，有氧運(yùn)動及復(fù)合多糖聯(lián)合干預(yù)組大鼠腸道內(nèi)別樣棒菌屬（Allobaculum）、布勞特氏菌屬（Blautia）、羅斯拜瑞氏菌屬（Roseburia）數(shù)量顯著增加（P＜0.01）。

圖1 不同組別有差異菌科的相對豐度變化比較

圖2 不同組別有差異菌屬的相對豐度變化比較

2.3 各組別動物菌種分類水平上的腸道菌群豐度分布改變結(jié)果

如圖3所示，與對照組相比，肥胖對照組大鼠腸道內(nèi)布氏瘤胃球菌（Ruminococcaceae bromii）顯著增加（P＜0.05）。

干預(yù)后，與肥胖對照組相比，有氧運(yùn)動組大鼠腸道內(nèi)嗜黏蛋白阿克曼氏菌（Akkermansia mucinphila）、糞便普雷沃氏菌（Prevetella copri）數(shù)量顯著增加（P＜0.01，P＜0.05）；布氏瘤胃球菌（Ruminococcaceae bromii）數(shù)量減少，無顯著性差異。與肥胖對照組相比，復(fù)合多糖干預(yù)組大鼠腸道內(nèi)布氏瘤胃球菌（Ruminococcaceae bromii）數(shù)量顯著減少（P＜0.05）。與肥胖對照組相比，有氧運(yùn)動及復(fù)合多糖聯(lián)合干預(yù)組大鼠腸道內(nèi)布氏瘤胃球菌（Ruminococcaceae bromii）數(shù)量減少，無顯著性差異。

3 討論

3.1 高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠腸道菌群組成的變化

圖3 不同組別有差異菌種的相對豐度變化分析結(jié)果

肥胖個體體內(nèi)存在腸道菌群數(shù)量比例及結(jié)構(gòu)失調(diào)的現(xiàn)象[22，23]。本研究同樣發(fā)現(xiàn)，高脂膳食可誘導(dǎo)大鼠腸道內(nèi)菌群組成與比例發(fā)生深刻改變。在菌科水平，高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠腸道內(nèi)瘤胃球菌科（Ruminococcaceae）比例顯著增加；在菌屬水平，高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠腸道內(nèi)雙歧桿菌屬（Bifidobacterium）與蘇黎世桿菌屬（Turicibacter）比例顯著降低，雙歧桿菌屬（Bifidobacterium）可通過增強(qiáng)定植抗力，調(diào)節(jié)宿主免疫應(yīng)答以預(yù)防感染性疾病。李蘭娟研究證實(shí)雙歧桿菌與腸球菌的比值（Bifidobacterium/Enterococcus Ratio，B/E）可簡明的反映腸道菌群健康程度[24]。蘇黎世桿菌（Turicibacter）是Bosshard等2002年在蘇黎世分離得到的新型桿菌[25，26]，其生物學(xué)功能目前尚不清楚，推測可能與調(diào)節(jié)機(jī)體脂代謝有關(guān)。在菌種水平，高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠腸道內(nèi)布氏瘤胃球菌（Ruminococcaceae bromii）數(shù)量顯著增加。瘤胃球菌（Ruminococcaceae）是已知與肥胖直接相關(guān)的菌群，肥胖個體腸道內(nèi)其比例會顯著上升[27-29]。

3.2 有氧運(yùn)動對高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠腸道菌群組成的影響

Matsumoto等通過比較自主轉(zhuǎn)輪運(yùn)動大鼠體內(nèi)腸道菌群的變化發(fā)現(xiàn)：對照組和運(yùn)動組大鼠的腸道菌群組成顯著不同，且運(yùn)動組大鼠腸道內(nèi)腸道菌群的代謝產(chǎn)物丁酸鹽的濃度顯著升高[30]，提示運(yùn)動引發(fā)了大鼠盲腸微生態(tài)環(huán)境的顯著變化。Choi等研究表明，運(yùn)動可以有效減輕服用多氯化聯(lián)苯所引起的腸道菌群變化[31]。Evans等的研究表明，運(yùn)動可改變實(shí)驗(yàn)鼠體內(nèi)的腸道菌群，其體內(nèi)擬桿菌門/硬壁菌門的比值與運(yùn)動量呈負(fù)相關(guān)[32]。

本研究中，與肥胖對照組相比，在菌科水平，6周有氧運(yùn)動可使高脂膳食誘導(dǎo)肥胖組大鼠腸道中雙歧桿菌科（Bifidobacteriaceae）顯著增加。雙歧桿菌（Bifidobacterium）是功能已確認(rèn)的益生菌[32]，可促進(jìn)短鏈脂肪酸（short chain fatty acid，SFCA）的生成，可增強(qiáng)腸道粘膜上皮細(xì)胞的免疫屏障功能。與之相對應(yīng)的是與肥胖呈正相關(guān)的瘤胃球菌（Ruminococcaceae）比例顯著降低，由此提示6周有氧運(yùn)動可以優(yōu)化調(diào)節(jié)肥胖大鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)及數(shù)量比例。

在菌屬水平，有氧運(yùn)動可使高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠腸道中阿克曼菌屬（Akkermansia）、別樣棒菌屬（Allobaculum）、布勞特氏菌屬（Blautia）、普雷沃氏菌屬（Prevetella）數(shù)量增多。別樣棒菌屬（Allobaculum）、布勞特氏菌屬（Blautia）可產(chǎn)生SCFA，而在補(bǔ)充高膳食纖維食物后，腸道中普雷沃氏菌（Prevetella）數(shù)量增加[33]。以上結(jié)果提示有氧運(yùn)動有助于提升動物腸道菌群健康程度。

在菌種水平，有氧運(yùn)動可使高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠腸道中嗜黏蛋白阿克曼氏菌（Akkermansia mucinphila）數(shù)量顯著增加。嗜黏蛋白阿克曼氏菌（Akkermansia mucinphila）是Derrien于2004年發(fā)現(xiàn)的可降解結(jié)腸內(nèi)表面黏液凝膠層中粘蛋白的革蘭氏陰性厭氧菌，在超過90%的成年個體腸道內(nèi)均有定植[34，35]。Maria對49名超重或肥胖個體的比較發(fā)現(xiàn)：腸道中嗜黏蛋白阿克曼氏菌（Akkermansia mucinphila）含量較高的個體代謝狀況更趨向于正常[36]。Clake等則發(fā)現(xiàn)優(yōu)秀橄欖球運(yùn)動員腸道內(nèi)嗜黏蛋白阿克曼氏菌（Akkermansia mucinphila）所占比例較高[10]。Liou等發(fā)現(xiàn)進(jìn)行胃旁路手術(shù)（gastric bypass）后的小鼠，其腸道內(nèi)阿克曼氏菌（Akkermansia）的相對豐度快速持續(xù)增加[37]。Lukovac等發(fā)現(xiàn)嗜黏蛋白阿克曼氏菌（Akkermansia mucinphila）可影響細(xì)胞脂代謝當(dāng)中不同轉(zhuǎn)錄因子及基因的表達(dá)，包括禁食誘導(dǎo)脂肪因子（fasting induced adipose factor，F(xiàn)iaf）、SFCA的受體Gpr43及過氧化物增殖激活因子受體γ（peroxisome proliferator-activated receptor gamma，PPARγ）等[38]。Reunanen等觀察到嗜黏蛋白阿克曼氏菌（Akkermansia mucinphila）可有效增強(qiáng)細(xì)胞屏障的整體結(jié)構(gòu)一體性，可使與之共培養(yǎng)的腸上皮細(xì)胞IL-8顯著增高100倍，提示其具有明顯的抗炎作用[39]。

同時，6周有氧運(yùn)動使能夠有效調(diào)節(jié)糖代謝的糞便普雷沃氏菌（Prevetella copori）數(shù)量顯著增加，提示其可能通過影響菌群而改善宿主機(jī)體代謝[33]。與之相對應(yīng)的是，6周有氧運(yùn)動使高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠腸道中布氏瘤胃球菌（Ruminococcaceae bromii）數(shù)量降低。

上述菌群結(jié)構(gòu)組成的改變與我們之前所觀察到的有氧運(yùn)動對肥胖大鼠身體成分、血脂成分、血清炎性因子的作用趨勢一致[12]，提示有氧運(yùn)動調(diào)節(jié)優(yōu)化大鼠腸道菌群與上述表型的改善之間存在密切內(nèi)在聯(lián)系。

3.3 復(fù)合多糖干預(yù)對高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠腸道菌群組成的影響

復(fù)合多糖可以刺激腸道內(nèi)有益菌的增殖、抑制有害菌的增殖，進(jìn)而通過調(diào)整腸道內(nèi)失衡的菌群達(dá)到控制體重的目的。de Silva等研究發(fā)現(xiàn)通過復(fù)合多糖干預(yù)后，實(shí)驗(yàn)動物腸道內(nèi)雙歧桿菌（Bifidobacterium）增加，同時體重下降[11]。Everard等通過給肥胖鼠喂食復(fù)合多糖，觀察到腸道內(nèi)硬壁菌門（Firmicutes）水平降低、擬桿菌門（Bacteroidetes）水平升高[40]。Parnell等研究發(fā)現(xiàn)，隨著復(fù)合多糖攝入的增多，肥胖動物體內(nèi)失衡的菌群結(jié)構(gòu)逐漸得到恢復(fù)[41]。提示復(fù)合多糖通過調(diào)理失衡的腸道菌群，可降低體內(nèi)的炎癥反應(yīng)，有效抑制肥胖的發(fā)生。

本研究結(jié)果顯示，與肥胖對照組相比，在菌科水平，6周復(fù)合多糖干預(yù)組雙歧桿菌科（Bifidobacteriaceae）數(shù)量顯著增加，蘇黎世桿菌科（Turicibacter）數(shù)量顯著上升。Fukuda等利用多組學(xué)技術(shù)分析了雙歧桿菌（Bifidobacterium）對腸出血性大腸埃希氏菌株大腸桿菌O157:H7（enterohaemorrhagic Escherichia coli O157:H7）所誘導(dǎo)的致死性感染小鼠模型的作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：長雙歧桿菌（Bifidobacterium longum subsp.Longum，JCM 1217T）可有效抑制上述致病菌的作用[42]。同時6周復(fù)合多糖干預(yù)可促使與肥胖呈正相關(guān)的瘤胃球菌（Ruminococcaceae）比例顯著降低，而與之同時產(chǎn)生內(nèi)毒素的脫硫弧菌科（Desulforibrionaceae）也顯著降低，與Cani等人的研究結(jié)果一致[43]。提示復(fù)合多糖干預(yù)對腸道菌群的優(yōu)化改善作用方式與有氧運(yùn)動的調(diào)節(jié)作用方式可能不同。

在菌屬水平，6周復(fù)合多糖干預(yù)同樣可促使雙歧桿菌屬（Bifidobacteriium）數(shù)量顯著增加。在菌種水平，6周復(fù)合多糖干預(yù)可使布氏瘤胃球菌（Ruminococcaceae bromii）數(shù)量顯著減少。

上述復(fù)合多糖干預(yù)對高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠腸道菌群主要組成的影響與我們之前所觀察到的復(fù)合多糖干預(yù)對肥胖大鼠身體成分、血脂成分、血清炎性因子的作用趨勢基本一致[12]，提示上述表型的改變與復(fù)合多糖調(diào)節(jié)的大鼠腸道菌群優(yōu)化改善之間存在密切內(nèi)在聯(lián)系。

3.4 有氧運(yùn)動及復(fù)合多糖聯(lián)合干預(yù)對高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠腸道菌群組成的影響

與肥胖對照組相比，有氧運(yùn)動及復(fù)合多糖聯(lián)合干預(yù)組并未能取得實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中預(yù)想的可能疊加或優(yōu)化作用，推測有氧運(yùn)動與復(fù)合多糖灌胃干預(yù)二者對動物腸道菌群的影響趨勢似乎并不一致。這與之前觀察到的其對肥胖大鼠身體成分、血脂成分、血清炎性因子調(diào)節(jié)作用最差的結(jié)果一致[12]。

在菌科水平，6周有氧運(yùn)動及復(fù)合多糖聯(lián)合干預(yù)同樣可使雙歧桿菌科（Bifidobacterium）數(shù)量增加，提示其仍具備一定的對腸道菌群結(jié)構(gòu)的正向促進(jìn)調(diào)節(jié)作用[22]；在菌種水平，6周有氧運(yùn)動及復(fù)合多糖聯(lián)合干預(yù)可使布氏瘤胃球菌（Ruminococcaceae bromii）數(shù)量減少。

4 小結(jié)

與對照組相比，高脂膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠腸道中促進(jìn)肥胖的布氏瘤胃球菌（Ruminococcaceae bromii）數(shù)量顯著增加，提示菌群組成改變可能是誘發(fā)肥胖的原因之一。

與肥胖對照組相比，有氧運(yùn)動干預(yù)使大鼠腸道中可有效調(diào)節(jié)宿主代謝的嗜黏蛋白阿克曼氏菌（Akkermansia mucinphila）、可調(diào)節(jié)宿主糖代謝的糞便普雷沃氏菌（Prevetella copri）數(shù)量顯著增加。提示有氧運(yùn)動干預(yù)可通過上調(diào)有利于機(jī)體代謝的腸道菌群組成以改善上述代謝表型。與肥胖對照組相比，復(fù)合多糖干預(yù)使大鼠腸道內(nèi)可產(chǎn)生短鏈脂肪酸鹽，有良好腸道保護(hù)作用的雙歧桿菌屬（Bifidobacterium）、別樣棒菌屬（Allobaculum）數(shù)量顯著增加；而可導(dǎo)致肥胖的布氏瘤胃球菌（Ruminococcaceae bromii）數(shù)量顯著減少。與肥胖對照組相比，有氧運(yùn)動及復(fù)合多糖聯(lián)合干預(yù)使大鼠腸道中可產(chǎn)生SCFA的別樣棒菌屬（Allobaculum）、布勞特氏菌屬（Blautia）數(shù)量顯著增加。

以上結(jié)果提示不同干預(yù)方式均可使大鼠腸道菌群組成發(fā)生相應(yīng)改變，而上述腸道菌群的改變可能是影響血清相關(guān)指標(biāo)及大鼠身體表型發(fā)生改變的原因。