茂名市2017年H7N9免疫抗體監(jiān)測(cè)與分析

（茂名市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，廣東茂名 525000）

H7N9亞型流感病毒（以下簡(jiǎn)稱：H7N9）是A型流感中的一種。在2017年1月，H7N9出現(xiàn)變異，其對(duì)家禽的致病性由低轉(zhuǎn)為高，人和家禽的健康都受到極大的威脅，因此，家禽的H7N9免疫勢(shì)在必行。2017年6月農(nóng)業(yè)部辦公廳發(fā)文《關(guān)于切實(shí)做好廣東廣西H7N9免疫工作的通知》，從2017年7月1日起，H7N9滅活疫苗進(jìn)入家禽免疫試點(diǎn)階段。茂名市在廣東試點(diǎn)范圍內(nèi)，為做好此次H7N9免疫試點(diǎn)工作，作者做了大量的疫苗推廣工作，同時(shí)也開展了H7N9免疫抗體的監(jiān)測(cè)，本文對(duì)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行了記錄和分析，為本地區(qū)的免疫程序調(diào)整提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

在廣東省茂名市各區(qū)（縣級(jí)市）隨機(jī)對(duì)免疫過重組禽流感病毒（H5+H7）二價(jià)滅活疫苗（H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株）的家禽進(jìn)行采樣，其中包括：雞場(chǎng)17家，采雞血清483份；鴨場(chǎng)5家，采鴨血清60份；鵝場(chǎng)3家，采鵝血清49份。

1.2 主要工具

96孔“V”形微孔反應(yīng)板、5-50ul單道移液器、5-50ul八道移液器。

1.3 主要試劑

禽流感病毒H7亞型血凝抑制試驗(yàn)抗原（哈獸研，批號(hào)2017010）、陰性血清、陽(yáng)性血清、PBS液、1%雞血紅細(xì)胞。

1.4 檢測(cè)方法

血凝（HA）及血凝抑制（HI）試驗(yàn)，參照《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T18936-2003）。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 雞H7N9免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

序號(hào) 監(jiān)測(cè)點(diǎn)名稱 用途 免疫次數(shù) 最后一次免疫劑量最后一次免疫日齡采樣日齡抗體滴度log2值分布情況樣品數(shù)（份）合格率/陽(yáng)性率（%）0～1 2～3 4～5 6～7 ≧8合格數(shù)/陽(yáng)性數(shù)（份）1 A區(qū)雞場(chǎng)1 肉雞 1 0.7ml 20 82 1 7 12 20 19 95.0 2 B區(qū)雞場(chǎng)1 種雞 1 0.5ml 14 39 5 1 49 6 61 55 90.2 3 B區(qū)雞場(chǎng)2 肉雞 1 0.5ml 36 73 8 5 29 28 70 57 81.4 4 C市雞場(chǎng)1 蛋雞 1 0.5ml 14 32 9 14 4 1 28 19 67.9 5 E市散養(yǎng)戶1 肉雞 1 0.5ml 35 101 1 4 5 5 100.0 6 E市散養(yǎng)戶2 肉雞 1 0.5ml 50 116 5 5 5 100.0 7 E市散養(yǎng)戶3 肉雞 1 0.5ml 81 147 1 2 2 5 5 100.0 8 E市雞場(chǎng)1 肉雞 1 0.7ml 35 107 6 12 2 20 20 100.0 9 E市雞場(chǎng)2 肉雞 1 1ml 35 91 1 2 16 19 19 100.0 10 A區(qū)雞場(chǎng)2 肉雞 2 0.7ml 45 77 1 19 20 20 100.0 11 C市雞場(chǎng)2 肉雞 2 1ml 42 78 79 79 79 100.0 12 D市雞場(chǎng)1 蛋雞 2 0.8ml 35 85 16 16 16 100.0 13 D市雞場(chǎng)2 蛋雞 2 0.8ml 35 85 60 60 60 100.0 14 D市雞場(chǎng)3 蛋雞 2 0.8ml 35 67 2 17 19 17 89.5 15 D市雞場(chǎng)4 蛋雞 2 0.8ml 35 63 20 20 20 100.0 16 D市雞場(chǎng)5 蛋雞 2 0.8ml 35 70 16 16 16 100.0 17 E市雞場(chǎng)3 蛋雞 2 0.7ml 35 50 4 8 8 20 20 100.0合計(jì) 25 6 56 113 283 483 452 93.6

2.2 鴨H7N9免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

序號(hào) 監(jiān)測(cè)點(diǎn)名稱 用途 免疫次數(shù) 免疫劑量 疫日齡 0～1 2～3 4～5 6～7 ≧8（份） （份） 性率（%）1 A區(qū)鴨場(chǎng)1 種鴨 1 0.5ml 14 30 12 3 5 10 30 18 60.0 2 A區(qū)鴨場(chǎng)2 肉鴨 1 1ml 14 48 1 8 1 10 9 90.0 3 A區(qū)鴨場(chǎng)3 肉鴨 1 0.7ml 13 50 2 3 5 3 60.0 4 A區(qū)鴨場(chǎng)4 肉鴨 1 0.7ml 14 48 2 3 5 3 60.0 5 C市鴨場(chǎng)1 肉鴨 1 0.5ml 15 45 6 1 3 10 4 40.0最后一次最后一次免 采樣日齡 抗體滴度log2值分布情況 樣品數(shù) 合格率/陽(yáng)合格數(shù)/陽(yáng)性數(shù)合計(jì) 22 1 4 16 17 60 37 61.7

2.3 鵝H7N9免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

序號(hào) 監(jiān)測(cè)點(diǎn)名稱 用途 免疫次數(shù)最后一次免疫劑量最后一次免疫日齡 采樣日齡 抗體滴度log2值分布情況 樣品數(shù)（份）合格率/陽(yáng)性率（%）0～1 2～3 4～5 6～7 ≧8合格數(shù)/陽(yáng)性數(shù)（份）1 A區(qū)鵝場(chǎng)1 肉鵝 1 0.5ml 20 62 30 30 0 0.0 2 E市鵝場(chǎng)1 肉鵝 1 0.5ml 14 28 15 15 0 0.0 3 E市鵝場(chǎng)2 種鵝 2 1.5ml 35 83 4 4 4 100.0合計(jì) 45 0 0 4 0 49 4 8.2

3 分析與總結(jié)

3.1 免疫效果判斷

禽流感抗體血凝抑制試驗(yàn)（HI）抗體效價(jià)≥4log2判定為合格。存欄禽群免疫抗體合格率≥70% 判定為合格。

3.1.1 雞免疫效果分析 在17個(gè)雞場(chǎng)抽檢483份雞血清，抗體合格452份，合格率為93.6%。只進(jìn)行一次免疫的雞場(chǎng)9個(gè)，共采樣233份，合格率87.6%，進(jìn)行了二次免疫的雞場(chǎng)8個(gè)，共采樣250份，合格率99.2%。數(shù)據(jù)顯示，所有雞場(chǎng)在免疫后都產(chǎn)生了抗體，除一個(gè)雞場(chǎng)合格率在70%以下外，其他16個(gè)雞場(chǎng)抗體合格率都超過了80%，免疫兩次明顯比免疫一次好，抗體效價(jià)相對(duì)更穩(wěn)定。合格率在70%以下的那個(gè)雞場(chǎng)采樣時(shí)間不正確，離免疫日期太近，沒超過21天。

3.1.2 鴨免疫效果分析 在5個(gè)鴨場(chǎng)抽檢60份鴨血清，抗體合格37份，合格率為61.7%。所抽檢鴨場(chǎng)都只進(jìn)行了一次免疫，數(shù)據(jù)顯示，所有鴨場(chǎng)在免疫后都產(chǎn)生了抗體，但只有一個(gè)鴨場(chǎng)抗體合格率在70%以上，其他4個(gè)鴨場(chǎng)抗體合格率都在60%或以下，說明鴨只免疫一次抗體效價(jià)很難合格。

3.1.3 鵝免疫效果分析 在3個(gè)鵝場(chǎng)抽檢49份鵝血清，抗體合格4份，合格率為8.2%。數(shù)據(jù)顯示，只有免疫了二次的鵝場(chǎng)產(chǎn)生了抗體，合格率達(dá)到了70%以上，但效價(jià)平均水平不是很高，只免疫了1次的2個(gè)鵝場(chǎng)都沒檢出抗體，也可能是受檢測(cè)中其他因素的影響，例如特異性可能受1%的雞紅細(xì)胞試劑影響。但總體來說，鵝只免疫一次抗體效價(jià)不好。

3.2 免疫情況總結(jié)

H7N9疫苗對(duì)雞的免疫效果良好，對(duì)水禽的免疫效果存在較大差異。本文數(shù)據(jù)屬大田試驗(yàn)數(shù)據(jù)受多種因素影響，例如采樣地域不相同，養(yǎng)殖環(huán)境不相同，免疫日齡不相同，采樣日齡不相同，所注射的疫苗廠家不相同（此文不做表述），但總體情況良好，茂名地區(qū)開展H7N9免疫后，2017年用苗3597.25萬(wàn)ml，沒有發(fā)生過H7N9疫情。

3.3 推薦免疫程序

數(shù)據(jù)顯示免疫劑量大效果偏好，免疫兩次比免疫一次好，因此推薦免疫程序?yàn)?，生長(zhǎng)期超過70d的家禽實(shí)行兩次免疫，首免14日齡二免35～42日齡。對(duì)人工飼養(yǎng)的雞、鵪鶉、鴿子、珍禽等，疫苗免疫接種方法及劑量按相關(guān)產(chǎn)品說明書規(guī)定操作，即首免接種0.3ml，二免接種0.5ml。對(duì)只免疫一次的肉雞，建議在20～35日齡接種0.7ml.對(duì)鴨鵝建議2～5周齡，每只接種 0.7ml；對(duì)5周齡以上的鴨，每只接種1ml；對(duì)5周齡以上的鵝，每只接種1.5ml。