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    液相色譜示差折光法測(cè)定無(wú)糖食品中8種糖和糖醇的含量

    2018-07-26 02:05:14曹寧陽(yáng)
    農(nóng)業(yè)科技與裝備 2018年3期
    關(guān)鍵詞:山梨糖糖醇木糖醇

    曹寧陽(yáng),岑 琴

    (1.沈陽(yáng)食品檢驗(yàn)所,沈陽(yáng) 110136;2.沈陽(yáng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院,沈陽(yáng) 110000)

    糖醇作為糖的重要衍生物之一,具有甜度低、熱值低的特點(diǎn),對(duì)人體血糖值上升無(wú)影響,因而被廣泛應(yīng)用于無(wú)糖食品中。按照國(guó)際慣例,無(wú)糖食品是指不含蔗糖和淀粉糖,而必須含有作為食糖替代品的糖醇(木糖醇、山梨糖醇、麥芽糖醇、甘露醇等)的一類(lèi)食品。GB13432-2004《預(yù)包裝特殊膳食用食品標(biāo)簽通則》中對(duì)無(wú)糖食品的規(guī)定是,包括所有的單糖和雙糖在內(nèi)在固體和液體食品中的總含糖量低于0.5 g/100 g(100mL)。為此建立利用高效液相示差折光方法,對(duì)無(wú)糖食品中多種糖和糖醇進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明,此方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確,可作為無(wú)糖食品中糖及糖醇的定量分析方法。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    木糖醇(99.8%)、山梨糖醇(99.5%)、甘露糖醇(99.5%)、果糖(99.5%)、蔗糖(99.5%)均產(chǎn)自德國(guó) Dr公司;赤蘚醇 (99.9%)產(chǎn)自安譜公司;阿拉伯醇(99.0%)和半乳糖醇(98.0%)產(chǎn)自 TRC 公司。

    乙腈為色譜純,水為去離子水,其它試劑均為分析純。

    供試樣品為超市購(gòu)買(mǎi)的無(wú)糖糕點(diǎn)、無(wú)糖麥麩粉、無(wú)糖餅干和無(wú)糖八寶粥。

    1.2 儀器與設(shè)備

    島津LC20A高效液相色譜儀,配有示差檢測(cè)器;HZF-A500電子天平(福州華志科學(xué)儀器有限公司);KQ-250DB超聲波發(fā)生器 (昆山市超聲儀器有限公司);H2050R離心機(jī) (長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司)。

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 HPLC 色 譜 條 件 色 譜 柱 :Thermo APS-2 HYPERSIL,250 mm×4.6 mm,5 μm; 柱溫:40 ℃;流速:1.2 mL/min;進(jìn)樣量:10 μL。流動(dòng)相:乙腈∶水=90∶10

    1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 分別準(zhǔn)確稱取糖及糖醇50 mg(精確至 0.1mg),置于 10 mL 容量瓶中,加入適量水溶解,定容,配置成 0.5 g/100mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

    1.3.3 樣品前處理 準(zhǔn)確稱取 2.5 g(精確到 0.001 g)試樣于50 mL具塞離心管中,分別用水和80%乙腈水作為提取液進(jìn)行提取。加提取液約10 mL,渦旋混勻,水浴超聲 15 min,于 4 000 r/min離心 5 min,將提取液轉(zhuǎn)移至25 mL容量瓶中;在殘?jiān)屑犹崛∫?0 mL重復(fù)提取一次,提取液轉(zhuǎn)移至同一容量瓶中,用提取液定容至刻度,混勻。取上清液經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾,用高效液相色譜儀進(jìn)行分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 分離條件優(yōu)化

    采用 Thermo APS-2 HYPERSIL (250 mm×4.6 mm,5 μm)色譜柱,以不同比例的乙腈水溶液流速作為流動(dòng)相洗脫,在柱溫40℃的條件下,采用不同流速優(yōu)化最佳分離條件。

    試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),以90%乙腈水溶液作洗脫液,流速1.2 mL/min,可使赤蘚醇、木糖醇、阿拉伯醇、果糖、山梨糖醇、甘露醇、半乳糖醇、蔗糖這8種組分保持良好的分離度和峰形,詳見(jiàn)圖1。

    圖1 8種糖和糖醇液相分析色譜圖Figure 1 Liquid chromatography of eight kinds of sugar and sugar glycol

    2.2 方法的回收率和精密度

    取同一空白樣品6份,采用不同的前處理方法,分別添加3個(gè)濃度水平的8種糖和糖醇混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,按優(yōu)化后的條件進(jìn)行測(cè)定。每個(gè)濃度平行測(cè)定6次,計(jì)算樣品組分的回收率和精密度,結(jié)果見(jiàn)表1和表2。

    表1 水提取液的回收率和精密度Table 1 Recovery and precision of water extraction solution /%

    表2 80%乙腈水提取液的回收率和精密度Table 2 The recovery and precision of 80%acetonitrile water extraction solution /%

    由表1和表2中的數(shù)據(jù)可見(jiàn),水的提取效率更高,且8種糖和糖醇的回收率在92.9%~102.6%之間,精密度在0.98%~6.47%之間,具有良好的回收率和精密度。

    2.3 陽(yáng)性樣品驗(yàn)證

    用優(yōu)化條件檢測(cè)市售的無(wú)糖食品,同時(shí)按照GB/T 5009.140-2008 和 GB 5009.97-2016 的方法對(duì)無(wú)糖食品中的甜味劑安賽蜜和甜蜜素進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果見(jiàn)表3。

    由表3可知:無(wú)糖食品中的木糖醇和山梨糖醇添加量較大,且有4種產(chǎn)品的含糖量超過(guò)了0.5%的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),有3種產(chǎn)品含有甜味劑安賽蜜。

    3 結(jié)論

    采用氨基柱分離,在柱溫40℃、90%乙腈水為流動(dòng)相、流速1.2 mL/min的條件下,用高效液相色譜儀和示差檢測(cè)器同時(shí)測(cè)定無(wú)糖食品中的赤蘚醇、木糖醇、阿拉伯醇、山梨糖醇、甘露醇、半乳糖醇、果糖、蔗糖。試驗(yàn)結(jié)果表明,該方法前處理簡(jiǎn)單、靈敏度高、回收率(>92.9%)和精密度(RSD<6.47%)良好;在 40 min內(nèi)完成8種糖和糖醇的分離,且結(jié)果比較理想。

    表3 無(wú)糖食品中8種糖和糖醇及2種甜味劑的檢測(cè)結(jié)果Table 3 Test results of 8 kinds of sugar,sugar alcohols and 2 kinds of sweeteners in sugar-free food

    從陽(yáng)性樣品可以看出,無(wú)糖食品并非真正的“無(wú)糖”,一些無(wú)糖食品添加了合成甜味劑或者超量的糖醇類(lèi)物質(zhì)。呼吁相關(guān)部門(mén)嚴(yán)格監(jiān)管無(wú)糖食品,確保無(wú)糖食品真正無(wú)糖。

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