血清EB病毒Rta-IgG抗體檢測(cè)在鼻咽癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值研究

曾澤勇 區(qū)葉明

鼻咽癌指發(fā)生于鼻咽黏膜上皮的惡性腫瘤, 常發(fā)生于鼻咽頂后壁的頂部, 其次為側(cè)壁, 發(fā)生于前壁及底壁者極為少見(jiàn), 發(fā)病人群大多為中年人, 亦有青少年患病者。該病是我國(guó)高發(fā)惡性腫瘤之一, 發(fā)病率為耳鼻咽喉惡性腫瘤之首, 其常見(jiàn)的臨床癥狀為鼻塞、涕中帶血、耳悶堵感、聽(tīng)力下降、復(fù)視及頭痛等［1-3］。鼻咽癌病變隱蔽, 易漏診、誤診, 不易早期診斷, 以上單個(gè)指標(biāo)的檢測(cè)對(duì)鼻咽癌血清學(xué)診斷的敏感度和準(zhǔn)確度均不甚理想, 因而國(guó)內(nèi)外都在尋找一種有效的血清學(xué)診斷方法。EB 病毒 (epstein-barr virus, EBV)屬于潛伏于機(jī)體細(xì)胞內(nèi)的一種γ皰疹病毒。目前許多研究均認(rèn)為EB病毒與鼻咽癌疾病的發(fā)生、發(fā)展存在密切的關(guān)系［4,5］。目前越來(lái)越多的EB病毒相關(guān)指標(biāo)被用作鼻咽癌的標(biāo)志物, 如病毒殼蛋白抗原-免疫球蛋白A(VCA-IgA)、EB病毒早期抗原免疫球蛋白A(EA-IgA)等對(duì)于本病的診斷具有重要意義［6-8］。近年來(lái)有研究報(bào)道［9,10］, 血清 EB 病毒 Rta-IgG 抗體檢測(cè)可用于鼻咽癌診斷中, 為進(jìn)一步檢驗(yàn)其精確性, 本研究以佛山市高明區(qū)中醫(yī)院收治的各期鼻咽癌患者作為觀察研究對(duì)象, 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取佛山市高明區(qū)中醫(yī)院2016年6月～2017年5月收治的82例鼻咽癌患者作為研究組, 所有患者均經(jīng)病理學(xué)檢查確診, 并排除嚴(yán)重疾病患者；另選同期80例健康體檢者作為對(duì)照組。對(duì)照組志愿者中男58例,女 22例。年齡 23～81歲 , 平均年齡 (54.85±10.26)歲；研究組患者中男 61 例 , 女 21 例 , 年齡 22～82 歲 , 平均年齡(54.79±10.18)歲, Ⅰ期18例、Ⅱ期22例、Ⅲ期20例、Ⅳ期22例兩組研究對(duì)象性別、年齡等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。本研究已獲得醫(yī)院倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn), 并且于試驗(yàn)前自愿簽訂知情同意書(shū)參與研究。

1.2 方法 所有研究對(duì)象均為清晨空腹化驗(yàn), 抽肘靜脈血5 ml, 血液樣本抽取完畢立刻送往進(jìn)行離心處理, 離心機(jī)中12000 r/min離心3 min得到血清。其血清Rta-IgG抗體水平檢測(cè)采用ELX800酶標(biāo)儀以酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)進(jìn)行,血清Rta-IgG檢測(cè)試劑盒購(gòu)于同昕生物技術(shù)(北京)有限公司, 所有操作及處理均嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)以及酶聯(lián)免疫吸附法指南進(jìn)行。在微孔條上預(yù)包被高純度基因重組Rta 蛋白, 與血清樣品中Rta 抗體結(jié)合, 再加入HRP 標(biāo)記的羊抗人IgG 與之結(jié)合, 加入TMB底物顯色, 終止液終止反應(yīng)。酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度并經(jīng)線性回歸方程計(jì)算得出EB病毒Rta-IgG抗體水平。且每份血樣均進(jìn)行3個(gè)平行試驗(yàn)并取平均值。

1.3 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)對(duì)照組志愿者、研究組以及研究組四個(gè)時(shí)期各組患者Rta-IgG抗體水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示, 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清Rta-IgG抗體水平比較 研究組患者血清Rta-IgG抗體含量為(73.28±8.26)U/ml, 顯著高于對(duì)照組的(1.38±0.82)U/ml, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05)。見(jiàn)表 1。

表1 兩組血清 Rta-IgG抗體水平比較 (, U/ml)

表1 兩組血清 Rta-IgG抗體水平比較 (, U/ml)

注：與對(duì)照組比較, aP＜0.05

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2.2 研究組不同時(shí)期血清Rt-IgG抗體水平比較 鼻咽癌患者血清EB病毒Rta-IgG抗體水平, Ⅰ期患者＜Ⅱ期患者＜Ⅲ期患者＜Ⅳ期患者, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表2。

表2 研究組不同時(shí)期血清Rta-IgG抗體水平比較 (, U/ml)

表2 研究組不同時(shí)期血清Rta-IgG抗體水平比較 (, U/ml)

注 ：與Ⅰ期比較 , aP＜0.05 ；與Ⅱ期比較 , bP＜0.05 ；與Ⅲ期比較 ,cP＜0.05

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3 討論

世界衛(wèi)生組織調(diào)查報(bào)道, 全球有80%的鼻咽癌患者在中國(guó), 其發(fā)病率以中國(guó)的南方較高, 發(fā)病年齡由20多歲開(kāi)始,逐漸上升, 45～60歲為最高峰, 男性高于女性。嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量, 威脅其生命安全［11-13］。近年來(lái)隨著癌癥診斷技術(shù)的飛速發(fā)展, Rta蛋白由EB病毒BRLF1基因編碼, 是一種EB病毒反式激活蛋白, 一般在EB病毒裂解早期就可表達(dá), 可促進(jìn)EB病毒其他產(chǎn)物的表達(dá), 這提示Rta蛋白可能具有用于鼻咽癌早期診斷的潛力［14,15］。近年來(lái)有研究也發(fā)現(xiàn)Rta-IgG抗體用于鼻咽癌診的準(zhǔn)確性較高, 特別是用于鼻咽癌篩查具有很高的特異性［16］。

本研究結(jié)果顯示, 鼻竇癌患者血清中EB病毒Rt-IgG抗體水平顯著高于健康志愿者, 且隨著病情加重, EB病毒Rta-IgG抗體水平逐漸增加, 這與蔡永林等研究報(bào)道相一致［17］。說(shuō)明EB病毒Rta-IgG抗體水平與鼻咽癌病情嚴(yán)重程度相關(guān)。

綜上所述, EB 病毒Rta-IgG 定量檢測(cè)對(duì)于鼻咽癌的診斷具有較高臨床價(jià)值, 為下一步進(jìn)行鼻咽癌臨床治療效果的監(jiān)測(cè)奠定了基礎(chǔ)。因此對(duì)于鼻咽癌高發(fā)地區(qū)、高發(fā)人群應(yīng)該加強(qiáng)EB 病毒Rta-IgG抗體的檢測(cè), 做到早診斷早治療。