遼寧地區(qū)豬繁殖與呼吸綜合征免疫抗體的檢測分析

梁 喬

（1.遼寧省動物疫病預防控制中心，遼寧 沈陽 110164；2.遼寧省動物醫(yī)學研究院，遼寧 沈陽 110164）

豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）是由尼多病毒目、動脈炎病毒科、動脈炎病毒屬的豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起豬的一種高度接觸性傳染病[1]，又稱藍耳病，通常性的預防主要是通過強制性或常規(guī)性的免疫接種。PRRSV是已知的能夠迅速變異的RNA病毒[2]，變異后能夠產生一系列的具有廣泛表型和基因型特征的菌株，并且，病毒感染機體后在宿主體內進行耐受性復制從而造成持續(xù)性感染狀態(tài)，具體要靠機體的免疫狀態(tài)和毒株的毒性強弱來判斷，一般急性病毒血癥階段持續(xù)幾個星期，慢性感染的淋巴組織可以持續(xù)幾個月[3]。加上能夠親嗜巨嗜細胞、具有較強的基因變異性、抗體依賴性增強作用[4-5]等這些生物學特征的存在，使疫苗接種的廣泛保護性免疫反應更是難以實現。通過本試驗能夠綜合評價免疫后抗體水平情況，以期對該病的防控提供基礎性依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣本采集隨機采集遼寧地區(qū)14個市外觀健康豬血清2 260份，經過了解采集血清樣本的養(yǎng)殖場全部免疫接種過PRRS疫苗。

1.1.2 主要儀器及試劑洗板機購自匯松科技發(fā)展有限公司，酶標儀購自美國伯樂有限公司，自動分液器購自Thermo Multidrop；豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測試劑盒，購自愛德士元亨生物科技。

1.2 方法采集的血液樣本靜置于室溫內，待血液凝固后（大約30 min）放置于離心機中3 000 r/min離心5 min，離心后用移液器吸取上清液放入1.5 mL離心管中，采用間接ELISA抗體檢測試劑盒對豬繁殖與呼吸綜合征的免疫抗體水平進行檢測，具體操作步驟按照說明書進行。

2 結果與分析

2.1 遼寧地區(qū)不同地區(qū)豬血清中PRRSV的免疫抗體陽性率地區(qū)不同，抗體陽性率不同，對遼寧地區(qū)不同地區(qū)的豬血清樣本進行PRRSV的抗體檢測，包括丹東、撫順、本溪等共14個市，結果為表1。結果表明，2016年1～12月間PRRSV抗體平均陽性率能夠達到95.13%，其中各個地區(qū)的PRRSV抗體平均陽性率均達到85%以上，陽性率最高的本溪市，陽性率為100%，陽性率最低的是營口市，陽性率為85.93%。

2.2 遼寧地區(qū)不同季度豬血清中PRRSV的免疫抗體陽性率季度不同，抗體陽性率不同，對遼寧地區(qū)不同季度的豬血清樣本進行PRRSV的抗體檢測，包括一季度（1月1日～3月31日）、二季度（4月1日～6月31日）、三季度（7月1日～9月31日）、四季度（10月1日～12月31日），統計結果為表2。結果表明，2016年遼寧地區(qū)四個季度的豬血清中PRRSV的免疫抗體陽性率均達到92%以上，其中第二季度和第四季度陽性率略高，第一季度和第三季度陽性率略低。

2.3 遼寧地區(qū)不同生長時期豬血清中PRRSV的免疫抗體陽性率生長時期不同，抗體陽性率不同，對遼寧地區(qū)不同生長時期豬血清樣本進行PRRSV的抗體檢測，其中包括哺乳仔豬（0～21 d）、斷奶仔豬（21～35 d）、育肥豬（35 d以上）、經產母豬、后備母豬及種公豬，統計結果為表3。結果表明，斷奶仔豬的抗體陽性率最高，為97.45%，哺乳仔豬最低，為89.65%。

表1 遼寧地區(qū)不同地區(qū)PRRSV的免疫抗體陽性率Table 1The positive rates of PRRSV antibody in different areas in Liaoning

表2 遼寧地區(qū)不同季度PRRSV的免疫抗體陽性率Table 2The positive rates of PRRSV antibodyin different quarters of a year in Liaoning

表3 遼寧地區(qū)不同生長時期PRRSV的免疫抗體陽性率Table 3The positive rates of PRRSV antibody in different age stages in Liaoning

2.4 遼寧地區(qū)不同養(yǎng)殖類型豬血清中PRRSV的免疫抗體陽性率養(yǎng)殖類型不同，抗體陽性率不同，對遼寧地區(qū)不同養(yǎng)殖類型豬血清樣品進行PRRSV的抗體檢測，包括種場、商品代場戶、散養(yǎng)戶，統計結果為表4。結果表明，三種養(yǎng)殖類型之間抗體陽性率無明顯差異，都在95%左右。

表4 遼寧地區(qū)不同養(yǎng)殖類型PRRSV的免疫抗體陽性率Table 4The positive rates of PRRSV antibody in different breeding types in Liaoning

2.5 遼寧地區(qū)不同品系豬血清中PRRSV的免疫抗體陽性率 品系不同，抗體陽性率不同，通過ELISA檢測方法對遼寧地區(qū)不同品系豬血清樣本進行PRRSV抗體檢測，包括長白、大白、杜洛克、二元、三元，統計結果為表5。結果表明，長白豬群血清PRRSV的免疫抗體陽性率最高，為97.60%，三元雜交豬群PRRSV的免疫抗體陽性率最低，為74.32%。

表5 遼寧地區(qū)不同品系PRRSV的免疫抗體陽性率Table 5The positive rates of PRRSV antibody in different strains of Liaoning

3 討論

對遼寧地區(qū)共14個市的豬血清樣本總計2 260份進行檢測，且已知均免疫過PRRSV疫苗，豬群中PRRSV免疫抗體平均陽性率為95.13%（2 150/2 260），由14個市豬群PRRSV免疫抗體陽性率可知，PRRSV抗體陽性率處于85.93%～100%之間，說明不同地區(qū)PRRSV的免疫抗體陽性率亦不同，總體來講各個地區(qū)免疫效果較理想，免疫抗體合格率均達到國家標準（≥70%）。由不同季度豬血清PRRSV的免疫抗體陽性率可見，冬季的抗體陽性率最高，為97.93%，2016年春季的抗體陽性率最低，為92.67%，總體來說夏季和冬季的抗體陽性率要高于春季和秋季，說明溫度適宜適合PRRSV的流行和傳播。

由不同生長時期PRRSV的免疫抗體陽性率可見，各個生長時期的豬血清抗體陽性率均在90%以上，哺乳仔豬相對其他時期的來說抗體陽性率較低，為89.65%，陽性率低的原因之一可能是哺乳仔豬接受疫苗免疫后產生的免疫抗體和抗原發(fā)生一定的中和效應，不能激發(fā)有效的集中免疫應答，因此對免疫效果產生一定影響。

由不同養(yǎng)殖類型PRRSV的免疫抗體陽性率可見，種場、商品代場戶、散養(yǎng)戶PRRSV免疫抗體陽性率分別為95.22%、95.56%、94.12%，三種養(yǎng)殖類型之間抗體陽性率無明顯差異，說明養(yǎng)殖類型對免疫抗體陽性率的高低幾乎無影響。

根據不同品系PRRSV的免疫抗體陽性率可見，長白、大白、杜洛克、二元、三元豬血清中免疫抗體陽性率分別為97.60%、97.07%、91.41%、95.64%、74.32%，三元的PRRSV免疫抗體陽性率明顯低于其他品系的豬群，可能是由于多個品種雜交后機體對PRRSV疫苗有一定的抵御作用。

市場上商品化的疫苗分為滅活苗和弱毒苗，由于滅火苗抗體產生較慢、帶毒時間較長并且容易促進和加強病毒的感染，因此，弱毒苗的使用更為普遍[6]。雖然現在能夠通過接種疫苗這種途徑來對病原菌的宿主、環(huán)境、相關因素等實行控制，但一些接種疫苗的動物仍然可能受到感染[7]，據認為，局限性的疫苗失效性可能歸因于病毒的遺傳和抗原多樣性。然而，有研究強調在使用PRRSV疫苗接種疫苗后，免疫反應的發(fā)展和保護之間存在高度的個體差異[8]，這說明需要更準確地預測疫苗的有效性。據報道，機體處于不同抗體水平時接種弱毒疫苗帶毒時間亦不同[9]，因此，定期做好血清學監(jiān)測，特別是疫苗免疫前根據機體的抗體水平選擇適宜的時間進行免疫能更好地阻斷免疫細胞內野毒的感染。