朱小慶 杜維維 王 慶 侯 凱 肖人峰 吳 衛(wèi)
(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院,四川 成都 611130)
紅花(CarthamustinctoriusL.)又名紅藍(lán)花,為菊科植物,其干燥管狀花入藥[1],具有活血通絡(luò)、祛瘀止痛之功效[2]。在中國(guó)紅花已有2 100多年的栽培歷史,主要分布于新疆、河南、四川、云南、江蘇、浙江、安徽等省。紅花含有多種化學(xué)成分,花中主要含有黃酮類(lèi)、木脂素類(lèi)和多炔類(lèi)等物質(zhì),其中黃色素、紅色素不僅可做藥用,還能做天然的食用色素,是理想的食品添加劑,還是高檔化妝品、紡織品的染色劑[3]。籽粒中油脂主要以棕櫚酸、硬脂酸、油酸和亞油酸為主,其中亞油酸含量可達(dá)80%以上[4]。
關(guān)于紅花芽苗菜的研究在培養(yǎng)溫度[5]、播種密度[6]、二氧化氯[7]和光質(zhì)[8]等方面國(guó)內(nèi)外已有報(bào)道。紅花種質(zhì)資源豐富,不同品種(系)籽粒中亞油酸、油酸含量也不一致[9],目前對(duì)紅花芽苗菜的研究往往僅針對(duì)單一品種(系)進(jìn)行,不同脂肪酸類(lèi)型的品種(系)紅花種子生產(chǎn)出的芽苗菜是否存在產(chǎn)量和品質(zhì)差異尚未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)擬以不同亞油酸含量的8個(gè)品種(系)紅花種子分別生產(chǎn)芽苗菜,分析各品種(系)芽苗菜的產(chǎn)量和品質(zhì),旨在探討紅花種子亞油酸含量與其芽苗菜質(zhì)量間關(guān)系,并篩選出適宜紅花芽苗菜生產(chǎn)的品種(系),為紅花芽苗菜的科學(xué)生產(chǎn)提供參考。
1.1.1 材料與試劑
8個(gè)紅花品種(系)種子為當(dāng)年新采收,均系本課題組多年選育所得,其中川紅1號(hào)最初由雅安三九藥業(yè)提供,其他最初均由美國(guó)種質(zhì)資源庫(kù)(Germplasm Resources Information Network,GRIN)提供;
水合茚三酮、抗壞血酸、亮氨酸、蒽酮、牛血清白蛋白、考馬斯亮藍(lán)G-250、水楊酸、福林酚、碳酸鈉、沒(méi)食子酸、蘆丁、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉:分析純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;
乙醇、冰醋酸、蔗糖、濃硫酸、甲醇、甲苯、二甲氧基丙烷:分析純,成都市科龍化工試劑廠。
1.1.2 主要儀器設(shè)備
光照培養(yǎng)箱:PGX多段可編程型,寧波東南儀器有限公司;
電子分析天平:CP224S型,德國(guó)賽多利斯公司;
電子恒溫水浴鍋:DZKWZ-4型,北京中興偉業(yè)儀器有限公司;
電熱鼓風(fēng)干燥箱:101-3AB型,天津市泰斯特儀器有限公司;
高速冷凍離心機(jī):Allerra X-30R Centifuge型,美國(guó)Beckam Contrifuge公司;
酶標(biāo)儀:Multiskkan GO型,美國(guó)Thermo Scientific公司;
紫外-可見(jiàn)光光度計(jì):UV2450型,日本Shimadzu公司;
氣質(zhì)聯(lián)用儀:Agilent 6890-5973N型,美國(guó)Agilent公司。
本試驗(yàn)在四川農(nóng)業(yè)大學(xué)特用植物生產(chǎn)學(xué)系多功能光照培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行,紅花種子流水沖洗過(guò)夜(16~18 h)后,播種在12 cm×12 cm×6 cm的種子發(fā)芽盒中,河沙做介質(zhì),每盒播種100粒種子,3次重復(fù),保持發(fā)芽床濕潤(rùn),黑暗下25 ℃培養(yǎng)5 d后取樣測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)。
1.3.1 生長(zhǎng)指標(biāo) 對(duì)角線選取15株紅花芽苗,用直尺測(cè)量下胚軸長(zhǎng)度,萬(wàn)分之一天平測(cè)定15株樣品可食鮮重,將鮮樣置于105 ℃殺青10 min,80 ℃烘干后至恒重得干質(zhì)量,并計(jì)算含水量。
(1)
式中:
c——含水量,%;
m1——初始鮮質(zhì)量,g;
m2——干質(zhì)量,g。
1.3.2 脂肪酸組成及相對(duì)含量 參照文獻(xiàn)[10]。
1.3.3 可溶性蛋白、游離氨基酸、可溶性糖和硝酸鹽含量
參照文獻(xiàn)[11],分別采用考馬斯亮藍(lán)G-250染色法、茚三酮溶液比色法、蒽酮比色法和水楊酸法。
1.3.4 總多酚含量 參照代沙等[12]方法,修改如下:精確移取提取上清液0.2 mL于5 mL離心管中,加入1.8 mL水,0.1 mL 福林酚試劑混勻,2 mL 7.5% Na2CO3溶液混勻后,25 ℃避光反應(yīng)1 h,以50%乙醇替代樣品液做空白,在735 nm 下測(cè)定吸光度。
1.3.5 總黃酮含量 參照Yuan等[13]方法,修改如下:精確移取1 mL提取液于5 mL離心管中,加入1.5 mL 50%乙醇,加入0.2 mL 5% NaNO2,搖勻,放置6 min,加10% Al(NO3)3試液0.2 mL,搖勻,放置6 min,加10%NaOH試液2 mL,搖勻,放置15 min。以50 %乙醇替代樣品液做空白,在510 nm下測(cè)定吸光度。
由表1可知,8個(gè)品種(系)種子百粒重存在極顯著差異(P<0.01),其中PI198294百粒重最大,PI470942最小。紅花種子中脂肪酸組成為棕櫚酸、亞油酸、油酸和硬脂酸,且8個(gè)品種(系)間各組分脂肪酸相對(duì)含量有一定差異。亞油酸含量以PI305192最高,與PI544040和PI401470間無(wú)顯著差異(P<0.05),顯著或極顯著高于其他品種(系),川紅1號(hào)和PI198294極顯著低于PI305192,但極顯著高于PI401479和PI470942。PI401479和PI470942中亞油酸含量最低,其油酸含量最高,極顯著高于其他品種(系)。
由表2可知,8個(gè)品種(系)紅花芽苗菜的下胚軸長(zhǎng)度、可食鮮重、可食干重存在極顯著差異(P<0.01),含水量間有顯著差異(P<0.05)。其中芽苗菜下胚軸長(zhǎng)度為7.07~8.24 cm,以PI305192最大,PI401479最小,二者間差異極顯著;可食鮮重為3.638~4.897 g,PI305192的可食鮮重最大,與PI544040間差異不顯著,顯著高于其他品種(系);可食干重以PI544040最大,PI401479最低,二者間差異極顯著;芽苗菜含水量以PI305192最高,與PI544021相比有顯著差異,同其他6個(gè)品種(系)間無(wú)顯著差異。
表3結(jié)果表明,不同品種(系)紅花芽苗菜各組分脂肪酸含量差異大。棕櫚酸含量為13.56%~32.19%,其中川紅1號(hào)和PI198294含量高,極顯著高于其他品種(系);亞油酸含量為25.31%~61.59%,以PI305192最高,極顯著高于其他品種(系);油酸含量變化較大,在14.89%~50.45% 之間,其中PI470942最高,極顯著高于其他品種(系);硬脂酸含量川紅1號(hào)和PI198294極顯著高于其他品種(系)。結(jié)合表1、3可知,紅花種子從發(fā)芽長(zhǎng)成芽苗,其飽和脂肪酸含量上升,不飽和脂肪酸含量降低,與胡筱波等[14]的研究結(jié)果基本吻合。
由表4可知,8個(gè)紅花品種(系)芽苗菜中可溶性蛋白含量以川紅1號(hào)最高,與PI305192和PI198294相比差異不顯著,最低的是PI401479,較川紅1號(hào)低55.5%,達(dá)極顯著差異;游離氨基酸含量以PI198294最高,顯著高于川紅1號(hào),極顯著高于其他6個(gè)品種(系);紅花芽苗菜可溶性糖含量為0.47%~0.89%,其中PI198294最高,與川紅1號(hào)無(wú)顯著差異,極顯著高于其他品種(系),較PI470942和PI544040分別高出84.8%和80.9%。楊玉霞等[15]研究得出不同品種(系)的紅花種子中蛋白質(zhì)和氨基酸含量不一致,本試驗(yàn)結(jié)果也表明,紅花不同亞油酸含量類(lèi)型品種(系)生產(chǎn)的芽苗菜營(yíng)養(yǎng)成分含量差異較大。紅花芽苗菜中硝酸鹽含量以PI305192最高,為0.97 mg/g(970 mg/kg),顯著或極顯著高于其他品種(系),超過(guò)了沈明珠等[16]建議的二級(jí)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(≤785 mg/kg)。
表1 8個(gè)品種(系)紅花種子百粒重和脂肪酸組成情況?Table 1 The 100 grain weight and fatty acid composition of seeds on 8 safflower varieties (lines)
? 同列不同小寫(xiě)字母表示不同處理間在P<0.05水平上差異顯著;不同大寫(xiě)字母表示不同處理間在P<0.01水平上差異極顯著。
表2 不同品種(系)紅花芽苗菜生長(zhǎng)指標(biāo)?Table 2 Growth index of the sprouts from differentsafflower varieties (lines)
? 同列不同小寫(xiě)字母表示不同處理間在P<0.05水平上差異顯著;不同大寫(xiě)字母表示不同處理間在P<0.01水平上差異極顯著。
表3 不同品種(系)紅花芽苗菜脂肪酸相對(duì)含量?Table 3 The relative contents of fatty acids of the sprouts from differentsafflower varieties (lines) %
? 同列不同小寫(xiě)字母表示不同處理間在P<0.05水平上差異顯著;不同大寫(xiě)字母表示不同處理間在P<0.01水平上差異極顯著。
表4 不同品種(系)紅花芽苗菜可溶性蛋白、游離氨基酸、可溶性糖和硝酸鹽含量?Table 4 The soluble protein, free amino acid, soluble sugar and nitrate contents of the sprouts from different safflower varieties (lines)
? 同列不同小寫(xiě)字母表示不同處理間在P<0.05水平上差異顯著;不同大寫(xiě)字母表示不同處理間在P<0.01水平上差異極顯著。
由圖1可知,8個(gè)品種(系)紅花芽苗菜的總多酚和總黃酮含量有差異。從圖1(a)可得出,總多酚含量最高的是川紅1號(hào),為108.59 mg/100 g,依次是PI544040、PI198294、PI305192、PI401470和PI401479,PI470942和PI544021含量最低,分別為85.75,79.71 mg/100 g,且顯著低于川紅1號(hào)和PI544040;從圖1(b)由可知,PI401479和川紅1號(hào)的總黃酮含量最高,極顯著高于PI544021和PI470942,顯著高于PI198294、PI305192和PI401470。相關(guān)研究[17]結(jié)果表明紅花種子總多酚含量高,且不同品種間有差異,為452.52~667.27 mg/100 g。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)紅花芽苗菜中也含有豐富的總多酚,在不同品種(系)中也存在差異。
由表5可知,紅花種子百粒重與種子棕櫚酸、亞油酸和硬脂酸相對(duì)含量及芽苗菜可溶性蛋白、游離氨基酸和總多酚含量呈極顯著正相關(guān),同芽苗菜硬脂酸相對(duì)含量和可溶性糖含量顯著正相關(guān),與芽苗菜下胚軸長(zhǎng)、可食鮮重、可食干重、含水量、棕櫚酸相對(duì)含量、亞油酸相對(duì)含量、硝酸鹽含量和總黃酮含量間無(wú)顯著相關(guān)性,與種子和芽苗菜的油酸相對(duì)含量存在極顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系。一般來(lái)說(shuō)種子相對(duì)大的幼苗生長(zhǎng)快,種子大小與苗高及鮮質(zhì)量呈顯著正相關(guān)[18]。另相關(guān)研究認(rèn)為大豆籽粒的百粒重越大,豆芽的產(chǎn)率越低[19],以及綠豆百粒重與綠豆芽生物產(chǎn)量呈顯著負(fù)相關(guān)[20]。本試驗(yàn)得出,紅花種子百粒重與芽苗菜下胚軸長(zhǎng)度、可食鮮重和可食干重?zé)o顯著相關(guān)性,這與前人研究結(jié)果不一致,可能與紅花種子其他的性質(zhì)有關(guān)。
不同小寫(xiě)字母表示不同處理間在P<0.05水平上差異顯著;不同大寫(xiě)字母表示不同處理間在P<0.01水平上差異極顯著
圖1 不同品種(系)紅花芽苗菜總多酚和總黃酮含量
Figure 1 The contents of total polyphenol and total flavonoid of the sprouts from different safflower varieties (lines)
種子棕櫚酸相對(duì)含量與種子亞油酸和硬脂酸相對(duì)含量及芽苗菜可溶性蛋白含量呈極顯著正相關(guān),與芽苗菜可食鮮重、可食干重和總多酚含量呈顯著正相關(guān),與種子和芽苗菜的油酸相對(duì)含量呈極顯著負(fù)相關(guān);種子亞油酸相對(duì)含量與芽苗菜可食鮮重、可食干重、亞油酸相對(duì)含量和可溶性蛋白含量呈極顯著正相關(guān),與芽苗菜下胚軸長(zhǎng)存在顯著正相關(guān)關(guān)系,與種子和芽苗菜的油酸相對(duì)含量呈極顯著負(fù)相關(guān);種子油酸相對(duì)含量與芽苗菜中油酸相對(duì)含量極顯著正相關(guān),與芽苗菜可食鮮重、可食干重、亞油酸相對(duì)含量和可溶性蛋白含量呈極顯著負(fù)相關(guān);種子硬脂酸相對(duì)含量與芽苗菜棕櫚酸和硬脂酸相對(duì)含量及芽苗菜可溶性蛋白、游離氨基酸和可溶性糖含量存在極顯著正相關(guān)關(guān)系,與芽苗菜油酸相對(duì)含量呈極顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系。
表5 種子脂肪酸組分相對(duì)含量與芽苗菜營(yíng)養(yǎng)成分相關(guān)性分析?Table 5 Correlation analysis of fatty acid relative content of the seed and nutrition of the sprouts
? *表示顯著相關(guān)(P<0.05),**表示極顯著相關(guān)(P<0.01)。
在供試的8個(gè)紅花品種(系)中,PI305192種子亞油酸含量最高,其芽苗菜的可食鮮質(zhì)量大,可溶性蛋白和亞油酸含量高,但其硝酸鹽含量最高,超出了沈明珠等[16]建議的二級(jí)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn),且其他品質(zhì)指標(biāo)的含量低,品質(zhì)欠佳。川紅1號(hào)和PI198294的芽苗菜中可溶性蛋白、游離氨基酸和可溶性糖含量高,顯著或極顯著高于其他品種(系),川紅1號(hào)芽苗菜中總多酚和總黃酮含量高,PI198294的總多酚含量高,總黃酮含量也不低,由此認(rèn)為川紅1號(hào)和PI198294是比較適合用于紅花芽苗菜生產(chǎn)的優(yōu)質(zhì)品種(系)。
對(duì)種子脂肪酸組分和芽苗菜的產(chǎn)量、品質(zhì)間相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),種子亞油酸相對(duì)含量與芽苗菜可食鮮、干質(zhì)量和可溶性蛋白含量極顯著正相關(guān),種子油酸相對(duì)含量與芽苗菜可食鮮、干質(zhì)量和可溶性蛋白含量極顯著負(fù)相關(guān)。據(jù)此可知亞油酸相對(duì)含量高的紅花品種(系)生產(chǎn)的芽苗菜產(chǎn)量及品質(zhì)較油酸相對(duì)含量高的更好。
本試驗(yàn)針對(duì)紅花芽苗菜展開(kāi)的研究,芽苗菜培養(yǎng)是在黑暗條件進(jìn)行的,但在光照條件下是否會(huì)有一致結(jié)果,還需要進(jìn)行探討。