• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    菊葉香藜psbA基因生物信息學分析*

    2018-07-14 03:06:14雷鳴任海龍
    西藏科技 2018年5期
    關(guān)鍵詞:預測出密碼子氨基酸

    雷鳴任海龍

    (1.西藏大學理學院;2.西藏大學醫(yī)學院,西藏 拉薩 850000)

    菊葉香藜是藜科刺藜屬植物[1],其具有刺激性氣味,具有抑菌、昆蟲活力抑制等作用[2,3],中藥用于治療哮喘、支氣管炎和偏頭痛[4],據(jù)藏藥志記載有抗腫瘤活性[5]。菊葉香藜也為中等飼用植物[6],通常情況下為亞優(yōu)勢種或伴生種[7]。研究發(fā)現(xiàn)在群落演替中重要值在明顯增加,同時也可作為固定沙地的指示植物[8]。許新勇等[9]研究發(fā)現(xiàn),在西藏“一江兩河”流域地區(qū),伴隨著植被發(fā)育和群落演替的進程,在半固定沙丘和固定沙丘,菊葉香藜逐漸成為優(yōu)勢種,說明菊葉香藜本身生理生態(tài)特征非常適應“一江兩河”流域氣候環(huán)境。2003年,朱格鱗等在Flora of China中,基于形態(tài)學特征將菊葉香藜等植物歸類到刺藜屬植物[1],并未對菊葉香藜的進行分子方面的鑒定。另外,psbA基因是葉綠體基因,序列相對保守,編碼產(chǎn)物D1蛋白,是PSⅡ反應中心2個核心蛋白之一,介導光合作用過程中的電子傳遞[10],在植物屬以上水平的分子系統(tǒng)發(fā)育的比較中具有顯著作用[11]。因此,在本研究中,通過菊葉香藜psbA序列生物信息學分析和系統(tǒng)發(fā)生樹構(gòu)建,為菊葉香藜的分類學提供分子依據(jù)。

    1 方法

    1.1 基于轉(zhuǎn)錄組測序?qū)杖~香藜psbA基因全序列的獲取

    通過轉(zhuǎn)錄組測序,將注釋到psbA基因的unigenes在NCBI進行比對,然后再進行拼接。

    1.2 菊葉香藜psbA基因編碼序列生物信息學分析

    通過NCBI在線分析軟件ORF Finder對核苷酸序列進行分析,預測出可能的氨基酸序列;通過蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)在線預測軟件PredictProtein,預測出氨基酸序列的二級結(jié)構(gòu)、相對親水表面、氨基酸組分和核苷酸組分;用CondonW和CUSP對菊葉香藜psba基因編碼序列進行密碼子偏好性分析,基于中性繪圖和ENC-plot探索影響psba基因密碼子偏好性的因素;psba基因編碼蛋白的理化性質(zhì)采用ExPasy-ProtParam分析軟件及BioEdit軟件預測;疏水性/親水性采用Ex-Pasy-ProtScale預測;跨膜區(qū)域通過軟件TMHMM進行分析;結(jié)構(gòu)功能域及功能分類采用ProtFun預測;通過Swiss-Model在線預測軟件預測出三級結(jié)構(gòu);通過BioEdit進行序列差異分析;用MEGA6.05計算菊葉香藜與其近緣物種的遺傳距離,并構(gòu)建系統(tǒng)進化樹。

    1.3 菊葉香藜psbA基因系統(tǒng)發(fā)生樹構(gòu)建

    從NCBI數(shù)據(jù)庫中下載其它物種psbA基因完整序列,共9個物種(表1)。

    表1 NCBI數(shù)據(jù)庫中下載9個物種psbA基因完整序列

    2 結(jié)果

    2.1 菊葉香藜psbA基因編碼序列生物信息學分析

    2.1.1 菊葉香藜psbA基因編碼蛋白理化性質(zhì)?;谵D(zhuǎn)錄組測序,將注釋到psbA基因的unigenes(c1846_g1、c19645_g1、c24547_g1)在NCBI數(shù)據(jù)庫中進行比對,然后拼接在一起,最終的序列長度為1059bp,GC含量為41%,序列已上傳到NCBI數(shù)據(jù)庫,序列號為:KY942083。

    通過NCBI在線分析軟件ORF Finder對核苷酸序列進行分析,預測出氨基酸序列,共353個氨基酸,如下所示:MTAILERRESESLWGRFCNWITSTENRLYIGWFGVL MIPTLLTATSVFIIAFIAAPPVDIDGIREPVSGSLLYGN NIISGAIIPTSAAIGLHFYPIWEAASVDEWLYNGGPYE LIVLHFLLGVACYMGREWELSFRLGMRPWIAVAYSA PVAAATAVFLIYPIGQGSFSDGMPLGISGTFNFMIVFQ AEHNILMHPFHMLGVAGVFGGSLFSAMHGSLVTSSLI RETTENESANEGYRFGQEEETYNIVAAHGYFGRLIFQ YASFNNSRSLHFFLAAWPVVGIWFTALGISTMAFNLN GFNFNQSVVDSQGRVINTWADIINRANLGMEVMHER NAHNFPLDLAAIEAPSING

    負電荷殘基總數(shù)為28,正電荷殘基總數(shù)為15,其理論分子量為38962.62Da,理論等電點為5.12,不穩(wěn)定指數(shù)是36.33。分子式為C1793H2682N456O493S14,原子總數(shù)為5438,脂肪系數(shù)為96.77。

    2.1.2 菊葉香藜psbA基因編碼蛋白氨基酸組分分析。氨基酸組分中最多的為A 35(9.9%),最少的為C 2(0.6%),其中,沒有氨基酸K;相對親水表面為71.67%在0-16%之間,28.33%在16%-100%之間。(如圖1所示)

    圖1 菊葉香藜psbA基因編碼蛋白氨基酸組分

    2.1.3 菊葉香藜psbA基因編碼蛋白二級結(jié)構(gòu)。通過蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)在線預測軟件PredictProtein,預測出氨基酸序列的二級結(jié)構(gòu)為α-螺旋57.51%,β-折疊4.82%,β-轉(zhuǎn)角37.68%.

    2.1.4 菊葉香藜psbA基因編碼蛋白親疏水性分析。用ProtParam分析軟件對菊葉香藜psbA基因編碼蛋白的疏水性/親水性進行預測,其疏水性平均系數(shù)為0.350。參照ExpASy的Protscale程序計算菊葉香藜psbA基因編碼蛋白的疏水性/親水性圖譜(圖2)分析氨基酸殘基的得分可知,多肽鏈的第51號的丙氨酸(Ala)具有最高分值3.189,疏水性最強。第234號天冬酰胺(Asn)具有最低分值-2.133,親水性最強。

    圖2 菊葉香藜psbA基因編碼蛋白親疏水性分析

    2.1.5 菊葉香藜psbA基因編碼蛋白跨膜區(qū)域。由圖3可知,菊葉香藜psbA基因編碼蛋白存在7個跨膜區(qū)域,分別位于29~51、71~93、105~127、142~164、171~193、197~219和273~295氨基酸之間,跨膜區(qū)分析結(jié)果與該蛋白的親/疏水性分析結(jié)果基本一致。

    圖3 菊葉香藜psbA基因編碼蛋白跨膜區(qū)域

    2.1.6 菊葉香藜psbA基因編碼蛋白結(jié)構(gòu)功能域及功能分類。通過Protfun分析軟件預測菊葉香藜psbA基因編碼蛋白結(jié)構(gòu)功能域及功能分類從分析結(jié)果可知(表2),菊葉香藜psbA基因編碼蛋白為非酶類(Prob=0.805,odds=1.128)和轉(zhuǎn)運相關(guān)蛋白(Prob=0.191,odds=1.749),該蛋白具有翻譯、脂肪酸代謝、輔酶因子的生物合成和能量代謝作用的可能性分別為4.760、4.477、3.423和2.195。因此,推測該蛋白的主要作用與轉(zhuǎn)運有關(guān)。

    表2 psbA基因編碼的蛋白質(zhì)的功能預測

    2.1.7 菊葉香藜psbA基因編碼蛋白三級結(jié)構(gòu)預測。通過Swiss-Model在線預測軟件預測出三級結(jié)構(gòu),選取Template>30%、GQME值接近1、|QMEAN|<4的模型,預測出的菊葉香藜psbA基因編碼蛋白三級結(jié)構(gòu)(圖4)。

    圖4 菊葉香藜psbA基因編碼蛋白三級結(jié)構(gòu)預測模型

    2.1.8 菊葉香藜psbA基因密碼子偏好性。通過CUSP和CondoW程序分析菊葉香藜及其近緣種psbA基因的密碼子偏好性基本指標。從表3中可以看出,各物種psbA基因在密碼子偏好性方面差異較小,其中CBI、GC含量、GC3和GC3s,莧科植物均大于藜科植物,而ENC值,莧科植物均小于藜科植物。GC1、GC2、GC3和GC含量均小于0.5,說明psbA基因密碼子各位點均偏好使用含A/T的密碼子,而GC3s均小于0.3,說明在同義密碼子中,psbA編碼序列更偏好使用以A/T結(jié)尾的密碼子,其中,NNT>NNA>NNC>NNG,NNT遠大于NNC。ENC值均位于35-50之間,說明psbA基因密碼子偏好性一般,基因表達水平一般。

    通過CUSP和CondoW程序分析菊葉香藜psbA基因的密碼子偏好性可知,菊葉香藜psbA基因總共使用了49個密碼子,23個密碼子為偏好性密碼子(RSCU>1),其中 GCU、GAU、GAA、GGU、AUU、CUA、UUA、CCU、CAA、CGU、AGU、UCU、ACU和GUA為高頻密碼子(RSCU>1.5),以GU和CU結(jié)尾的密碼子全部為高頻密碼子。在偏好性密碼子中,有18個密碼子以A/T結(jié)尾,這18個密碼子Fraction和使用頻率(Frequency)都相對較高(表4)。

    為探索影響psbA基因密碼子偏好性的因素,通過中性繪圖和ENC-plot繪圖進行分析。中性繪圖結(jié)果顯示(圖5所示),GC12與GC3相關(guān)性不顯著(R2=0.1,P=0.251),說明psbA基因密碼子第1、2位和第3位堿基相關(guān)性不顯著,psbA基因GC含量高度保守,密碼子偏好性主要受選擇作用影響。

    ENC繪圖結(jié)果顯示(圖6),所有物種的psbA基因均落在標準曲線下方相對較遠的位置,說明密碼子的偏好性只受到選擇作用的影響。進一步探究影響選擇作用的因素,本研究主要分析CAI值和蛋白長度對ENC值的影響,發(fā)現(xiàn)CAI值與ENC值表現(xiàn)為極顯著的負相關(guān)(R2=0.6817,P<0.01,回歸方程為:y=-37.053x+51.522),蛋白長度與ENC值表現(xiàn)為完全線性相關(guān)(x=353)。因此,選擇作用主要受到表達水平和蛋白質(zhì)長度的影響,psbA基因密碼子偏好性受到表達水平和蛋白質(zhì)長度的的影響。

    表3 菊葉香藜及其近緣種psbA基因的密碼子偏好性基本指標

    表4 CUSP和CondoW程序分析菊葉香藜psbA基因的密碼子偏好性

    圖5 GC3和GC12中性繪圖結(jié)果

    圖6 GC3s和ENC繪圖結(jié)果

    2.1.9 菊葉香藜psbA基因系統(tǒng)發(fā)生樹結(jié)果。由菊葉香藜及其近緣物種的psba完整序列生成的系統(tǒng)進化樹可知(圖7),系統(tǒng)樹上聚為兩大支,藜科和莧科各聚為一大支,說明在藜科和莧科中,psbA基因存在差異。而對于藜科這一支來說,psbA基因在藜科各屬之間差異相對較大;各進化支部分種間自展值為100%,說明psbA序列對于種的鑒定存在一定的局限性。菊葉香藜原為藜科藜屬植物,但在近年來的藜屬與刺藜屬的爭議中,被劃為藜科刺藜屬中,從圖7中我們可知,菊葉香藜與藜屬植物分別聚為一支,正好與形態(tài)學分類上的觀點一致。

    圖7 菊葉香藜psbA基因系統(tǒng)發(fā)生樹結(jié)果(“●”為菊葉香藜)

    3 討論

    菊葉香藜psbA基因編碼序列長度為1059bp,GC含量為41%,共編碼353個氨基酸,最多的為丙氨酸(A),為35個(9.9%),不含有賴氨酸,符合psbA基因的特征。二級結(jié)構(gòu)包含α-螺旋(57.51%),β-折疊(4.82%),β-轉(zhuǎn)角(37.68%)。psbA 基因編碼蛋白為疏水性蛋白,包含7個跨膜區(qū)域,是非酶類轉(zhuǎn)運蛋白。psbA基因密碼子偏好性水平相對較弱,主要受到選擇作用、表達水平和蛋白質(zhì)長度的影響,該結(jié)果與尚明照等[12]研究結(jié)果一致,為進一步研究影響psbA基因密碼子偏好性的因素提供依據(jù)。在同義密碼子中,psbA編碼序列更偏好使用以 A/T 結(jié)尾的密碼子,其中,NNT>NNA>NNC>NNG,NNT遠大于NNC,與侯惠靜[13]研究結(jié)果不一致,與侯士昌等[14]研究結(jié)果一致。系統(tǒng)發(fā)生樹的結(jié)果證明菊葉香藜與藜屬植物存在差異,支持將其劃歸到刺藜屬中。

    猜你喜歡
    預測出密碼子氨基酸
    密碼子與反密碼子的本質(zhì)與拓展
    月桂酰丙氨基酸鈉的抑菌性能研究
    10種藏藥材ccmFN基因片段密碼子偏好性分析
    中成藥(2018年7期)2018-08-04 06:04:10
    UFLC-QTRAP-MS/MS法同時測定絞股藍中11種氨基酸
    中成藥(2018年1期)2018-02-02 07:20:05
    吸引力無法則
    一株Nsp2蛋白自然缺失123個氨基酸的PRRSV分離和鑒定
    量體薦衣
    嗜酸熱古菌病毒STSV2密碼子偏嗜性及其對dUTPase外源表達的影響
    氨基酸分析儀測定玉米漿中17種游離氨基酸的不確定度評定
    閱讀理解沙場點兵
    亚洲欧美激情在线| 久久久国产成人免费| 成年人黄色毛片网站| 精品欧美国产一区二区三| 波多野结衣一区麻豆| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 在线观看免费日韩欧美大片| 在线观看免费日韩欧美大片| 在线观看免费午夜福利视频| 成人国语在线视频| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 亚洲一区二区三区色噜噜| 午夜a级毛片| 亚洲九九香蕉| 99精品久久久久人妻精品| 制服人妻中文乱码| 欧美精品啪啪一区二区三区| 久久久久亚洲av毛片大全| 免费在线观看完整版高清| 一夜夜www| 精品无人区乱码1区二区| 精品国产乱子伦一区二区三区| 老司机深夜福利视频在线观看| 纯流量卡能插随身wifi吗| 99热只有精品国产| 老鸭窝网址在线观看| 十分钟在线观看高清视频www| 9色porny在线观看| 亚洲成人免费电影在线观看| 色综合亚洲欧美另类图片| 精品免费久久久久久久清纯| 少妇的丰满在线观看| 看黄色毛片网站| 激情视频va一区二区三区| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 亚洲av熟女| e午夜精品久久久久久久| 免费在线观看日本一区| 亚洲一区二区三区色噜噜| 国产精品,欧美在线| 狠狠狠狠99中文字幕| 女人被狂操c到高潮| 精品高清国产在线一区| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产精品亚洲av一区麻豆| 男女之事视频高清在线观看| 精品国产一区二区久久| 9191精品国产免费久久| 此物有八面人人有两片| 天天添夜夜摸| 老司机午夜福利在线观看视频| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 自线自在国产av| 欧美激情极品国产一区二区三区| aaaaa片日本免费| 看黄色毛片网站| 日韩欧美国产一区二区入口| 国产伦人伦偷精品视频| 国产成人啪精品午夜网站| 岛国在线观看网站| 亚洲视频免费观看视频| 后天国语完整版免费观看| 9色porny在线观看| 自线自在国产av| 成人亚洲精品一区在线观看| 亚洲人成伊人成综合网2020| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产免费av片在线观看野外av| av网站免费在线观看视频| 老司机午夜福利在线观看视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 久久性视频一级片| 精品国产乱子伦一区二区三区| 国产精品国产高清国产av| 午夜福利欧美成人| 国产成人影院久久av| 国产人伦9x9x在线观看| 国产99白浆流出| 国产欧美日韩精品亚洲av| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲在线自拍视频| 此物有八面人人有两片| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产亚洲欧美精品永久| 一二三四在线观看免费中文在| 两个人免费观看高清视频| av超薄肉色丝袜交足视频| 亚洲国产精品久久男人天堂| 在线观看免费视频日本深夜| 亚洲男人天堂网一区| 给我免费播放毛片高清在线观看| 精品高清国产在线一区| 无遮挡黄片免费观看| 国产亚洲精品久久久久5区| 最新在线观看一区二区三区| 97人妻天天添夜夜摸| 一区福利在线观看| 黄片大片在线免费观看| 久久国产亚洲av麻豆专区| 久久人人97超碰香蕉20202| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 色综合婷婷激情| 免费看a级黄色片| 久久精品人人爽人人爽视色| 99久久精品国产亚洲精品| 国产免费男女视频| 啦啦啦免费观看视频1| 男女之事视频高清在线观看| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 女性被躁到高潮视频| 国产不卡一卡二| 夜夜爽天天搞| 国内精品久久久久精免费| 老司机靠b影院| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 无人区码免费观看不卡| 少妇熟女aⅴ在线视频| 国产又爽黄色视频| 久久午夜亚洲精品久久| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 午夜a级毛片| 久久精品成人免费网站| 我的亚洲天堂| 国产成人系列免费观看| 中国美女看黄片| 日韩欧美国产在线观看| 在线观看www视频免费| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 女人精品久久久久毛片| 欧美不卡视频在线免费观看 | 亚洲 国产 在线| 露出奶头的视频| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 多毛熟女@视频| 日本黄色视频三级网站网址| 免费观看人在逋| 欧美另类亚洲清纯唯美| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲av美国av| 欧美色欧美亚洲另类二区 | 一区二区三区精品91| 欧美最黄视频在线播放免费| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 波多野结衣一区麻豆| 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产xxxxx性猛交| 色精品久久人妻99蜜桃| 色播在线永久视频| 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 99riav亚洲国产免费| 中文字幕久久专区| av在线播放免费不卡| 亚洲人成电影观看| 国产精品亚洲美女久久久| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 亚洲人成电影观看| 91九色精品人成在线观看| 男人舔女人下体高潮全视频| 午夜精品久久久久久毛片777| 99久久99久久久精品蜜桃| 日本欧美视频一区| 欧美成狂野欧美在线观看| 91精品国产国语对白视频| 亚洲少妇的诱惑av| 亚洲五月婷婷丁香| 无限看片的www在线观看| 丰满的人妻完整版| 女人被狂操c到高潮| 女同久久另类99精品国产91| 黄色视频,在线免费观看| 午夜福利成人在线免费观看| 久久久久久人人人人人| 色播亚洲综合网| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产av又大| 午夜久久久久精精品| 国产99白浆流出| 俄罗斯特黄特色一大片| 制服人妻中文乱码| 欧美在线黄色| 两性夫妻黄色片| 一级毛片女人18水好多| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 怎么达到女性高潮| avwww免费| 一本久久中文字幕| 亚洲一区二区三区不卡视频| 亚洲熟妇熟女久久| 亚洲精品国产一区二区精华液| av免费在线观看网站| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 免费不卡黄色视频| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 校园春色视频在线观看| 老司机靠b影院| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 看黄色毛片网站| av视频免费观看在线观看| 亚洲人成电影免费在线| 精品不卡国产一区二区三区| 国产亚洲精品久久久久5区| 国产精品 欧美亚洲| 久久婷婷成人综合色麻豆| 亚洲无线在线观看| 午夜久久久在线观看| 久久久久久免费高清国产稀缺| 制服丝袜大香蕉在线| 久久国产精品人妻蜜桃| 一区福利在线观看| 女人被狂操c到高潮| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 怎么达到女性高潮| av在线播放免费不卡| 中文字幕人妻熟女乱码| 女同久久另类99精品国产91| 午夜福利一区二区在线看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 亚洲男人天堂网一区| 99久久精品国产亚洲精品| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 午夜免费成人在线视频| 99精品久久久久人妻精品| 亚洲av五月六月丁香网| 丝袜美腿诱惑在线| 一级毛片精品| 1024香蕉在线观看| 女人被狂操c到高潮| 亚洲专区国产一区二区| 满18在线观看网站| 黄色a级毛片大全视频| 久久香蕉精品热| 亚洲成人国产一区在线观看| 午夜精品在线福利| 成人精品一区二区免费| 国产成人系列免费观看| 夜夜爽天天搞| 国产成人av激情在线播放| 国产精品99久久99久久久不卡| 国产主播在线观看一区二区| 禁无遮挡网站| 热re99久久国产66热| 在线观看免费视频网站a站| 可以在线观看的亚洲视频| 又大又爽又粗| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 桃红色精品国产亚洲av| 一进一出抽搐动态| 欧美中文综合在线视频| 一级黄色大片毛片| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 日韩欧美一区视频在线观看| 久久香蕉国产精品| 国产麻豆成人av免费视频| 日日夜夜操网爽| 老汉色∧v一级毛片| 国产精品久久久av美女十八| 成人免费观看视频高清| 99久久精品国产亚洲精品| 超碰成人久久| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲在线自拍视频| 97碰自拍视频| 午夜亚洲福利在线播放| 色综合欧美亚洲国产小说| 黄色成人免费大全| 亚洲久久久国产精品| 国产极品粉嫩免费观看在线| 在线国产一区二区在线| 波多野结衣高清无吗| 性色av乱码一区二区三区2| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲国产精品合色在线| 男人舔女人下体高潮全视频| 免费观看人在逋| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 久久热在线av| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 国产成人精品久久二区二区91| 国产单亲对白刺激| 久久国产精品影院| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 黄色片一级片一级黄色片| 欧美乱色亚洲激情| 午夜福利一区二区在线看| 制服诱惑二区| 亚洲av片天天在线观看| av欧美777| 99riav亚洲国产免费| 怎么达到女性高潮| 亚洲精品一区av在线观看| 黄频高清免费视频| 9191精品国产免费久久| 亚洲av电影在线进入| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 1024香蕉在线观看| 91大片在线观看| 男女下面进入的视频免费午夜 | 久久午夜亚洲精品久久| 在线观看免费视频日本深夜| 丝袜人妻中文字幕| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 男女之事视频高清在线观看| 无限看片的www在线观看| 日韩视频一区二区在线观看| 成人精品一区二区免费| 一个人免费在线观看的高清视频| 亚洲国产欧美网| 老司机靠b影院| 亚洲av熟女| 亚洲午夜理论影院| 久久久久久大精品| 中文字幕高清在线视频| 色综合站精品国产| 精品高清国产在线一区| 嫩草影院精品99| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 欧美乱码精品一区二区三区| 丝袜美腿诱惑在线| 国产免费男女视频| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产精品亚洲美女久久久| 嫩草影院精品99| 国产成人精品久久二区二区免费| 欧美激情极品国产一区二区三区| 一级毛片高清免费大全| 精品久久久久久久毛片微露脸| 精品久久久久久久人妻蜜臀av | 午夜成年电影在线免费观看| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 日韩欧美在线二视频| 美女午夜性视频免费| 中文字幕色久视频| 美女午夜性视频免费| 91麻豆av在线| av在线播放免费不卡| 亚洲av电影不卡..在线观看| 日韩精品免费视频一区二区三区| 中出人妻视频一区二区| 一区福利在线观看| 国产片内射在线| 在线永久观看黄色视频| 级片在线观看| 亚洲久久久国产精品| svipshipincom国产片| 久热这里只有精品99| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产不卡一卡二| 欧美黄色淫秽网站| av免费在线观看网站| www.999成人在线观看| 国产麻豆69| 九色亚洲精品在线播放| 国产精品 国内视频| 激情在线观看视频在线高清| 国产成人精品无人区| 天天一区二区日本电影三级 | 国产一级毛片七仙女欲春2 | 麻豆一二三区av精品| 欧美激情极品国产一区二区三区| 亚洲av成人一区二区三| 色综合站精品国产| 美国免费a级毛片| 免费观看人在逋| 一本综合久久免费| 满18在线观看网站| 一级a爱视频在线免费观看| 久久久久久久久久久久大奶| 精品不卡国产一区二区三区| 后天国语完整版免费观看| 日本黄色视频三级网站网址| 在线观看日韩欧美| 亚洲 国产 在线| 亚洲人成伊人成综合网2020| 欧美av亚洲av综合av国产av| 欧美中文综合在线视频| 亚洲,欧美精品.| 国产成人av激情在线播放| 十八禁网站免费在线| 午夜免费鲁丝| 一个人免费在线观看的高清视频| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| av超薄肉色丝袜交足视频| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 久久性视频一级片| 大型黄色视频在线免费观看| 操美女的视频在线观看| 亚洲第一av免费看| 久久久久精品国产欧美久久久| 国产私拍福利视频在线观看| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产一区二区在线av高清观看| 日日爽夜夜爽网站| 精品国产乱码久久久久久男人| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 国产高清视频在线播放一区| 两人在一起打扑克的视频| 成人三级黄色视频| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 级片在线观看| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲av成人一区二区三| 亚洲一码二码三码区别大吗| 午夜两性在线视频| 日本一区二区免费在线视频| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 岛国视频午夜一区免费看| 国产精品电影一区二区三区| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 美女国产高潮福利片在线看| 国产精品久久视频播放| 12—13女人毛片做爰片一| 国产麻豆69| 美女免费视频网站| 级片在线观看| 亚洲中文av在线| 亚洲午夜理论影院| cao死你这个sao货| 国产99白浆流出| 人人妻人人澡人人看| 国产男靠女视频免费网站| 欧美成人免费av一区二区三区| 精品一品国产午夜福利视频| 欧美一级a爱片免费观看看 | 99精品欧美一区二区三区四区| 91精品国产国语对白视频| 久久中文字幕一级| 久热爱精品视频在线9| 大香蕉久久成人网| 少妇粗大呻吟视频| 成人18禁在线播放| 国产不卡一卡二| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 一级作爱视频免费观看| 久久天堂一区二区三区四区| 高清在线国产一区| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 午夜日韩欧美国产| 满18在线观看网站| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 亚洲中文日韩欧美视频| 国产欧美日韩精品亚洲av| 九色国产91popny在线| 亚洲视频免费观看视频| 黄片大片在线免费观看| 伦理电影免费视频| 搡老岳熟女国产| 亚洲国产中文字幕在线视频| 久久亚洲精品不卡| 国产亚洲av嫩草精品影院| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 91av网站免费观看| 啦啦啦观看免费观看视频高清 | 久久伊人香网站| 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 波多野结衣高清无吗| 免费在线观看亚洲国产| 午夜福利18| 成人三级做爰电影| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 日韩欧美在线二视频| 黄色女人牲交| 91大片在线观看| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 日日夜夜操网爽| 婷婷六月久久综合丁香| 日本三级黄在线观看| 久久天堂一区二区三区四区| 国产精品一区二区免费欧美| 99国产精品免费福利视频| 久久久久久久久免费视频了| 日本精品一区二区三区蜜桃| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 色综合婷婷激情| 日韩欧美免费精品| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 啪啪无遮挡十八禁网站| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 亚洲一码二码三码区别大吗| 精品福利观看| 色精品久久人妻99蜜桃| 亚洲电影在线观看av| 两性夫妻黄色片| 一进一出抽搐gif免费好疼| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 99国产极品粉嫩在线观看| 十分钟在线观看高清视频www| 亚洲国产精品999在线| 精品午夜福利视频在线观看一区| 久热这里只有精品99| 成人18禁在线播放| 男女床上黄色一级片免费看| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 天堂√8在线中文| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 啦啦啦 在线观看视频| 亚洲色图综合在线观看| 免费高清视频大片| 最近最新中文字幕大全电影3 | 涩涩av久久男人的天堂| 夜夜夜夜夜久久久久| 婷婷精品国产亚洲av在线| 女人精品久久久久毛片| 村上凉子中文字幕在线| 中出人妻视频一区二区| 国产真人三级小视频在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 少妇被粗大的猛进出69影院| svipshipincom国产片| 黄片小视频在线播放| 一级毛片精品| 90打野战视频偷拍视频| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 一级毛片女人18水好多| 亚洲男人天堂网一区| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲视频免费观看视频| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产又爽黄色视频| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 免费在线观看完整版高清| 精品久久久久久久久久免费视频| 久久精品影院6| 在线国产一区二区在线| 精品国产乱码久久久久久男人| 又黄又爽又免费观看的视频| 一级,二级,三级黄色视频| 欧美亚洲日本最大视频资源| 精品一区二区三区四区五区乱码| 国产成人系列免费观看| 国产精品 欧美亚洲| 午夜免费观看网址| 精品国内亚洲2022精品成人| 变态另类丝袜制服| 亚洲av成人一区二区三| 国产精品二区激情视频| 窝窝影院91人妻| 久久久久久久午夜电影| 成人三级做爰电影| 久久天堂一区二区三区四区| 国产高清videossex| 两个人免费观看高清视频| 国产精品 欧美亚洲| 久久香蕉精品热| 99香蕉大伊视频| 麻豆成人av在线观看| 成年人黄色毛片网站| 999久久久国产精品视频| 免费在线观看亚洲国产| 亚洲国产看品久久| 亚洲欧美激情综合另类| av天堂在线播放| av福利片在线| 成人av一区二区三区在线看| 久久香蕉激情| 此物有八面人人有两片| 无人区码免费观看不卡| 91成人精品电影| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 久久中文看片网| 亚洲中文日韩欧美视频| 高清黄色对白视频在线免费看| 亚洲专区国产一区二区| 久99久视频精品免费| 人人妻人人澡欧美一区二区 | 成人av一区二区三区在线看| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 欧美日本亚洲视频在线播放| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 精品久久久久久久久久免费视频| 亚洲久久久国产精品| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 黄色视频,在线免费观看| 色老头精品视频在线观看| 久久久久国内视频| 日本黄色视频三级网站网址| 久9热在线精品视频| 精品人妻1区二区| 久久久国产成人精品二区| 国产又色又爽无遮挡免费看| 两个人看的免费小视频| 久久久国产精品麻豆| 老司机深夜福利视频在线观看| 视频在线观看一区二区三区| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 国产成人欧美在线观看| 婷婷六月久久综合丁香| 一级毛片精品| 国产高清有码在线观看视频 | 欧美日韩乱码在线| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 男人舔女人的私密视频| 久久草成人影院|